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大孔吸附树脂纯化愈肾颗粒中总黄酮工艺
目的:研究大孔吸附树脂法纯化愈肾颗粒总黄酮佳工艺.方法:以总黄酮的比吸附量、解析率、洗脱率等为指标,选用7种大孔吸附树脂对愈肾颗粒总黄酮进行纯化.结果:HPD100型大孔吸附树脂对愈肾颗粒的总黄酮具有较好的分离纯化能力.佳工艺条件为2 BV的愈肾颗粒供试品溶液为上样量(含生药量为1 g·mL-1),吸附速率为1 BV·h-1,分别用水2BV、30％乙醇3 BV、50％乙醇4 BV洗脱,洗脱流速4 BV·h-1,合并30％乙醇和50％乙醇洗脱液,浓缩,即为纯化的总黄酮.结论:纯化后总黄酮含量提高到76％以上,HPD100型大孔吸附树脂可较好的纯化愈肾颗粒总黄酮.
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愈肾颗粒小复方对大鼠肾小球系膜细胞MMP-3/TIMP-1 mRNA表达的影响
目的:从基因水平探讨愈肾颗粒不同小复方对肾小球系膜细胞基质金属蛋白酶-3(MMP-3)及基质金属蛋白酶抑制物-1(TIMP-1)mRNA表达的影响,对具有延缓和防治肾小球硬化进程的有效药味探讨其作用机制.方法:将愈肾颗粒折方,并重组为益气活血通络(复方1号)、益气解毒活血(复方2号)、益气活血止血(复方3号)不同小复方.应用血清药理学方法,制取3组中药小复方及正常组的药理血清.采用体外培养法培养大鼠肾小球系膜细胞;应用ELISA法测定10%FBS组及血管紧张素Ⅱ组纤维连接蛋白(FN)、Ⅳ型胶原的含量;采用逆转录-聚合酶链反应技术(RT-PCR)观察各组间MMP-3及TIMP-1的mRNA的表达情况.结果:(1)血管紧张素Ⅱ组FN及Ⅳ型胶原的分泌量显著增加,同时与10%FBS组相比差异有统计学意义(P<0.05).(2)复方1号组对MMP-3有显著的促进作用,与病理组比较差异有统计学意义(P<0.05).其余各组虽有促进MMP-3分泌的趋势,但差异无统计学意义.(3)3组小复方对TIMP-1的影响差异无统计学意义.结论:(1)复方1号组有显著的促进MMP-3基因表达的作用.(2)复方1号组通过促进MMP-3的基因表达,从而发挥延缓和防治肾小球硬化的作用.(3)复方2号组与复方3号组对MMP-3的基因表达有促进趋势.
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愈肾颗粒对肾纤维化大鼠HGF BMP-7表达影响的机制研究
目的:探讨愈肾颗粒防治肾纤维化大鼠机制研究.方法:将大鼠按照性别、体重随机分为空白组,模型组、愈肾颗粒组、洛丁新组.运用腺嘌呤灌胃造模的方法建立实验性肾纤维化大鼠模型,采用光学显微镜、免疫组织化学方法,观察、检测各组肝细胞生长因子HGF、BMP-7的表达,24h后给药,观察各实验组21天,28天,42天肾组织HGF、BMP-7表达情况的变化.并采用病理图像分析系统.半定量分析HGF、BMP-7含量表达;结果:在28天、42天,洛丁新与愈肾颗粒两个治疗组的表达明显高于模型组同一实相,彼此之间无明显差异,都与模型组均有明显统计学意义,P<0.01或P<0.05;在21天、42天两个治疗组的表达明显高于模型组同一实相,彼此之间无明显差异,都与模型组均有明显统计学意义(P<0.01或P<0.05);结论:愈肾颗粒有效提高HGF、BMP-7蛋白水平的过低表达,从而改善肾纤维化,潜在的延缓了肾纤维化进程.
