您当前的位置：
首页 > 文献资料
所属专业：
单萜合酶文献资料
-
雷公藤单萜合酶基因TwMS的克隆及蛋白表达分析
该研究克隆得到1条雷公藤单萜合酶基因TwMS.其完整开放阅读框为1 797 bp,编码579个氨基酸,相对分子质量为69.75 kDa、理论等电点为5.37.生物信息学分析表明,TwMS具有单萜合酶的特征结构域,属于萜类合酶TPSb亚家族.实时荧光定量PCR检测显示,经茉莉酸甲酯(MeJA)诱导后,TwMS的相对表达量显著上调,并在24 h达到高.此外,该研究在大肠杆菌BL21(DE3)中成功表达TwMS蛋白,为进一步研究该基因的功能奠定了基础.
-
阳春砂单萜合酶基因AvTPS1载体构建和原核表达
目的 构建AvTPS1的原核表达载体并进行蛋白表达,为该基因在原核表达系统中的功能鉴定奠定基础.方法 用In-Fusion方法构建AvTPS1截掉转运肽的表达载体;用Gateway方法构建AvTPS1包含完整阅读框的表达载体;两种表达载体分别转化至大肠杆菌BL21 (DE3)和BL21 DE3 plys中进行诱导表达,用变性聚丙烯酰氨凝胶电泳(SDS-PAGE)以及Western杂交检测蛋白的表达情况.结果 构建了原核表达载体pET-32a(+)-(-tp)AvTPS1和pDEST17-AvTPS1;这两个表达载体在大肠杆菌BL21(DE3)和BL21DE3plys中均没有表达出明显的相应蛋白,但是这两个载体在大肠杆菌BL21(DE3)中大量表达后,用Western杂交检测有蛋白存在.结论 成功构建了阳春砂单萜合酶基因AvTPS1的表达载体和工程菌.
