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枯草芽孢杆菌的基因组重排初步研究
目的:获得产高活性豆豉溶栓酶的枯草芽孢杆菌突变株.方法:用紫外诱变得到突变株,观察诱变效应,筛选透明圈直径与菌落直径比值大(HC值)的突变株,进行原生质体融合,筛选酶活高的菌株.结果:紫外诱变得到2株HC比值大的菌落;当溶菌酶为100 mg·L~(-1),处理时间为45 min进行原生质体融合时,效果好;当PEG为40%时,原生质体融合率大;后筛选出酶活可达2 013 U·mL~(-1)的突变株.结论:通过紫外诱变和原生质体融合,得到高活力的菌株.
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豆豉溶栓酶溶栓作用的初步研究
豆豉是我国的传统大豆发酵食品.1987年须见洋行博士[1]首次从日本豆豉中提取纯化出一种具有溶解交联纤维蛋白功能的纳豆激酶(NK),该酶能显著溶解体内外血栓,且无毒副作用,有望成为一种新型的血栓溶酶.研究人员在我国传统豆豉中也提取出了具有溶栓功能的酶类,但对其溶栓作用的研究鲜见报道.
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酪蛋白为底物测定豆豉溶栓酶活性的实验研究
酪蛋白是检测胰蛋白水解酶活力的常用底物之一,实验证明可以将其用于豆豉溶栓酶的酶活力测定.酪蛋白浓度大于0.6%,豆豉溶栓酶浓度在0.077~0.347mg/ml之间,要严格控制反应温度和反应时间.室温下放置基本不影响测定结果;缓冲系统对酶活性影响较大.
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豆豉溶栓酶肠溶片剂的制备及体外释放度
采用均匀设计优化豆豉溶栓酶肠溶片片芯的制备工艺.结果表明,按优化处方经工艺过程制得的片芯酶活性损失仅6%.包肠溶衣后的制品在0.1mol/L盐酸中2h平均累积释放率为2.1%;在0.2mol/L磷酸钠缓冲液(pH 6.8)中,23.4min累积释药50%,45min释药86.3%,释药规律符合Weibull分布模型.