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正交试验法在乌头组织培养中的应用
乌头Aconitum carmichaeli Debx.为毛莨科乌头属多年生草本植物.其子根为常用中药附子.乌头的组培快繁研究已见报道的有胡延玉[1]利用茎尖和带腋芽茎段培养并获得再生植株,但所用培养基成分复杂,生长周期长.林静等[2]利用叶片和幼茎进行培养,叶片只诱导出愈伤组织阶段而未分化出芽.关文灵等[3]以试管苗的叶片为外植体,成功培养出组培苗.本研究以乌头叶柄为外植体,利用多因子正交试验法,确立了乌头叶柄通过愈伤组织再生植株的一整套方法.
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GC-MS法分析不同部位仿野生与组培快繁铁皮石斛中的挥发性成分
目的 分析仿野生与组织培养快速繁殖(组培快繁)铁皮石斛茎、根和叶中的挥发性成分.方法 铁皮石斛茎、根和叶液氮研磨成粉,气质联用(GC-MS)仪分析提取液中的成分和其相对含有量.结果 铁皮石斛中共鉴定出90种挥发成分,主要为醛类、醇类、酯类、萜烯类、酮类、烷烃与芳香烃及其衍生物.其中,仿野生鉴定出72种,茎中24种、根中29种、叶中19种;组培快繁鉴定出68种,茎中23种、根中29种、叶中16种.其共有成分在茎中有11种,根中有10种,叶中有5种.此外,萘在铁皮石斛不同部位中的含有量都较高.结论 仿野生与组培快繁铁皮石斛不同部位中挥发性成分的差异很大.
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影响药用石斛组织培养的几个因素的研究进展
作为一种珍贵的中药资源,近年来药用石斛的组培快繁取得了较大进展.文章综述了药用石斛组织培养在外植体、培养基、激素、天然附加物、金属离子、内生菌等方面的研究进展,并指出了今后需要继续探索与拓宽的研究领域,为石斛资源的可持续利用提供科学依据.
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珍稀濒危药材铁皮石斛组培快繁关键技术研究
目的 研究珍稀濒危药材铁皮石斛组织培养快速繁殖技术.方法 以铁皮石斛茎段为试材,比较植物激素浓度配比、人工先源、炼苗驯化方法等对铁皮石斛组培快繁的影响,摸索出一套可进行组培快繁工厂化生产的技术体系,优选出铁皮石斛组培快繁的适条件.结果 (1)组培各阶段佳培养基:原球茎诱导:MS+BA 2.5 mg/L+IBA0.2 mg/L；原球茎分化:MS+BA1.5 mg/L+NAA1.2 mg/L+5％香蕉汁；壮苗生根:MS+NAA 0.15 mg/L+5％香蕉汁、MS+NAA 0.20mg/L+7.5％香蕉汁、MS+NAA 0.25 mg/L+10％香蕉汁(分阶段补加)；(2)人工光源:组培特定光谱节能灯；(3)炼苗方法:水培驯化炼苗.结论 通过上述技术的应用,缩短了种苗组培育苗周期,解决了从组培苗到大量栽培的技术,该方法简便易用,且降低了生产成本.
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滇桂艾纳香组培快繁技术体系的研究
目的:探索滇桂艾纳香组培快繁技术体系的佳培养条件.方法:以滇桂艾纳香的嫩茎段为外植体,采用正交试验设计方法优化增殖培养基,建立组培快繁体系.结果:0.1％ HgCl2溶液灭菌10 min效果佳;茎段丛生芽诱导培养基以MS+ 6-BA 2.0 mg/L+ KT 1.0 mg/L+ NAA 0.5 mg/L佳,诱导率达90％;6-BA是影响增殖的主要因素,达显著水平,NAA与KT效应不显著;芽增殖的适培养基为MS+ 6-BA 2.5 mg/L+ KT 1.5 mg/L+ NAA0.2 mg/L,增殖系数为7.12;生根培养基用1/2MS+ NAA 0.5 mg/L好,生根率100％,移栽成活率93.33％.结论:该试验得到的组培快繁技术体系可在短时间内提供大量种苗,并为规模化生产种苗提供技术指导.
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丹参茎段组培快繁体系的建立与优化
目的: 建立并优化丹参茎段组培快繁体系.方法: 以丹参春生幼嫩枝条为外植体,利用正交试验等方法筛选优化丹参茎段消毒、丛生芽诱导、丛生芽增殖、生根培养的适宜方案.结果: 适的消毒方案是用70％～ 75％乙醇浸泡30 s, 0. 1％升汞浸泡8 min,萌芽率为85％; 适宜丛生芽诱导的培养基是MS+6-BA 1. 0 mg/L+NAA 0. 05 mg/L+蔗糖30 g/L+琼脂7 g/L; 丛生芽增殖的适培养基是1/2～ 2/3MS+6-BA 1. 0 mg/L+NAA 0. 05～ 0. 2 mg/L+GA3 0. 1mg/L+蔗糖30 g/L+琼脂6. 5 g/L,平均丛生芽增殖系数为11. 95; 适宜生根的培养基是1/4 ～ 1/2MS+2,4-D 0 ～ 0. 1mg/L+IBA 0. 1～ 0. 5 mg/L+蔗糖20 g/L+琼脂7 g/L,2 w 后生根率为100％,平均生根数达2. 3 条以上,平均根长达0. 83 cm 以上; 炼苗、移栽成活率达95％以上.结论: 筛选出了丹参含顶芽茎段适的增殖和生根培养基配方,建立并优化了丹参茎段组培快繁体系.
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铁皮石斛组培快繁技术研究
目的 通过研究铁皮石斛种子萌发、小苗增殖和生根的适宜培养基,建立一套铁皮石斛组织培养的快速繁殖体系.方法 以铁皮石斛种子为外植体,研究激素(6-benzylaminopurine和1-naphthleetic acid)不同质量浓度配比、天然添加物(马铃薯汁和香蕉汁)对铁皮石斛种子萌发、小苗增殖和壮苗生根的影响.结果 铁皮石斛种子萌发适培养基为1/2MS +0.2 mg/L NAA+ 100 g/L马铃薯汁+25 g/L蔗糖汁,小苗增殖适培养基为1/2MS +0.2 mg/L NAA+ 100 g/L马铃薯汁(或香蕉汁)+25g/L蔗糖汁+0.5g/L活性炭,壮苗与生根适培养基为1/2MS+ 0.2 mg/L NAA+ 100 g/L香蕉汁+25 g/L蔗糖汁+0.5g/L活性炭.结论 建立了一套铁皮石斛组培快繁体系,可用于大规模生产铁皮石斛组培苗.
