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复方健耳剂对国产DBA/2J小鼠耳蜗组织脑源性神经营养因子表达影响的初步研究
目的:研究中药复方健耳剂对小鼠耳蜗组织脑源性神经营养因子(BDNF)表达的影响,探讨其保护老年性耳蜗感音神经性损害机制.方法:选择断奶DBA/2J小鼠10只,随机分为对照组和中药组,各5只,对照组小鼠为常规饲料与日常饮水喂养;中药组小鼠为常规饲料与中药溶液喂养;至105d龄时两组同时终止实验,取出耳蜗,利用Real-Time PCR技术定量检测两组耳蜗组织BDNF的表达,并统计分析.结果:中药组BDNF的表达比对照组高(P＜0.01).结论:复方健耳剂对BDNF的表达影响可能是其有效对抗老年性耳蜗感音神经性损害的重要机制之一.
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复方健耳剂干预庆大霉素耳毒性致豚鼠毛细胞损害的实验研究
目的 探讨中药复方健耳剂干预豚鼠庆大霉素(gentamycin,GM)耳毒性致外毛细胞损害的作用及可能机制.方法 选择杂色成年豚鼠48只,随机分为正常对照组、GM对照组、复方健耳剂+GM组(简称中药+ GM组),每组16只,其中正常对照组按常规饲养至第11天期满;GM对照组按200 mg/(kg·d)剂量,每天分2次连续注射9天,第11天终止饲养;中药+ GM组按3.994 g/(kg·d)剂量(1/2人工灌服,1/2自动饮用),预先服用复方健耳剂10天,然后在继续服用中药同时开始注射每天同等剂量GM,连续9天,第11天终止饲养.所有动物期满取出耳蜗,其中每组10只动物用于全耳蜗基底膜铺片,琥珀酸脱氢酶染色,进行耳蜗毛细胞形态学观察,另外每组6只动物,利用Real-time PCR技术检测耳蜗组织硫氧还蛋白(Trx)-1、Trx-2、凋亡信号调节激酶1(apoptosis signal-regulating kinase 1,ASK1)mRNA表达量.结果 全耳蜗基底膜检查显示,正常对照组各回三排内、外毛细胞形态正常,数量完整,排列有序;GM对照组各回三排外毛细胞损毁严重,绝大部分细胞出现严重崩解不全,或凋亡缩小,第1回比其他各回损害较重(P＜0.01),但内毛细胞仍基本存在;中药+GM组各回三排外毛细胞除少量和散在崩解不全外,大多仍存留可辨,形态如常,内毛细胞仍保持完整,各回外毛细胞损毁状况明显少于GM对照组(P＜0.01).中药+GM组Trx-1、Trx-2 mRNA表达明显高于GM对照组(P＜0.01),ASK1 mRNA表达则明显低于GM对照组(P＜0.01).结论 一定剂量GM连续使用可造成豚鼠耳蜗外毛细胞严重损害,并以第1回明显,而且以外毛细胞为主要损害靶细胞.复方健耳剂具有防治GM耳毒性外毛细胞损害作用,其机制可能与其调控硫氧还蛋白系统,阻止ASK1依赖的细胞凋亡有关.
