首页 > 文献资料
-
淫羊藿素联合阿霉素对人骨肉瘤MG-63细胞抑制作用的体外研究
目的 探讨体外淫羊藿素联合阿霉素对人骨肉瘤MG-63细胞的抑制作用及分子机制.方法 设置对照组及不同浓度梯度的淫羊藿素组(10、20、40、80、160 山mol/L)、阿霉素组(1、2、4、8、16 μg/mL)、联合组(淫羊藿素+阿霉素:20 μmol/L+1μg/mL、20 μmol/L +2 μg/mL、20 μmol/L +4μg/mL、40 mol/L+1 μg/mL、40μmol/L+2μg/mL、40 μmol/L+4μg/mL、80 μmol/L+1μg/mL、80 μmol/L+2μg/mL、80 μmol/L +4 μg/mL),分别培养骨肉瘤MG-63细胞用倒置相差显微镜观察各组药物作用24、48 h后细胞形态;CCK-8法测定各组的细胞增殖抑制率并计算半数抑制浓度;Annexin Ⅴ-FITC/PI双染料流式细胞分析技术测定各组的细胞凋亡率;RT-PCR检测bcl-2、caspase-3及p21表达.结果 淫羊藿素及阿霉素可明显抑制MG-63细胞增殖,随着淫羊藿素的浓度从10 μmol/L逐渐增加至160 μmol/L,细胞增殖抑制率也随之从(9.67±3.62)％逐渐增加至(89.18±9.66)％,二者的半数抑制浓度分别为:46.93 μmol/L、3.87μg/mL;淫羊藿素与阿霉素可致细胞早期及晚期凋亡,使bcl-2基因表达下调、caspase-3、p21基因表达上调(P＜0.05);以上改变联合组较淫羊藿素组及阿霉素组更明显(P＜0.05).结论 淫羊藿素联合阿霉素对抑制人骨肉瘤MG-63细胞增殖具有协同或相加效应,其作用机制可能与调控bcl-2、caspase-3及p21基因有关.
关键词： 淫羊藿素 阿霉素 骨肉瘤MG-63细胞 -
二甲双胍对骨肉瘤MG-63细胞形态、凋亡和终末分化的影响分析
目的:研究二甲双胍对骨肉瘤MG-63细胞的形态、凋亡和终末分化的影响,分析其与磷酸腺苷激活的蛋白激酶活性及胚胎干细胞标志物Nanog、Oct4表达情况的相关性.方法:选取人骨肉瘤MG63细胞作为研究对象,利用悬浮球生长实验将其诱导为骨肉瘤干细胞,随机将培养的细胞分为实验组和对照组,实验组培养细胞给予二甲双胍处理,观察处理前后骨肉瘤干细胞的形态及分化能力,分析二甲双胍对骨肉瘤干细胞凋亡的影响,并比较干细胞标志物Nanog及Oct4的阳性率,检测二甲双胍作用前后骨肉瘤干细胞中磷酸腺苷激活的蛋白激酶AMPK、雷帕霉素靶蛋白mTOR以及核糖体蛋白S6激酶p70S6K信号通路的表达情况.结果:实验组培养细胞的Nanog阳性率为45.2%,Oct4阳性率为74.7%;对照组培养细胞的Nanog阳性率为73.5%,Oct4阳性率为95.3%;两组培养细胞的Nanog及Oct4的阳性率比较差异均具有统计学意义(P<0.05).实验组培养细胞的磷酸腺苷激活的蛋白激酶AMPK相对表达量明显高于对照组,雷帕霉素靶蛋白mTOR以及核糖体蛋白S6激酶p70S6K的相对表达量明显低于对照组,差异均具有统计学意义(P<0.05).结论:二甲双胍可破坏骨肉瘤细胞的形态,抑制其分化,作用机制可能与Nanog及Oct4表达的下调、AMPK的激活有关.
关键词： 二甲双胍 骨肉瘤MG-63细胞 细胞形态 凋亡和分化 -
姜黄素的抗骨肉瘤活性及其相关作用机理
目的 探讨姜黄素对人成骨肉瘤MG-63细胞的抗肿瘤活性及其相关作用机制.方法 MTT实验检测姜黄素对人成骨肉瘤细胞MG-63的细胞毒作用;Annexin V/PI双染,流式细胞仪检测细胞凋亡的发生;提取细胞总蛋白Western blot实验检测细胞PARP蛋白的裂解带和survivin蛋白的表达变化.结果 姜黄素对人成骨肉瘤MG-63细胞具有高效的细胞毒作用,其IC50值为(11.55±0.63)μmol/L;10,20和40 μmol/L姜黄素处理MG-63细胞48 h后,细胞的凋亡率从(2.73±0.56)％依次升高到(18.1±1.22)％,(36.41±4.52)％和(57.23±5.86)％;Western blot结果显示姜黄素诱发了MG-63细胞内PARP蛋白的裂解,同时姜黄素也可剂量依赖性的降低细胞内survivin蛋白的表达.结论 姜黄素显示了高效的致骨肉瘤细胞凋亡活性,下调survivin蛋白可能是其诱导MG-63细胞凋亡的主要机制.
关键词： 姜黄素 骨肉瘤MG-63细胞 细胞凋亡 Survivin蛋白 -
一种新型磁性骨水泥的制备及其在交变磁场中 对骨肉瘤MG-63细胞凋亡的影响
目的:制备一种新型磁性骨水泥并对其形貌、凝固时间、抗压强度、生物相容性及其在交变磁场下对肿瘤细胞的杀灭效果进行评价.方法:用高温有机溶剂法制得磁性纳米颗粒并观察其形貌,测定其成分及磁滞曲线.用不同比例的磁性纳米颗粒和聚甲基丙烯酸甲酯(PMMA)骨水泥混合制备成0%、5%、10%、15%的磁性骨水泥并按ISO 5833标准测定凝固时间、抗压强度.筛选出符合ISO 5833标准的磁性骨水泥样品,测量其在390 kHz、22 kA/m的交变磁场中的体外升温情况并用流式细胞仪检测其对骨肉瘤细胞(MG-63)的杀伤作用,同时采用CCK-8评价其对小鼠成纤维细胞(MEF)的毒性作用.结果:所制的Co0.04 Fe2.96 O4磁性纳米颗粒为超顺磁性.随着磁性纳米颗粒含量的增加,骨水泥的凝固时间也随之延长.仅有含0%、5%磁性纳米颗粒的骨水泥的抗压强度达到ISO 5833标准,分别为(86.4±6.4)MPa、(77.5±6.1)MPa.含5%磁性纳米颗粒的骨水泥在交变磁场中3 min可达符合临床治疗所需的50℃,在达到50℃后维持30 min和直接升温6 min分别能诱导77.78%和80.78%的MG-63细胞凋亡,且细胞毒性与对照组比较差异无统计学意义(P>0.05).结论:制得的磁性骨水泥生物相容性良好,凝固时间、抗压强度、体外升温均符合临床骨肿瘤磁热疗的要求,在交变磁场下能有效诱导肿瘤细胞凋亡.
关键词： 磁性骨水泥 骨肉瘤MG-63细胞 凋亡 细胞毒性 -
噻莱昔布(celecoxib)对人骨肉瘤细胞MG-63增殖与凋亡的影响
目的:研究环氧化酶-2(cyclooxygenase-2,COX-2)抑制剂celecoxib对人骨肉瘤细胞MG-63抑制增殖及诱导凋亡的作用.方法:MTF比色观察celecoxib的细胞毒性作用及其浓度依赖性;Hoechst 33258荧光染色、透射电子显微镜和TUNEL观察细胞凋亡的形态学变化;流式细胞仪检测细胞凋亡率及其时间依赖性.结果:celecoxib分别以10、20、40、80μmoL/L作用后,细胞生长受到不同程度抑制;荧光显微镜、电镜和TUNEL观察到细胞胞浆浓缩、核凝聚、核碎裂和凋亡小体形成.流式细胞仪显示celecoxib 40μmol/L作用24、48、72h后,细胞凋亡率分别与对照组比较有非常显著性差异(P＜0.01).结论:celecoxib能抑制人MG-63细胞增殖,诱导细胞凋亡.
关键词： 环氧化酶2 骨肉瘤MG-63细胞 凋亡 -
NS398诱导人骨肉瘤细胞MG-63凋亡及对bcl-2蛋白表达的影响
目的 研究环加氧酶-2(cyclooxygenase-2,COX-2)抑制剂NS398抑制人骨肉瘤细胞MG-63增殖及诱导其凋亡的效应和机制.方法 MTT比色法观察NS398的细胞毒性作用及其浓度依赖性;透射电子显微镜观察细胞凋亡的形态学变化;琼脂糖凝胶电泳观察凋亡细胞DNA Ladder形成.流式细胞仪检测细胞凋亡率及与NS398作用时间的关系;Western blot测定bcl-2蛋白表达.结果 不同浓度(0.1～100μmol/L)NS398均可使细胞生长受到抑制;电镜显示细胞呈典型的凋亡形态学变化;琼脂糖凝胶电泳显示凋亡细胞DNA Ladder形成;流式细胞术检测证实细胞凋亡率与NS398作用时间呈明显相关.Western blot检测显示随着NS398作用时间延长,可不同程度地降低bcl-2蛋白表达.结论 NS398能抑制人MG-63细胞增殖,诱导细胞凋亡,其作用机制可能与调控bcl-2蛋白表达有关.
关键词： 环加氧酶-2 骨肉瘤MG-63细胞 细胞凋亡 BCL-2蛋白
