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枯草芽孢杆菌ge25菌株发酵及其抑菌活性成分的初步研究
人参是我国传统名贵中药材,病害问题严重影响人参的产量和品质.在前期分离到对多种人参致病菌有理想抑菌活性的内生枯草芽孢杆菌ge25菌株基础上,研究采用盐析和酸沉淀法从LB和Landy发酵液中制备蛋白粗提物和脂肽粗提物,用人参黑斑病菌检测粗提物的抑菌活性及其对高温和蛋白酶消解的稳定性;研究发现,LB发酵物中的抑菌成分主要是蛋白类物质,不耐高温和蛋白酶K;Landy发酵物中的抑菌成分主要是脂肽类物质,其对高温和蛋白酶K稳定.原位酸水解-茚三酮显色和TLC-生物自显影分析发现,脂肽粗提物中至少含有1种抗菌环肽.鉴于源自ge25菌株的脂肽类物质的高稳定性及理想的抑菌活性,对其开展深入研究将有助于推动人参病害的生物防治.
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梅毒螺旋体脂蛋白刺激巨噬细胞产生细胞因子及脂蛋白耐受的机制研究
目的：通过对梅毒螺旋体（treponema pallidum，TP）脂肽激活巨噬细胞产生细胞因子以及脂肽所诱导的免疫耐受对信号通路的影响进行研究，为进一步完善TP感染人体的免疫学过程，解释TP感染人体后引起的血清固定现象提供理论依据。方法不同浓度的TP脂肽刺激经PMA诱导THP-1细胞转化的巨噬细胞，利用酶联免疫吸附试验（ELISA）检测其分泌细胞因子的水平，并通过阻断CD14受体后，检测巨噬细胞对合成脂肽的反应能力以及合成脂肽耐受刺激后诱导巨噬细胞产生免疫耐受的能力。采用Western blot法检测细胞内的信号转导分子。结果3种合成脂肽诱导巨噬细胞分泌白细胞介素(IL)-β及IL-8的能力随着脂肽浓度升高而递增。CD14受体阻断后，IL-1β及IL-8分泌水平均明显减少。合成脂肽经耐受后刺激的IL-1β及IL-8分泌水平明显低于直接刺激的细胞因子的水平。合成脂肽在耐受刺激下，其巨噬细胞内的信号转导分子toll样受体2（toll like receptor 2， TLR2）和核转录因子kappa B (NF-κB) P65的蛋白表达显著减少。结论3种合成脂肽均能诱导巨噬细胞产生IL-1β及IL-8。合成脂肽通过激活巨噬细胞膜表面CD14受体分子，活化下游信号通路，从而诱导细胞因子产生。合成脂肽能够诱导巨噬细胞模型产生免疫耐受，其可能机制为通过TLR2激活下游NF-κB信号通路，减少炎性细胞因子产生。
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梅毒螺旋体脂肽诱导THP-1细胞表达细胞因子的研究
目的：通过体外建立巨噬细胞模型，研究梅毒螺旋体(TP)相对分子质量15000、17000、47000膜脂蛋白诱导THP-1细胞表达细胞因子的活性，评价其在梅毒感染细胞免疫中的作用，为进一步研究梅毒螺旋体的致病机制和生物学功能提供理论基础。方法用不同剂量PMA诱导THP-1细胞，分别观察细胞的形态和检测膜表面CD14受体表达情况，确定PMA诱导THP-1细胞转化为巨噬细胞的适宜剂量与时间。在此基础上利用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测不同浓度合成脂肽，刺激THP-1细胞分泌细胞因子的含量，并检测CD14抗体预处理THP-1细胞后对细胞因子分泌水平的影响。结果 THP-1细胞在5 ng/ml PMA浓度诱导下48 h分化较为成熟，可以作为体外实验的巨噬细胞模型。TP15、TP17和TP47均可诱导THP-1细胞分泌肿瘤坏死因子(TNF)-α、白细胞介素(IL)-1β和IL-8。以1000 ng/ml TP47诱导分泌水平较高。CD14抗体预处理后细胞对3种脂肽的反应能力均下降，所检测的3种细胞因子（TNF-α、IL-1β、IL-8）分泌量均较对照组减少，其中IL-1β及IL-8的分泌浓度下降较为明显。结论 TP15、TP17和TP47均能诱导TPH-1产生促炎性细胞因子，但是TP15和TP17的刺激能力不如TP47。CD14分子参与了TP15、TP17和TP47活化THP-1细胞产生细胞因子的过程。本研究采用根据TP膜脂蛋白N端合成的脂肽，可能不能完全真实反映TP天然膜脂蛋白的活性，需要进一步研究和证实。
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新型环脂肽抗生素达托霉素研究进展
作为首个进入临床应用的新型环脂肽抗生素,达托霉素抗菌活性强,耐药比例低,已成为治疗耐药革兰阳性菌所致感染的一线用药.本文主要对达托霉素的抗菌谱、生物合成途径、作用机制、耐药机制、构效关系、新型衍生物surotomycin和铁载体-达托霉素偶联物杀灭耐药鲍曼不动杆菌等研究结果进行综述,以期为新型达托霉素衍生物研发有所裨益.
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脂肽疫苗
肽疫苗与普通全蛋白(或基因免疫中的全基因)相比有诸多优点,如纯度高,可诱生高特异性免疫应答.但是,合成肽诱发免疫需要毒性佐剂.脂肽作为肽疫苗的一种形式,早在十年前就已被发现,它们可以在无佐剂条件下诱生全面的免疫应答.本文介绍了脂肽疫苗的过去,研究进展以及与脂肽疫苗合成、配方及接种途径有关的问题.脂肽疫苗粘膜应用的进展将为抗粘膜表面感染的病原体提供理想的策略.
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γ-聚谷氨酸生产菌株的常压室温等离子体诱变选育
γ-聚谷氨酸产生菌枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis) HD 11经常压室温等离子体诱变处理,以不产生脂肽作为筛选标准之一,获得1株高产菌株HNCL1266,其γ-聚谷氨酸摇瓶发酵产量为26 g/L,较菌株HD11提高了30％,且遗传稳定.在5L发酵罐上,添加0.2 g/L的泡敌可有效抑制泡沫的产生,γ-聚谷氨酸产量达到30 g/L.
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螺旋体脂蛋白免疫调节机制研究进展
梅毒、莱姆病和细螺旋体病是威胁人类健康的主要螺旋体病。然而，对此类疾病的免疫机制尚未充分阐明。螺旋体通过各种结构，例如脂多糖( LPS)、表面脂蛋白和糖脂与宿主相互作用。尽管螺旋体抗原如LPS和糖脂可能在其感染时有助于炎症反应，但梅毒螺旋体( Tp)和伯氏疏螺旋体( Bb)缺乏LPS。脂蛋白是表达于所有螺旋体的丰富的蛋白，往往决定螺旋体与环境作用的方式。脂蛋白可促进炎症反应、调节固有免疫应答和适应性免疫应答，并有助于螺旋体粘附在宿主中或中肠上，或逃避免疫系统。然而，大多数螺旋体脂蛋白功能尚未明确。本文综述螺旋体脂蛋白在免疫逃逸和免疫激活方面的免疫调节作用，将有助于阐明螺旋体病的固有免疫致病机制，以及与螺旋体疾病疫苗发展和螺旋体病炎症反应有关的适应性免疫机制。
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Glarea lozoyensis发酵生产棘白菌素类化合物纽莫康定的研究进展
棘白菌素化合物纽莫康定B0(pneumocandinB0)是抗真菌药物卡泊芬净(caspofungin)的前体.棘白菌素类化合物可以通过非竞争性抑制真菌细胞壁中的β-1,3-D-葡聚糖合成酶活性而抑制真菌细胞壁的合成.纽莫康定Bo的生产菌是丝状真菌Glarea lozoyensis.本文从化学结构和生物合成的角度出发,总结了纽莫康定B0的研究进展,主要包括综述了纽莫康定化合物的化学多样性、生物合成途径、优良菌株的选育以及在发酵生产中所面临的工程问题等.
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一株产脂肽类抗生素bacillopeptin A深海芽孢杆菌的筛选与鉴定
目的 筛选从中国南海深海3601m的海泥样品中分离得到的细菌,获得一株芽孢杆菌SH-B74,分离其产生抗植物病原真菌脂肽类化合物,并进行菌种鉴定.方法 使用酸沉淀、快速柱色谱、SPE和半制备反高效液相色谱技术分离发酵液中的脂肽类纯化合物,采用形态、生理生化特性和16S rDNA基因序列分析相结合方法鉴定菌株.结果 分离纯化得到一种拮抗植物病原真菌的脂肽类纯化合物bacillopeptin A,分子量为1020.6Da;菌株经鉴定为解淀粉芽孢杆菌(Bacillus amyloliquefaciens).结论 该菌株对玉米纹枯病等多种植物病原真菌具有拮抗作用,代谢产物bacillopeptin A对苹果干腐病菌具有良好的拮抗效果.显示了该菌及其代谢产物在植物病原真菌的生物防治和土壤生物修复方面具有潜在研发价值.
关键词： 解淀粉芽孢杆菌 深海海泥 脂肽 bacillopeptinA
