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番石榴叶总黄酮对慢性胰腺炎小鼠纤维化的影响
目的:探讨番石榴叶总黄酮(total flavonoids from Psidium guajava leaves,TFPGL)对慢性胰腺炎(chronic pancreatitis,CP)小鼠纤维化的影响及其机制.方法:将50只C57BL/6小鼠随机均分为正常组,CP模型组,oxidized ATP (oxATP)组,TFPGL低、高剂量组.后4组小鼠腹腔注射雨蛙素50μg·kg-·1h-1(溶于200μL生理盐水),每天6次,每周3d,连续6周,建立慢性胰腺炎小鼠模型.6周后,oxATP组腹腔注射oxATP(15μg·kg-·1d-1,溶于200μL生理盐水)2周,TFPGL低、高剂量组分别予以TFPGL 0.186,0.372g·kg-1·d-1灌胃2周.同时,正常组小鼠腹腔注射与模型组等体积、等频率的生理盐水.苏木素-伊红(HE)染色评估胰腺损伤程度;天狼星红染色检测胰腺组织胶原含量;免疫组化检测α-平滑肌肌动蛋白(α-smooth muscle actin,α-SMA),核苷酸结合寡聚化结构域样受体3(nucleotide binding oligomerization domain-like receptor 3,NLRP3),半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-1(cysteinyl aspartate specific proteinase-1,Caspase-1)的蛋白表达水平;酶联免疫吸附法测定胰腺组织中IL-1β(interleukin-1β),IL-18水平.结果:与正常组比较,雨蛙素注射后胰腺损伤加重(P <0.01),Caspase-1,NLRP3,α-SMA,IL-1β,IL-18水平升高(P<0.01).天狼星红染色显示胰腺组织细胞周围胶原Ⅰ(ColⅠ),胶原Ⅲ(ColⅢ)含量较正常组升高(P<0.01).与模型组比较,oxATP组及TFPGL低、高剂量组炎症损伤及纤维化程度均减轻,表现为天狼星红染色程度减轻(P<0.05,P<0.01),Caspase-1,NLRP3,α-SMA,IL-1β,IL-18水平均降低(P<0.05,P<0.01).结论:TFPGL可通过抑制P2X7R介导NLRP3炎性体信号途径活化显著减轻慢性胰腺炎模型小鼠的慢性炎症及纤维化程度.
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番石榴叶总黄酮抑制泡沫细胞形成及LOX-1表达的实验研究
目的:研究番石榴叶总黄酮抑制泡沫细胞形成及 LOX-1表达的作用。方法建立 T HP-1单核-巨噬细胞源性泡沫细胞模型,根据CCK-8法测定的番石榴叶总黄酮对该细胞的安全浓度范围,将配制的番石榴总黄铜溶液在其安全范围内选取低、中、高三个剂量组,以无血清培养液的空白对照组及ox-LDL 模型组为对照。采用油红O染色观察细胞内脂质堆积情况,酶偶联比色法检测细胞内总胆固醇含量,Western blot法检测 LOX-1的蛋白表达水平。结果三个剂量组细胞内总胆固醇含量均低于模型组(P<0.05),并随番石榴叶总黄酮浓度升高而下降;三个剂量组的 LOX-1蛋白表达均低于模型组(P<0.05),抑制作用随剂量升高而增强。结论番石榴叶总黄酮通过抑制 LOX-1的表达,减少巨噬细胞摄取ox-LDL ,抑制泡沫细胞形成,从而起到抗动脉粥样硬化的作用。