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我国不同地区白木香核糖体DNA内转录间隔区碱基序列分析
目的:研究我国不同地区白木香核糖体DNA(rDNA)内转录间隔区(ITS)碱基序列的差异.方法:运用PCR法对白木香的ITS(包括ITS1,5.8S,ITS2)序列扩增后直接测序,用软件CLUSTAL X和MEGA分析测序结果.结果:白木香ITS区总长度为680bp,其中ITS1为246bp,5.8S为163bp,ITS2为271bp.ITS序列在白木香种内的变异很小,只有6个变异位点,种内遗传距离为0.0%-1.1%.结论:ITS序列的差异为鉴别不同产区白木香及其近缘种提供了依据.
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云南沉香ISSR-PCR反应体系的建立与优化
目的 建立并优化出清晰稳定的云南沉香ISSR-PCR反应体系和扩增程序,并筛选出适合的引物.方法 利用正交设计试验,对云南沉香ISSR-PCR反应体系中的5个主要因素进行优化,并设置温度梯度检测佳退火温度.结果 首次建立了云南沉香ISSR-PCR的佳反应体系,即在20μl反应体系中,各个因素的浓度分别为:模板DNA 10 ng/20μl、Mg2+ 3mmol/L、Taq DNA聚合酶2.4 U/20μl、dNTP 0.6mmol/L、引物0.2μmol/L;引物UBC811的佳退火温度为53.0℃.并且,从100条引物中筛选出16条扩增稳定、多态性丰富的ISSR引物.结论 优化确立的云南沉香ISSR-PCR反应体系稳定可靠,可为后续云南沉香的遗传多样性分析研究奠定基础.
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微波消解—原子吸收分光光度法测定沉香叶中的矿物元素
探讨混酸体系、混酸比和固液比对沉香叶消解的影响.采用微波消解—原子吸收分光光度法(AAS)测定沉香叶中钾、钙、镁、铁、锰、锌元素的含量,并根据正交试验设计研究微波消解系统中混合酸体系、混酸比和固液比对于消解结果的影响.实验结果显示混酸比为8:2;固液比为1:24;混合酸体系为HNO3-HC1时,沉香叶样品消解效果好.方法的回收率在90.00％ ～ 104.00％之间,相对标准偏差为1.03％ ～2.33％％,说明方法有较好的准确度和精密度.在实验条件下对云南沉香和白木香叶片中的K、Mg、Zn、Ca、Fe、Mn的含量进行测定,结果为两种沉香叶中均含有丰富的K、Mg、Zn、Ca、Fe、Mn,其中白木香叶中的K、Mg、Zn含量大于云南沉香叶中的K、Mg、Zn含量;而Ca、Fe的含量小于云南沉香叶中的含量;Mn在这两种沉香叶中的含量相差不大.从矿物元素角度分析,沉香叶具有较高的开发价值.
