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基于成分敲出策略辨识四制香附抗痛经的主要效应成分
目的:基于成分敲出策略对四制香附抗痛经的主要药效成分进行初步辨识,为该药材的后续研究提供参考.方法:采用硅胶柱色谱技术结合制备高效液相色谱法(HPLC)对四制香附石油醚部位中具有抗痛经作用的活性成分α-香附酮(A),香附烯酮(B)和sugeonol(C)分别按照敲出A,B,C,AB,AC,BC,ABC的方法不断敲出,从而得到各目标敲出成分A+,B+,C+,AB+,AC+,BC+,ABC+及其相应的阴性样品A-,B-,C-,AB-,AC-,BC-,ABC-,利用HPLC对各目标敲出成分及其阴性样品进行检测,通过小鼠离体子宫平滑肌收缩试验,探究各敲出目标成分及其对应阴性样品、石油醚部位对小鼠离体子宫平滑肌的影响.结果:α-香附酮、香附烯酮和sugeonol这3种成分分别组合敲出的目标成分的抗痛经作用比单独敲出的目标成分强;与石油醚部位比较,阴性样品A-,B-,C-抗痛经作用明显下降;目标成分AB+的抗痛经作用强于敲出目标成分后的阴性样品AB-;阴性样品ABC-仍具有抗痛经作用;各敲出目标成分与其阴性样品的平均抑制率之和均比石油醚部位的平均抑制率大.结论:在中药整体水平上,证明α-香附酮、香附烯酮和sugeonol这3种成分都是香附抗痛经作用的活性成分,并且三者之间可能存在着协同作用,其中α-香附酮与香附烯酮是香附抗痛经作用的主要药效物质,除了目标成分α-香附酮、香附烯酮和sugeonol外,香附中还存在着其他的抗痛经活性成分,各敲出目标成分与其阴性样品(其他成分的混合物)之间均可能存在着拮抗作用.
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混料均匀设计优化四制香附活性成分配伍
目的:研究四制香附主要活性成分的配伍,提高活性成分抗痛经作用的生物效应.方法:采用混料均匀设计法拟定四制香附中3种主要活性成分香附烯酮,α-香附酮和sugeonol的配伍方案,运用Powerlab生物信号采集系统,记录小鼠离体子宫平滑肌的活动,采用平均张力变化为观察指标,探讨各活性成分与小鼠离体子宫抑制率之间的相关性,优化3种成分的配比关系.结果:当香附烯酮-α-香附酮-sugeonol(43∶ 41∶16)时,样品对由缩宫素引起的小鼠离体子宫痉挛性收缩的抑制率高.结论:香附烯酮,α-香附酮和sugeonol之间存在明显的交互作用,配伍后的样品能显著提高抗痛经作用的生物效应,为四制香附抗痛经作用新剂型的研发及其临床应用提供实验依据.
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四制香附贴膏灸剂在大鼠体内的血液流变性与体外透皮特性分析
目的:探讨四制香附贴膏灸剂对缩宫素所致痛经模型大鼠血液流变性的影响,并初步探究其体外透皮特性.方法:SD大鼠随机分为空白组、模型组、四制香附贴膏灸剂组(贴膏灸剂组)及四制香附石油醚部位浸膏组(浸膏组).通过灌胃己烯雌酚增敏,观察腹腔注射缩宫素后30 min内大鼠扭体发生的潜伏期及次数,测试各组大鼠的全血黏度和血浆黏度;采用改良的Franz扩散池,以小鼠离体皮肤为渗透屏障进行体外透皮试验,利用HPLC同时测定α-香附酮和香附烯酮的体外透皮渗透量,分别对四制香附贴膏灸剂组和不加发热辅助材料的四制香附贴膏剂组进行研究.结果:贴膏灸剂组和浸膏组均显著延长大鼠扭体反应发生的潜伏期,显著减少30 min内大鼠扭体发生次数,且贴膏灸剂组优于浸膏组;贴膏灸剂组和浸膏组均可显著降低痛经模型大鼠的全血黏度和血浆黏度,贴膏灸剂组更佳.四制香附贴膏灸剂中香附烯酮和α-香附酮24 h内的渗透速率分别为58.58,45.42 μg·cm-2·h-1,均高于不加发热辅助材料的贴膏剂组,透皮行为符合Higuchi方程.结论:四制香附贴膏灸剂可显著提高四制香附抗痛经有效成分的透皮释药性能,对大鼠痛经模型有良好的镇痛作用,可显著改善痛经大鼠的血液流变性.
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基于GA-ANN模式识别技术的中药效应成分筛选研究
目的:应用基于遗传算法(GA)的BP神经网络(BP-ANN)模型和平均影响值(MIV)算法对中药效应成分进行筛选.方法:以四制香附为模型药物,通过MATLAB 7.14软件中的遗传算法和神经网络工具箱,建立GA-ANN模型,筛选出四制香附治疗痛经功效的主要效应成分.结果:四制香附有效成分中治疗痛经的前4位为:在体动物模型中为x13、x15、x16、x7峰;离体模型中为x15、x13、x16、x9峰.结论:运用GA-ANN算法与前期研究的PLS-ANN法分析结果相吻合,提示GA-ANN算法可有效的实现四制香附调经止痛有效成分的筛选.
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建昌帮四制香附对小鼠痛经模型的影响
目的 通过分析建昌帮四制香附、生香附及四制香附不同溶剂提取部位对小鼠痛经模型的药理作用,探讨建昌帮四制香附治疗痛经的有效部位.方法 采用系统溶剂提取法制备四制香附的不同溶剂提取部位,观察各提取部位对小鼠痛经模型的影响.结果 建昌帮四制香附、生香附及四制香附的石油醚部位、乙酸乙酯部位能显著减少小鼠扭体次数,与模型组对照有极显著性差异.结论 建昌帮四制法香附的镇痛作用优于生香附,且四制香附的石油醚、乙酸乙酯部位是治疗痛经的有效部位.
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基于高效液相色谱法的建昌帮四制香附指纹图谱相似度评价
目的:研究建昌帮四制香附炮制过程中炮制品HPLC图谱,并与生品香附、醋制香附的HPLC图谱进行相似度评价,从指纹图谱中各成分峰的变化探索四制香附的炮制特色及炮制工艺.方法:选用色谱柱为Diamonsil C18(250 mm×4.6mm,μm)；流动相:以甲醇-水二元梯度洗脱(0～ 10min:甲醇30％ ～ 70％,10～35min:甲醇70％～100％)；检测波长:250nm;流速1.0ml/min;进样量:20μl.采用“中药色谱指纹图谱相似度评价系统2004A版”进行评价.结果:12个香附样品指纹图谱与对照共有峰HPLC指纹图谱比较,中位数相关系数在0.806～0.979之间,均值相关系数在0.863～0.984之间.结论:香附不同炮制品指纹图谱相似度存在差异,综合比较分析含量、共有峰等因素可知建昌帮四制法为较优的炮制方法.
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彭银亭四制香附炮制工艺
目的:比较不同炮制方法其香附炮制品的品质.方法:采用浸出物含量测定和紫外分光光度法对香附的不同炮制品的主要成分α-香附酮进行比较,探讨香附的佳炮制工艺.结果:香附不同炮制方法所得水溶性浸出物含量和α-香附酮成分有明显差异.结论:彭银亭及文帮四制香附水溶性浸出物和α-香附酮成分含量优于醋炒法、醋煮法.
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"建昌帮"四制香附有效组分速效滴丸制备工艺研究
目的:研究并探讨"建昌帮"四制香附有效组分速效滴丸的制备工艺.方法:以水溶性速释基质、冷凝剂、药物与基质比例、基质种类、药液温度及冷却液温度等为考察因素,以滴丸硬度、圆整度、成型率、溶散时限、丸重差异等为考察指标,采用单因素和正交试验相结合的考察方法对建昌帮四制香附有效组分速效滴丸制备工艺进行研究.结果:终确定的制备工艺为以PEG-4000和PEG-6000的混合物作为基质,药物基质比为1:4.1,滴制温度为90～98℃之间,滴距为11cm.结论:所制备的速效滴丸具有制备简单、滴丸成型好、硬度良好及载药量适中等优点,结果科学合理,为"建昌帮"四制香附的临床推广应用奠定了基础.
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四制香附调经止痛物质基础研究
目的 探究建昌帮特色饮片四制香附调经止痛的物质基础.方法 采用系统溶剂提取法对香附进行分部位提取,从在体、离体和血液流变学三个层面对其活性成分进行测定,并采用NMR对其有效成分进行分析.结果 石油醚部位为香附调经止痛的有效部位,其有效成分有豆甾醇、胡萝卜苷、大黄素甲醚和十六烷酸.结论 本研究首次采用在体模型、离体模型和血液流变学指标三种方法同时评价建昌帮四制香附调经止痛效应,切入江西地方炮制品种,有利于江西传统炮制流派的传承与发展.
