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多指标正交试验优化白首乌C21甾总苷的醋酸水解条件
目的:研究白首乌C21甾总苷醋酸水解的佳条件.方法:以开德苷元-3-0-β-D-洋地黄毒糖苷昔、告达庭、开德苷元-3-0-α-L-迪吉糖-(1→4)-β-D-磁麻糖苷和告达庭-3-0-β-D-磁麻糖苷的含量为指标,采用正交试验设计L9(33)进行优选,考察水解温度(A)、水解时间(B)、醋酸浓度(C)3个因素对白首乌C21甾总苷醋酸水解条件的影响,同时建立HPLC含量测定的方法.结果:影响醋酸水解的主次因素为A＞B＞C,佳水解条件为5.0%醋酸溶液,100℃回流6ho结论:此水解条件明显提高了白首乌中抗癌有效成分的含量,对研究抗肿瘤药物具有重要作用.
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告达庭下调β-catenin/survivin抑制神经胶质瘤C6细胞迁移实验研究
目的 观察告达庭对大鼠神经胶质瘤C6细胞增殖和迁移能力的影响,并初步探讨其内在的分子机制.方法 MTT法检测告达庭对C6细胞存活力的影响;流式细胞术检测细胞周期的变化;细胞划痕实验及Transwell迁移小室检测告达庭对C6细胞体外迁移能力的抑制作用;免疫印迹实验检测告达庭对C6细胞内β-catenin、Survivin以及细胞周期相关蛋白CyclinD1和Cdk4蛋白表达的影响.结果 告达庭能够剂量依赖性地抑制C6细胞的增殖并阻滞细胞于G1期,其机制与下调细胞周期素CyclinD1和Cdk4的表达相关;告达庭给药后,C6细胞的迁移能力明显受到抑制,同时β-catenin及其下游因子Survivin的表达呈显著下降趋势.结论 告达庭具有抑制C6细胞的增殖和体外迁移能力的作用,其机制可能与抑制β-catenin蛋白及Survivin的表达相关.
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告达庭激活Caspase-3诱导人胃癌细胞SGC-7901凋亡
[目的]评价告达庭体外诱导人胃癌细胞SGC-7901凋亡的作用.[方法]MTT法检测细胞活性;吖啶橙染色观察核形态;流式细胞术检测细胞凋亡率;Western-blot及比色法检测Caspase-3表达及活性.[结果]告达庭抑制SGC-7901细胞的活性,具有浓度、时间依赖性;告达庭70μM能使SGC-7901细胞出现核染色体浓聚等典型的凋亡形态学改变,告达庭35、70μM使细胞凋亡率升高,并使Caspase-3蛋白表达量和蛋白活性显著升高.[结论]告达庭可能通过激活Caspase-3诱导SGC-7901细胞凋亡.
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双波长HPLC测定青阳参中青阳参苷元和告达庭的含量
目的 建立采用双波长HPLC同时测定青阳参中青阳参苷元和告达庭含量的方法.方法 采用高效液相色谱法,ZORBAX SB-C18(4.6 mm×150 mm,5μm)色谱柱,柱温40℃,流动相为乙腈-水,梯度洗脱,流速为1.0 mL·min-1,检测波长为220,260 nm.结果 青阳参苷元和告迭庭均在2～64 μg·mL-1内呈良好的线性关系,r均为1;平均回收率为100.1％和97.9％,RSD值分别为1.34％和1.37％(n=6).结论 该方法快捷简单,精密可靠,重复性好,可为青阳参及其制剂的质量控制提供参考.
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告达庭衍生物抑制人乳腺癌细胞增殖及其作用机制研究
目的:研究告达庭-3-O-β-D-加拿大麻糖苷(Ca-G)对人乳腺癌细胞的作用及其作用机制.方法:采用MTT法研究Ca-G对人乳腺癌细胞株细胞增殖的影响;通过流式细胞术研究Ca-G对人乳腺癌细胞株细胞周期和细胞凋亡的作用;采用western blotting研究Ca-G对细胞周期和细胞凋亡相关蛋白表达水平的影响.结果:Ca-G能够明显抑制人乳腺癌细胞株MDA-MB-231和MCF-7的增殖,并阻滞细胞周期G1期,其机制可能是通过调控G1期关键蛋白cyclin D1发挥作用;Ca-G能通过caspase3/7途径诱导乳腺癌细胞株产生细胞凋亡.结论:Ca-G可有效抑制乳腺癌细胞株MDA-MB-231和MCF-7的增殖.这为告达庭及其衍生物抗肿瘤作用的进一步研究提供了一定的实验基础,也为综合开发C21甾体苷类化合物的临床应用提供一种思路.
