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滇牡丹内生真菌PR35的鉴定及次生代谢产物的研究
目的:对滇牡丹内生真菌PR35菌株进行菌种鉴定,并对其次生代谢产物的化学成分进行研究.方法:采用形态学观察结合ITS rDNA序列分析法进行菌种鉴定；应用多种柱色谱方法对其次生代谢产物进行分离纯化,并依据其理化性质及波谱数据鉴定化合物结构.结果:菌株PR35鉴定为长梗木霉Trichodema longibrachiatum；从菌株PR35的发酵产物中分离获得5个化合物,分别鉴定为1-(2,6-dihydroxyphenyl) -3-hydroxybutan-1 -one(1),1-(2,6-dihydroxyphenyl)propan-1-one (2),1-(2,4,6-trihydroxyphenyl) butan-1 -one (3),4-methoxy-1 -naphthol(4)和啤酒甾醇(5),其中化合物1～3对灰葡萄孢、燕麦镰孢和紧密单孢枝霉显示明显的抗真菌活性.结论:内生真菌长梗木霉首次从滇牡丹植物中分离获得,5个化合物均为首次从滇牡丹内生真菌中分离得到,其中化合物4为首次从微生物发酵产物中获得.
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长梗木霉感染引起的腹膜炎1例报道
木霉属真菌是一类常见的植物腐生菌和木腐菌,一直被认为是污染菌.木霉引起侵袭性感染的报道越来越多,免疫功能低下患者的侵袭性感染的报告尤为多见[1-3].长梗木霉是引起侵袭性真菌感染较为常见的菌种[3-4].本研究将分析1例长梗木霉感染引起的侵袭性腹膜炎病例.
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长梗木霉外切纤维素酶CBH Ⅱ基因的克隆及表达
分别以长梗木霉(Trichoderma longibrachiatum)XST1的基因组DNA和cDNA为模板PCR扩增其外切纤维素酶Ⅱ(cellobiohydrolase Ⅱ,CBHⅡ)的全长基因cbh Ⅱ.序列分析表明:cbh Ⅱ基因全长1583 bp,含3个内含子,分别为94～144 bp,529～584 bp和832～894 bp.该基因编码的外切纤维素酶Ⅱ蛋白全长470个氨基酸(其中前24个氨基酸为信号肽).将全长的cbhⅡ基因连接到pPIC3.5K上,转化毕赤酵母GS115(Pichia pastoris GS115).重组转化子96 h诱导培养.发酵上清液水解pNPC的酶活为18.1 U/L.SDS-PAGE检测结果表明:浓缩的重组转化子发酵液较对照菌株的发酵液中,有一明显加强的蛋白质条带,Mr约为67 k.
