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HPLC-TOF/MS对肝力保胶囊化学成分的快速鉴别
目的:运用高效液相色谱-高分辨飞行时间质谱(HPLC-TOF/MS)联用技术快速鉴别肝力保胶囊中化学成分.方法:色谱分离采用SHISEIDO MG C18色谱柱(3.0 mm×100 mm,3μm);流动相0.1％甲酸水(A)-乙腈(B),梯度洗脱(0 ～ 10min,5％～20％B;10～30 min,20％ ～70％ B),柱温25℃,流速0.6 mL· min-1,柱后分流比2∶1.质谱定性采用飞行时间质谱,电喷雾离子源(ESI),正负离子模式扫描(m/z 100 ～1 000).结果:一次性鉴别出肝力保胶囊中30种化学成分.结论:该研究比较全面地阐明了肝力保胶囊的化学组成,为该复方的药效学物质基础研究和质量控制奠定了基础.
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HPLC法同时测定肝力保胶囊中绿原酸及虎杖苷的含量
目的 建立HPLC法同时测定肝力保胶囊中绿原酸和虎杖苷的含量.方法 色谱柱为Agilent ZORBAX SB-C18,流动相为0.1％甲酸-乙腈梯度洗脱,流速:1.0 ml ·min-1,柱温:25 ℃,检测波长:327 nm,进样量5μl.结果 绿原酸在1.365 ～68.25 μg·ml-1(r=1.000)范围内线性关系良好,虎杖苷4.00～200.00 μg·ml-1(r=1.000)范围内线性关系良好;日内和日间精密度均小于2％(n=3);绿原酸平均回收率为100.81％(RSD=1.74％,n=6),虎杖苷平均回收率99.87％(RSD =1.30％,n=6).结论 该法简便、结果准确、重复性好,可用于肝力保胶囊中绿原酸和虎杖苷的质量控制.
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基于网络药理学的肝力保胶囊保肝作用机制研究
目的 对肝力保胶囊进行网络药理学研究,探讨肝力保胶囊保肝的作用机制.方法 选取肝力保胶囊化学物质组成中的活性成分,采用反向药效团匹配的方法预测活性成分的作用靶点;在此基础上,采用Cytoscape软件和String数据库分别构建肝力保胶囊"活性成分-作用靶点"的分子调控网络及蛋白-蛋白相互作用网络,后采用DAVID数据库对靶点进行基因功能和信号通路分析.结果 筛选得到活性化合物19个,涉及作用靶点88个.网络分析结果表明,肝力保胶囊主要通过代谢过程、调节细胞死亡和对脂质的应答等生物过程,以及调节肿瘤坏死因子(TNF)、FoxO、Ras、ErbB、低氧诱导因子-1(HIF-1)和Toll样受体(TLR)信号通路来发挥保肝作用.结论 肝力保胶囊保肝作用具有多成分、多靶点、多通路的特点,其可能通过调节细胞死亡、TNF、FoxO、Ras等相关通路发挥作用.
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高效液相色谱法测定肝力保胶囊中苦参碱及槐定碱的含量
目的 建立高效液相色谱法测定肝力保胶囊中苦参碱及槐定碱含量.方法 使用色谱柱Agilent NH2(4.6mm×250 mm,5 μm),流动相为1％磷酸∶无水乙醇∶乙腈=10∶22∶68(V/V/V),流速0.8 ml/min,柱温25℃,检测波长210 nm.结果 苦参碱在5.21～156.3 μg/ml(r=1),槐定碱在5.29～158.7 μg/ml (r=0.999 9)浓度范围内呈良好线性关系,其回归方程分别为Y=9.586 1X+1.003 8和Y=7.604 3X-5.920 1,回收率分别为98.73％(RSD=3.67％)、100.10％ (RSD=2.24％).15批肝力保胶囊中苦参碱含量为(30.13±0.19)～(44.70±0.17) mg/g,槐定碱含量为(21.60±0.25)～(52.07±0.11) mg/g.结论 高效液相色谱法简便、准确,重复性好,可用于肝力保胶囊的进一步质量控制.
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优化的高效毛细管电泳法测定肝力保胶囊中苦参碱和氧化苦参碱的含量
目的:建立优化的高效毛细管电泳法,并将其应用于测定肝力保胶囊中苦参碱和氧化苦参碱的含量.方法:采用Agilent3DCE高效毛细管电泳仪、未涂渍熔融石英毛细管(68.5 cm×75μm,有效长度60 cm),缓冲液50 mmol/L Na2 HPO4(水:甲醇=4∶1,pH=5.5),运行电压25 kV,温度25℃,检测波长214 nm,以氨茶碱为内标,建立优化的高效毛细管电泳法,并测定3批次肝力保胶囊中苦参碱和氧化苦参碱的含量.结果:苦参碱和氧化苦参碱均能够基线分离,符合含量测定要求;回归方程分别为Y=222.80X+3.635 3(r=0.999 9)和Y=213.02X+34.268 6(r=0.999 9);线性范围分别为33.98～339.8μg/ml和47.35～473.5μg/ml.苦参碱和氧化苦参碱的日内和日间精密度(RSD)均＜3.0%,低检测限分别为13.60μg/ml和18.90 μg/ml,加样回收率结果分别为102.3%(RSD=0.57%,n=3)和101.1%(RSD=0.41%,n=3).3批样品中苦参碱的含量(%)分别为2.78±0.043、2.50±0.069、2.56±0.040;没有检测到氧化苦参碱的峰.结论:优化的高效毛细管电泳法稳定简便,结果可靠,能够用于测定苦参碱和氧化苦参碱含量;优化的高效毛细管电泳法测定的苦参碱含量可作为肝力保胶囊质量控制指标.
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反相高效液相色谱法测定肝力保胶囊中虎杖苷、白藜芦醇和大黄素的含量
肝力保胶囊是本院自制制剂,由茵陈、虎杖、茯苓、黄芪及苦参碱提取物组成,临床用于各种急、慢性病毒性肝炎治疗,对肝癌所致肝脾肿大、肝硬化腹水等症状有辅助疗效.虎杖是蓼科植物虎杖(Polygonum cuspidatum Sieb.et Zucc.)的干燥根和根茎,具有利湿退黄、清热解毒、散瘀止痛、止咳化痰功效,用于湿热黄疸、淋浊、带下、风湿痹痛、痈肿疮毒、水火烫伤、肺热咳嗽等[1].虎杖的有效成分包括蒽醌类、二苯乙烯类化合物、鞣酸及黄酮类等.蒽醌类化合物主要包括大黄素、大黄酚、大黄素甲醚等,具有抗菌、抗炎、抗病毒、抑制血小板聚集,改善微循环及抗肿瘤等作用[2].
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反相高效液相色谱法测定肝力保胶囊中虎杖苷的含量
肝力保胶囊是我院自制制剂,由茵陈、虎杖、茯苓、黄芪及苦参碱提取物组成,用于各种急、慢性病毒性肝炎治疗,对肝癌所致肝脾肿大、肝硬化腹水等症状有辅助治疗作用.虎杖是廖科植物虎杖(Polygonum cuspidatum Sieb.et Zucc)的干燥根和根茎,具有利湿退黄、清热解毒、散瘀止痛、止咳化痰功效,用于湿热黄疸、淋浊、带下、风湿痹痛、痈肿疮毒、水火烫伤、肺热咳嗽等[1].虎杖主要化学成分包括游离蒽醌及蒽醌苷类、白藜芦醇及虎杖苷2种芪类化合物、鞣质及黄酮类等[2].现代药理学研究表明,虎杖苷有保护心肌细胞和血管平滑肌细胞、抗血小板聚集、改善微循环等作用,能减轻多种因素造成的组织器官损伤,具有保护肝细胞、降血脂及抗脂质过氧化等作用.
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高效液相色谱法测定肝力保胶囊中毛蕊异黄酮的含量
目的：建立高效液相色谱法测定肝力保胶囊中毛蕊异黄酮的质量分数。方法色谱柱为ZORBA Bonus-RP(4.6 mm×260 mm,5μm),流动相为乙腈-0.1%(体积分数)甲酸,梯度洗脱,流速为1.0 mL/min,柱温为25℃,检测波长为260 nm,进样量为10μL。结果毛蕊异黄酮在14.7~235.2μg/mL范围内呈良好线性关系,其回归方程为Y=34.077X-6.2958,r=1,回收率为95.08%( RSD=3.39%)。6批肝力保胶囊中毛蕊异黄酮质量分数在62.63~181.96μg/g之间。结论该方法简便、快速、准确,可用于肝力保胶囊的质量控制。
