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CD4、CD8细胞与艾滋病治疗免疫评价及实践
现代免疫学认为,外周血CD4细胞功能与数量的下降,是艾滋病(AIDS)导致免疫衰退的主要标志,因而把CD4作为AIDS治疗免疫评价的标志物.但是,在严重的AIDS患者中,不乏CD4细胞数超出正常高限者.一般认为,HIV载量大幅下降者的CD4细胞应自动回升,然而,为何临床有不少HIV载量下降者的CD4细胞反而下降?这一现象在抗病毒疗法,或在中医药调整人体内环境疗法中均有发生.
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表达高致病性PRRSV GP3和GP5基因的核酸疫苗构建及小鼠免疫效果评价
目的 构建针对美洲型蓝耳病病毒的重组核酸疫苗,评价其与5种佐剂联合免疫BALB/C小鼠的效果. 方法 构建含有美洲型蓝耳病病毒GP3基因和GP5基因以及CpG-佐剂序列的重组核酸疫苗pVAX-N35HP,分别加入A1佐剂、A2佐剂、A3佐剂、A4佐剂和A8佐剂,免疫BALB/C小鼠,通过中和性抗体、T淋巴细胞亚群及细胞因子检测分析免疫效果. 结果 成功构建重组核酸质粒pVAX-N35-HP.用重组核酸质粒转染BHK-21细胞,Western blot显示重组核酸质粒稳定表达目的蛋白.中和性抗体结果显示,重组核酸疫苗免疫后35 d,pVAX-N35HP+ A1组和pVAX-N35HP+A2组抗体滴度为1∶12;pVAX-N35HP+A3组抗体滴度为1∶16.pVAX-N35 HP组细胞因子IL-4含量为阴性对照组的1.39倍,CD4+T淋巴细胞亚群百分率为阴性对照组的2.35倍(P＜0.01).重组核酸质粒分别与5种佐剂联合免疫小鼠,pVAX-N35HP+A1组CD8+T淋巴细胞亚群百分率为pVAX-N35HP组的1.93倍;pVAX-N35HP+A3组免疫细胞因子IL-4为pVAX-N35HP组的1.41倍(P＜0.05),IFN-γ为pVAX-N35 HP组的3.79倍(P＜0.01);pVAX-N35HP+ A2、pVAX-N35HP+ A4和pVAX-N35HP+ A8组IFN-γ水平升高,CD8+T淋巴细胞数量增多. 结论 成功构建重组核酸疫苗pVAX-N35HP.该疫苗具有良好的免疫原性,其中A1、A3免疫佐剂的加入可增强小鼠细胞免疫和体液免疫水平.
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欧洲型PRRSV重组腺病毒疫苗猪免疫试验效果评价
目的 评价欧洲型PRRSV重组腺病毒疫苗pacAd-EU-ORF3-ORF5-IL18猪体免疫效果. 方法 用鉴定正确的重组腺病毒进行猪免疫试验,通过淋巴细胞亚群检测、细胞因子检测和免疫组化检测分析其免疫效果. 结果 猪淋巴细胞亚群检测显示重组腺病毒pacAd-EU-ORF3-ORF5-IL18刺激CD4+和CD8+表达量在21 d、35 d、49 d分别为PBS组的1.53、1.84、1.90倍和1.41、1.76、1.53倍,差异有统计学意义(P＜0.05);ELISA检测pacAd-EU-ORF3-ORF5-IL18免疫猪血清IL-4和IFN-γ水平在14d时的表达量分别是PBS组的1.45和1.46倍(P＜0.05),而在35d时分别是PBS组的1.81和1.79倍(P＜0.05).免疫组化检测免疫猪肺、肠系膜淋巴结、腹股沟淋巴组织病毒量相对于野毒组和PBS组显著减少. 结论 重组腺病毒pacAd-EU-ORF3-ORF5-IL18疫苗,具有良好的免疫原性,能提高猪细胞免疫和体液免疫水平.
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炭疽PA和芽孢双组分候选疫苗免疫豚鼠的免疫学初步评价
目的 对豚鼠免疫重组PA抗原和甲醛灭活芽孢组成的炭疽候选疫苗,评价其免疫效果.方法 将豚鼠随机分成5个实验组,分别免疫高、中、低剂量候选疫苗、炭疽活疫苗或生理盐水;免疫后不同时间点采血进行抗体检测、XTT法淋巴细胞增殖检测以及皮肤迟发型超敏反应检测.结果 抗体检测结果显示,双组分炭疽候选疫苗能诱导较强的体液免疫应答;XTT细胞增殖结果显示,外周血淋巴细胞特异性增殖不明显,但所有候选疫苗组针对rPA DTH阳转率24 h后均为100％.结论 双组分炭疽候选疫苗能诱导豚鼠产生体液免疫和细胞免疫应答.
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HIV-1 gp140蛋白疫苗的设计及其免疫原性研究
目的 设计HIV-1 gp140蛋白疫苗并进行免疫原性初步研究.方法 构建包含不同信号肽的gp140蛋白表达克隆,对表达效率和信号肽切割效率进行比较筛选,同时对不同长度C末端的gp140进行比较,终获得优化的HIV-1 gp140免疫原.采用不同的免疫方式免疫豚鼠,通过特异性结合抗体检测和中和抗体检测进行免疫效果评价.结果 设计的信号肽具有较好的分泌、切割效率,重组HIV-1 gp140抗原获得良好的表达.重组蛋白疫苗单独免疫就能诱导很强的结合抗体和中和抗体反应,反应强度高于重组DNA疫苗以及痘苗病毒载体疫苗的联合免疫.不同C末端长度的gp140蛋白免疫效果没有显著的差异,但长C末端的gp140蛋白免疫效果稍好.结论 优化设计了HIV-1 gp140蛋白疫苗,设计的重组疫苗获得较好的免疫效果.
关键词： HIV-1gp140 抗原设计 免疫评价 -
HCMV pp65核酸疫苗表达载体的构建及其体内免疫效果评价
目的构建人巨细胞病毒(HCMV)pp65基因表达载体并初步评价其作为核酸疫苗的体内免疫效果. 方法利用分子克隆方法构建HCMV pp65表达载体pcDNA3.pp65;对其活性进行体外鉴定后,以肌肉和皮下2种途径、3种剂量组免疫小鼠;测量免疫小鼠的体重、体温等一般状况,利用MTT方法测定免疫小鼠的T细胞增殖活性、NK活性,利用ELISA方法测定小鼠的抗HCMV IgM、IgG抗体,免疫小鼠血清的病毒中和实验. 结果成功构建HCMV pp65表达载体pcDNA3.pp65并免疫小鼠后,小鼠体重、体温等一般状况未见明显变化,T细胞增殖活性增强,NK细胞活性增强,HCMV IgM、IgG抗体增高,且有时间、剂量依赖性,免疫小鼠血清对HCMV有部分中和作用. 结论 pcDNA3.pp65表达载体可引起机体特异性细胞免疫和体液免疫,可作为一种有一定应用前景的核酸疫苗进一步深入研究.
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对《免疫评价与免疫治疗:慢性乙型病毒性肝炎临床治疗的新策略》一文商榷
编辑同志:拜读<中华检验医学杂志>2009年第32卷第7期徐向升和王福生著<免疫评价与免疫治疗:慢性乙型病毒性肝炎临床治疗的新策略>~([1])一文,文中提出HBsAg定量测定具有重要意义,认为HBsAg水平不仅是反映感染水平的较好指标;可以帮助医生了解患者对治疗的应答,有针对性地调整患者的个性化治疗,进而提高疗效;对患者了解相关信息,有助于提高治疗的依从性,增加治疗信心.对于该观点,笔者认为有待商榷.
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单纯疱疹病毒壳膜蛋白22增强人巨细胞病毒糖蛋白B核酸疫苗免疫效果的体内生物学活性
人巨细胞病毒(human cytomegalovirus,HCMV)是造成先天畸形的主要病原体,HCMV糖蛋白B(glycoprotein B,gB)为HCMV重要的一种膜糖蛋白,在病毒感染及诱发机体免疫反应中起着重要作用;单纯疱疹病毒壳膜蛋白22(tegument viral protein 22,VP22)是单纯疱疹病毒的一种结构蛋白,具有很强的细胞间转移作用,可将与其融合的蛋白分子高效带入邻近细胞,提高基因转移效果.本研究拟将HCMV gB基因与VP22基因连接在一起,以增加抗原与宿主免疫系统接触的机会,制备HCMV核酸疫苗,并研究其在小鼠体内的免疫活性.
关键词： 人巨细胞病毒 糖蛋白B 单纯疱疹病毒壳膜蛋白22 核酸疫苗 免疫评价 -
我国常规免疫报告接种率与实际接种率差距研究
常规免疫接种率报告评价和监测是计划免疫评价的基础.真实可靠的计划免疫接种率资料,能使各级疾病控制和卫生管理部门正确评价儿童基础免疫接种的完成情况,及时发现问题,提高和保持高水平的免疫接种率.有资料表明,我国已分别实现了以省、县、市为单位儿童免疫接种率达到85%的目标[1].但根据近年来常规免疫监测和调查资料,目前的报告接种率可信程度令人担忧,报告接种率和实际接种率存在一定差距.
