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地黄饮子对能量障碍致SH-SY5Y细胞内质网应激的保护作用
目的:以葡萄糖剥夺致能量代谢障碍SH-SY5Y细胞为模型,探讨地黄饮子药物血清通过调节蛋白激酶R样内质网激酶(protein kinase r-like endoplasmic reticulum kinase,PERK)/真核细胞起始因子2α(eukaryotic initiation factor 2α,eIF2α)通路改善能量代谢障碍致SH-SY5Y细胞内质网应激的作用机制.方法:以成人临床用药量10倍剂量对SD大鼠灌胃给药,制备地黄饮子药物血清.SH-SY5Y细胞葡萄糖剥夺处理6h后,分别以0,1.25%,2.5%,5%,10%地黄饮子含药血清孵育.噻唑蓝(MTT)比色法检测细胞存活率,蛋白免疫印迹法(Western blot)检测PERK,eIF2α磷酸化水平,B淋巴细胞瘤-2(B-cell lymphoma-2,Bcl-2),Bcl-2相关X蛋白(Bcl-2-associated X protein,B ax)表达水平.Annexin V/碘化丙啶(PI)双染流式细胞术检测细胞凋亡率.结果:与模型组比较,地黄饮子药物血清能显著提高葡萄糖剥夺SH-SY5Y细胞的存活率(P<0.01),明显减少PERK和eIF2α磷酸化激活(P<0.05,P<0.01),提高Bcl-2水平和降低Bax表达量(P <0.05,P<0.01).抑制能量代谢障碍SH-SY5Y细胞凋亡率(P<0.01).结论:地黄饮子可以减少PERK/eIF2α通路的激活,抑制能量代谢障碍致内质网应激造成的细胞凋亡.