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补肾养心化瘀法治疗老年血管性痴呆验案3则
1 病例介绍 例1:唐某,男,69岁,1997年1月17日初诊。患者曾担任某机关领导,自1990年离休后精神逐渐抑郁,情绪低落,沉默少言。近3年来记忆力明显下降,每夜入睡困难。经CT检查小脑明显萎缩有腔隙性脑梗塞数处,曾用脑活素及扩张脑血管药物皆无明显疗效,求治于中医。除上述症状外,见其面容呆板,双目少神,表情苦闷,沉默寡语,入夜烦躁不宁,舌质紫、无苔,脉弦。经某医院神经内科诊断:(1)脑血管性痴呆,(2)脑萎缩,(3)腔隙性脑梗塞。辨证:心肾两虚夹痰浊瘀血,痹阻脑络,脑髓失充,为虚中夹瘀之证,治以补肾健脑养心为主,辅以活血通络之品。处方:熟地黄20g,山茱萸15g,麦冬15g,五味子15g,石菖蒲15g,石斛15g,远志15g,肉苁蓉15g,巴戟天15g,肉桂5g,附子5g,龟甲20g,龙骨20g,枸杞子20g,酸枣仁20g,水蛭5g,丹参15g,甘草10g,水煎日1剂,早晚温服。
关键词： 阿尔茨海默病/中药疗法 补肾 -
中药聪脑汤治疗老年性痴呆的临床研究
目的:比较聪脑汤和双益平(石衫碱甲)片剂治疗老年性痴呆(阿尔茨海默病,Alzheimer disease,AD)的疗效.方法:35例AD病人随机分为2组,聪脑汤组20例,双益平组15例;分别给予聪脑汤50 ml,口服,日3次和双益平片剂0.15 mg,口服,日2次,两组疗程均为8 w.结果:与治疗前相比,两组长谷川痴呆量表(HDS-R)积分均有显著性改善(P＜.05),聪脑汤组和双益平组总有效率分别为75%和73.4%,两组比较差异无显著性.结论:聪脑汤对AD临床症状有一定改善作用.
关键词： 聪脑汤 阿尔茨海默病/中药疗法 老年性痴呆 -
天泰1号对自发阿尔茨海默病鼠相关脑区超氧化物歧化酶和脂褐素的定量研究
背景:阿尔茨海默病发病的自由基学说以及氧化损害与阿尔茨海默病发病的关系使抗氧化药物研究成为热点,天然中药中的抗氧自由基损伤作用是否可产生对阿尔茨海默病的干预效应?目的:观察天然中药科研制剂天泰1号对自发阿尔茨海默病模型学习记忆功能及氧自由基代谢的影响.设计:以实验动物为研究对象,完全随机分组设计的实验研究.单位:一所市级中西医结合临床研究所.材料:实验在深圳市中西医结合临床研究所二级动物实验室完成.实验动物为昆明种小鼠,清洁级,雄性,13月龄,体质量40～50 g,购自中山医科大学实验动物中心(合格证号:粤检证字第95A07号).干预:实验动物饲养至21月龄,按国际通用标准和方法从老龄动物中筛选阿尔茨海默病小鼠;实验动物随机分为空白对照组、西药对照组、天泰1号小剂量组、天泰1号大剂量组、另设老年学习记忆正常组(简称老年正常组,下同).西药对照组给以甲磺酸双氢麦角毒碱片(Hydergine)0.6 mg/kg,天泰1号小、大剂量组分别予天泰1号6.80 g/kg及20.41 g/kg,连续60 d,空白对照组和老年正常组均灌以等量双蒸水.主要观察指标:用跳台实验检测学习记忆成绩;脑组织冰冻切片,免疫组织化学法示大脑皮质及海马超氧化物歧化酶活性;海马CA1区脑组织超薄切片,透射电镜法观察神经元细胞脂褐素;全自动显微图像分析系统定量检测超氧化物歧化酶及脂褐素.结果:阿尔茨海默病鼠学习记忆能力显著降低(P＜0.01);天泰1号能显著改善自发阿尔茨海默病模型小鼠的学习记忆障碍(P＜0.05～0.01),并明显增强中枢大脑皮质和海马超氧化物歧化酶活性(P＜0.05～0.01),降低其神经元细胞脂褐素含量(P＜0.05～0.01),且其作用呈现出一定的量效关系.结论:自发老年痴呆鼠学习记忆相关脑区神经元超氧化物歧化酶活性明显降低,脂褐素显著增多;天泰1号具有显著的抗氧自由基损伤的药效学作用,能显著提高阿尔茨海默病鼠皮质和海马神经元超氧化物歧化酶活性,并降低其脂褐素含量,改善其超微结构.
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补肾益智方拆方含药血清对阿尔茨海默病细胞模型的作用
背景:中药补肾益智方对阿尔茨海默病大鼠模型学习记忆能力有一定的保护作用,该方含药血清也能减轻神经瘤细胞NG 108-15细胞对β淀粉样蛋白的神经毒性反应,为了进一步了解该方的作用机制及其配伍规律,需对该方进行拆方研究.目的:研究补肾益智方拆方亚组的含药血清对阿尔茨海默病细胞模型生长、分化等方面的影响,从血清药理学的角度探讨该方的配伍规律.设计:随机对照实验.单位:广州中医药大学临床药理研究所DME中心.对象:实验于2003-01/08在广州中医药大学临床药理研究所DME中心实验室进行.实验对象为3月龄SD雄性健康大鼠40只和冻存的NG 108-15细胞株.方法:①制备药物血清:将40只SD大鼠随机分为对照组、原方组(蛇床子、枸杞子、人参、何首乌、丹皮、冰片)、补肾组(蛇床子、枸杞等)、益气养血组(人参、制首乌等)、去冰片组(蛇床子、枸杞子、人参、何首乌、丹皮),每组8只.将各组中药浓缩液按按10 μL/g(相当于生药6 g/kg)分别进行灌胃,连续1个月,对照组灌等量生量盐水.各组大鼠后1次灌胃2h,麻醉后心脏采血,分离血清备用.②细胞增殖、培养及分化:将体外培养的NG 108-15细胞分为6组,对照组、模型组孔中的增殖培养液含正常大鼠血清,其余4组分别为原方组及3个亚组的大鼠含药血清;同时每个孔加淀粉样β蛋白25～35至终浓度5 umol/L(对照组除外),继续培养48 h.主要观察指标:用MTT法测定细胞增殖数和存活率;同时检测分化突起细胞占总细胞数的比率及突起平均长度.结果:①细胞增殖情况:模型组A值显著低于对照组(0.520±0.022,0.665±0.037,P＜0.01),各含药血清组A值均高于模型组,但以去冰片组效果显著(0.636±0.035,P＜0.01).②分化细胞存活率:模型组显著低于对照组(58.4%,100%),各含药血清组均高于模型组,但以去冰片组效果显著(75.8%,P＜0.01).③分化突起细胞占总细胞数的比率:模型组显著低于对照组[(42.95±11.42)%,(58.75±12.84)%,P＜0.01],各含药血清组均高于模型组,但以去冰片组效果显著[(58.20±8.40)%,P＜0.01].④突起平均长度:模型组显著低于对照组[(356.0±109.0),(493.8±133.0)μm,P＜0.01],各含药血清组均高于模型组,但以去冰片组效果显著[(486.8±79.2)μm,P＜0.01].结论:补肾益智方及各亚组含药血清都能在一定程度上抑制淀粉样β蛋白25-35对NG108-15细胞的损伤作用,但各组情况有所不同.各组含药血清对细胞的保护作用由强至弱依次是去冰片组＞原方组＞补肾组＞益气养血组.故方中冰片的功效有待进一步研究.
关键词： 阿尔茨海默病/中药疗法 淀粉样β蛋白 补肾药 -
三七总皂苷对阿尔茨海默病大鼠脑胆碱能神经的保护作用
背景:现代医学目前对阿尔茨海默病尚无有效的治疗方法,三七总皂苷治疗阿尔茨海默病已引起重视和关注,但其作用机制仍不十分清楚.目的:观察具有化瘀止血、活血定痛功效的三七总皂苷对阿尔茨海默病动物模型大脑胆碱能神经病理损害的保护作用.设计:完全随机分组设计,对照试验.单位:广西中医学院神经科学研究所.材料:实验于2003-06/2005-04在广西中医学院中药药效研究实验室完成,选用清洁级健康Wistar大鼠90只,雌雄各半.其中15月龄老年鼠75只,3月龄青年鼠15只.方法:实验于2003-06/2005-04在广西中医学院中药药效研究实验室(广西重点实验室)完成.①选用清洁级健康Wistar大鼠90只,雌雄各半.其中15月龄老年鼠75只,3月龄青年鼠15只.设3月龄15只为青年对照组.于15月龄75只中随机抽取15只作为老年对照组.对其余60只大鼠进行造模.以D-半乳糖腹腔注射致亚急性损伤合并鹅膏蕈氨酸损毁双侧大脑Meynert基底核建立阿尔茨海默病大鼠模型.青年对照组和老年对照组均在相同条件下以生理盐水作平行对照.②2周后将存活的造模大鼠随机分为4组:模型组,三七总皂苷高、低剂量组和石杉碱甲组,每组12只.三七总皂苷高、低剂量组分别按200和100 mg/kg灌胃三七总皂苷(云南玉溪维和制药厂生产),1次/d;石杉碱甲组按0.3 mg/kg灌胃给药,1次/d,连续4周;模型组、青年对照组和老年对照组以等体积的生理盐水灌胃,连续4周.③给药结束后行大脑组织病理切片,利用免疫组织化学方法检测大脑切片胆碱乙酰基转移酶免疫反应活性及阳性神经元数量及形态学改变.应用IBAS图像分析系统对胆碱乙酰转移酶免疫阳性神经元进行图像分析处理,测定胆碱乙酰转移酶免疫阳性细胞平均截面积和平均吸光度(A值);用显微镜测微尺测定计算胆碱乙酰转移酶阳性神经元数目.④采用单因素方差分析进行计量资料间差异比较.主要观察指标:三七总皂苷对阿尔茨海默病大脑胆碱能神经元分布和胆碱乙酰基转移酶的影响.结果:老年大鼠75只和青年大鼠15只均进入结果分析.①青年对照组胆碱乙酰转移酶免疫阳性神经元多,免疫阳性物质染色深;三七总皂苷高剂量组免疫阳性神经元明显多于石杉碱甲组和模型组;模型组免疫阳性神经元较其他各组的神经元小,且数目明显减少,胞体的轴突及树突变短.②基底前脑胆碱乙酰转移酶免疫阳性细胞数:模型组明显少于其他各组(P＜0.05),三七总皂苷低剂量组、石杉碱甲组、模型组明显少于老年对照组(P＜0.05),石杉碱甲组、模型组明显少于三七总皂苷高、低剂量组(P＜0.05),青年对照组明显高于其他各组(P＜0.05).基底前脑胆碱乙酰转移酶免疫阳性细胞平均A值:变化与各组免疫阳性细胞数变化基本相同.基底前脑胆碱乙酰转移酶免疫阳性细胞平均截面积:三七总皂苷低剂量组和模型组明显小于青年对照组(P＜0.05),其他各组间差异不明显(P＞0.05).结论:三七总皂苷对老年性痴呆大鼠动物模型大脑胆碱能神经元具有较强的保护作用,通过改善和修复受损神经元而提高细胞存活的数量和质量、提高胆碱乙酰转移酶的含量和活性,从而保护和改善中枢胆碱能系统的功能,发挥抗老化、抗痴呆的作用.
关键词： 三七皂甙 阿尔茨海默病/中药疗法 疾病模型 动物 胆碱O-乙酰转移酶 -
李氏5号中药对D-半乳糖老化小鼠海马超微结构及胰岛素受体底物表达的影响
目的:观察李氏5号中药对D-半乳糖老化小鼠海马超微结构和磷脂酰肌醇酯3激酶(phosphatidyl inoditide-3'OH kinase,PI3K)、胰岛素受体底物-1(insulin-receptor substrate-1,IRS-1)、胰岛素受体底物-2(insulin receptor substrate-2,IRS-2)表达的影响.方法:将132只小鼠随机分为6组,正常对照(C)组、D-半乳糖模型(D)组、李氏5号大剂量(L)组、中剂量(M)组、小剂量(S)组、多奈哌齐(A)组.D,L,M,S,A 5组每日皮下注射半乳糖100 mg/kg.L,M,S 3个治疗组分别灌胃李氏5号方1.2,0.6,0.3 g/(kg·d),A组多奈哌齐0.75 mg/(kg·d)灌胃.4个月后,取小鼠海马CA1区组织进行电镜观察,行脑冷冻切片,用PI3K,IRS-1,IRS-2抗体进行免疫组化染色.结果:①电镜结构显示,D-半乳糖老化小鼠海马CA1区神经元核固缩,线粒体、高尔基体等细胞器肿胀,血管足突细胞肿胀,管腔变窄;李氏5号中药保护可以明显改善这种现象.②免疫组织化学染色结果显示3种抗体C组深染的阳性细胞在海马广泛分布,D组海马阳性反应细胞着色浅,少有突起,细胞数目少,分别为C组的48.8%,57.0%和60.8%.李氏5号方组染色结果与C组相似,A组亦有相同结果.结论:D-半乳糖老化小鼠海马CAI区出现明显超微结构病理改变,海马PI3K,IRS-1,IRS-2的表达明显下降;李氏5号中药保护能明显改善CA1区超微结构病理改变,上调以上3项指标的表达.
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调心方对淀粉样β蛋白25～35杏仁核注射诱导的痴呆模型大鼠淀粉样肽前体mRNA表达的影响
目的:观察调心方对淀粉样β蛋白杏仁核注射诱导的痴呆模型大鼠脑内淀粉样肽前体mRNA表达,淀粉样β蛋白沉积及星形胶质细胞增殖作用,并与多萘哌齐比较.方法:实验于2001-01/2004-01在上海中医药大学老年医学研究所实验室完成.取SD大鼠40只,随机分为正常对照组、假手术组、模型组、调心方组、多萘哌齐组5组,每组8只.①给药:各组动物于造模前1周开始给药,调心方组给予调心方(党参、茯苓、远志、桂枝、菖蒲等组成,7.45 g/mL)24.8g/kg,多萘哌齐组应用多萘哌齐组5 mg/kg;其余各组用1 mL双蒸水,每天灌胃1次,连续3周.②造模:正常对照组不造模;模型组、调心方组、多萘哌齐组大鼠通过单侧杏仁核注射淀粉样β蛋白25～35(5.0 nmol)造成痴呆大鼠模型;假手术组切开皮肤后立即缝合.③观察指标:各组大鼠给药完毕后麻醉状态下处死取脑,采用免疫组化法观察老年斑的主要成分淀粉样β蛋白1～40沉积和星形胶质细胞标志物胶质纤维酸性蛋白的表达,反转录-聚合酶链反应法观察淀粉样肽前体KPI和MPImRNA的表达.结果:40只大鼠全部进入结果分析.①淀粉样β蛋白1～40的阳性表达:模型组可见皮质、海马大量阳性细胞表达,其吸光度显著高于正常对照组和假手术组,调心方组显著低于模型组(P＜0.01).多萘哌齐组虽有降低但不明显(P＞0.05).②胶质纤维酸性蛋白的表达:与正常组和假手术组相比,模型组海马、皮质内胶质阳性细胞广泛增多,吸光度值亦高(P＜0.01);调心方组显著低于模型组(P＜0.01).而多萘哌齐组作用不明显.③反转录-聚合酶链反应结果:调心方组KPI(1 269 bp),MPI(297 bp)条带表达均明显减弱,抑制大脑皮质和海马淀粉样肽前体751/770mRNA的表达.结论:淀粉样β蛋白沉积能激活胶质细胞分泌多种炎性细胞因子,诱发炎症反应,进一步促使淀粉样肽前体mRNA的表达和淀粉样β蛋白的沉积,启动炎症和免疫级联反应诱导老年斑的形成.而调心方可显著减少模型大鼠脑内胶质纤维酸性蛋白和淀粉样肽前体mRNA的表达,抑制炎症反应,从而进一步减轻淀粉样β蛋白的大量沉积,其效果优于多萘哌齐.
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复智散对神经细胞胞体面积和轴突长度变化的影响
背景:自制中药复智散经已往的实验证实可延缓大鼠的自然老化过程,提示该药可能具有对抗衰老作用.目的:观察复智散培养神经细胞佳有效浓度对神经母细胞瘤株SH-SY5Y细胞形态学改变的影响.设计:重复测量设计.材料:实验于2002-06/2003-04在首都医科大学宣武医院北京脑老化重点实验室完成.自制中药复智散(菖蒲、远至等6味中药组成)由哈尔滨医科大学第一临床医学院神经科王德生教授和上海东方医院神经科徐晓云教授共同组方,淀粉样β蛋白25-35片段,SH-SY5Y神经母细胞瘤株.方法:用不同浓度的复智散孵育神经母细胞瘤株SH-SY5Y细胞,利用噻唑蓝比色法测定细胞存活率,制定量-效关系曲线,寻找佳药物浓度;6孔板培养细胞分为正常对照组、淀粉样β蛋白25-35 25μmol/L组、淀粉样β蛋白25-35 25μmol/L+复智散45×10-3g/L组和复智散45×10-3g/L组,孵育24 h,观察细胞形态学改变,测定神经细胞的胞体面积和轴突长度.主要观察指标:①各组SH-SY5Y细胞噻唑蓝代谢率的变化.②各组神经细胞胞体面积及轴突长度.结果:①复智散可增进SH-SY5Y细胞的存活,佳有效浓度为45×10-1g/L.②SH-SY5Y细胞胞体面积和轴突长度:淀粉样β蛋白25-35 25 μmol/L组明显低于正常对照组[(505.5±122.36),(599.8±141.25)μm2;(26.0±13.97),(36.5±15.58)μm,(t=3.903,3.447,P=0.000)].复智散45×10-3 g/L组与淀粉样β蛋白25-35 25 μmol/L+复智散45×1003g/L组均明显高于淀粉样β蛋白25-35 25μmol/L组[(918.3±178.34),(896.6±257.14),(505.5±122.36)μm2;(96.8±43.31),(88.3±30.23),(26.0±13.97)μm,(t=10.922,14.172,P=0.000)].结论:在淀粉样β蛋白25-35损伤条件下复智散依旧有促进培养神经细胞存活的作用,表现在增进细胞胞体面积的增长和轴突的延伸方面.
关键词： 阿尔茨海默病/中药疗法 细胞 培养的 中药学 -
远志散对东莨菪碱致记忆获得性障碍模型小鼠行为学和脑内AchE活性的影响
[目的]观察远志散对东莨菪碱致记忆获得性障碍模型小鼠行为学及脑内乙酰胆碱酯酶(AchE)活性的影响.[方法]将60只昆明种小鼠按体质量随机分为空白组,模型组,阳性药组,远志散低、 中、 高剂量组.除空白组和模型组给予等体积生理盐水,其他各组给予相应药物10 d后,腹腔注射东莨菪碱(3 mg/kg)复制记忆获得性障碍模型.造模结束后,采用Morris水迷宫和跳台试验观察小鼠学习记忆能力,行为学测试结束后检测各组小鼠脑内AchE活性.[结果]与模型组比较,各治疗组均可缩短模型小鼠Morris水迷宫试验逃避潜伏期(P<0.05),增加有效区停留时间及游泳路程(P<0.05),延长跳台试验的潜伏期(P<0.05),降低模型小鼠脑内AchE活性(P<0.05).各治疗组组间比较,差异均无统计学意义(P>0.05).[结论]远志散对东莨菪碱致记忆获得性障碍模型小鼠的学习记忆能力有一定的改善作用,可能与抑制脑内AchE活性有关.
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原儿茶酸对β淀粉样蛋白1-42诱导PC12细胞毒性的保护作用及机制
【目的】探讨原儿茶酸（PCA）在阿尔茨海默病（AD）细胞模型中的保护作用及机制。【方法】采用免疫荧光法鉴定β淀粉样蛋白（Aβ1-42）纤维聚体，将Aβ1-42作用于PC12细胞，并于不同时间点（0、3、6、9、12、24 h）观察细胞形态，采用四甲基偶氮唑盐（MTT）法检测细胞存活率以确定造模条件，并用MTT法检测原儿茶酸对PC12细胞的毒性条件。采用预保护的给药方式，检测不同浓度的原儿茶酸对PC12细胞的干预作用。采用Western-blot法检测自噬相关标记蛋白Beclin1的表达水平，以探究原儿茶酸的保护作用机制。【结果】显微镜下观察到12、24 h时， Aβ1-42白色团块聚集基本稳定，无明显差异， MTT检测细胞损伤率均达40%，由此确定12 h和24 h均可做为AD的造模条件。原儿茶酸在200~800μmol/L浓度作用24 h的条件下，细胞活力显著上升（P<0.01）。 Western-blot结果显示：原儿茶酸可显著增加Beclin1的表达水平。【结论】原儿茶酸有助于改善Aβ1-42诱导的PC12细胞毒性，其机制可能与增加自噬水平有关。
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加味当归芍药散对淀粉样蛋白42诱导脑内炎症因子及CD45、磷酸化tau蛋白表达的影响
[目的]观察淀粉样蛋白(Aβ) 42沉积对大脑海马炎症因子和CD45、磷酸化tau蛋白(p-tau)表达的影响及中药复方加味当归芍药散的干预作用.[方法]选用SD大鼠,随机分为正常对照组,假手术组,AD模型组,中药高、低剂量组(剂量分别为70.654、35.327 g·kg-1·d-1),西乐葆组(剂量为0.183 g·kg-1·d-1)；除前2组外,其他组大鼠均应用立体定位注射方法一次性大脑海马定位注射纤丝状Aβ42复制阿尔茨海默病(AD)病理模型,并给予药物进行干预,采用免疫组织化学方法检测炎症因子及CD45、p-tau表达情况,并用分析软件进行图像分析.[结果]与假手术组比较,AD模型组的白细胞介素-1β(IL-1β)、IL-6及CD45、p-tau的阳性细胞染色面积均显著增加,而染色灰度值均显著下降(P＜0.05或P＜0.01)；与AD模型组比较,各给药组的IL-1β、IL-6阳性染色面积均显著下降(P＜0.05或P＜0.01)；除中药低剂量组IL-1β及西乐葆组IL-6的染色灰度值仅表现为增加的趋势外,其他各给药组的IL-1β、IL-6染色灰度值均显著增加(P＜0.05或P＜0.01)；此外,中药低剂量组和西乐葆组的CD45阳性染色面积均显著下降(P.＜0.05或P＜0.01)；各给药组的p-tau染色面积显著下降(均P＜0.01)；中药低剂量组和西乐葆组的CD45、p-tau染色灰度值均显著升高(P＜0.05或P＜0.01). [结论]抑制小胶质细胞的激活及IL-1β、IL-6等炎症因子的产生,进而抑制tau蛋白的过度磷酸化,可能是加味当归芍药散拮抗AD的主要作用机制.
关键词： 加味当归芍药散/药理学 阿尔茨海默病/中药疗法 炎症因子 海马/病理学 疾病模型 动物 大鼠 -
蛇床子素对Aβ25-35诱导的星形胶质细胞NF-κB活化机制的影响
[目的]探讨蛇床子素(Osthole,Ost)拮抗β淀粉样蛋白25-35(Aβ25-35)毒性损伤、保护神经细胞的作用及其与核因子-κB(NF-κB)活化机制的关系.[方法]以原代培养的大鼠星形胶质细胞(astrocytes,AS)为靶标建立阿尔茨海默病(Alzheimet's disease,AD)细胞模型.采用CcK-8(cell counting kit-8)法检测细胞活力,进行Aβ25-35造模浓度、时间以及Ost预处理适宜浓度的选择.经Aβ25-35和Ost干预后,采用激光共聚焦显微镜检测分析异硫氰酸荧光素/碘化丙啶(FITC/PI)双重标记的NF-κB与其抑制蛋白(IκBα)在细胞内的激活程度,结合形态学观察分析Ost对星形胶质细胞的保护作用.[结果]Ost可拮抗Aβ25-35的神经毒性作用,尤其以低浓度(0.01～1 μmoL/L)为佳,随着浓度的升高,对细胞的保护作用呈减弱趋势.40 μmol/L的Aβ25-35作用于As 24 h可过度活化NF-κB的表达(P<0.01),激活IκBα发生磷酸化及降解(P<0.01).低浓度的Ost可显著抑制NF-κB的过度活化(P<0.01),上调细胞核内IκBα的表达(P<0.01).[结论]Ost抑制Aβ25-35的神经毒性作用,延缓AD发生发展的作用机理可能与NF-κB活化机制有关.
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人参皂苷对Aβ25-35蛋白诱导的老年性痴呆体外模型NG108-15神经元细胞凋亡的抑制作用
[目的]探讨在以NG108-15细胞作为神经元代表、β-淀粉样蛋白25-35片段(Aβ25-35)诱导凋亡的阿尔茨海默病体外细胞模型中,人参皂苷Rg1保护神经元的作用及其机制.[方法]采用倒置显微镜观察细胞形态,结合流式细胞仪检测凋亡率,进行Aβ25-35造模浓度与时间的选择以及Rg1预处理佳浓度时间的选择;在此基础上,采用荧光显微镜和数据处理系统(DMR)图像分析仪检测免疫细胞化学法标记的核因子-κB(NF-κB)的活性;采用免疫组化染色法检测B细胞淋巴瘤/白血病-2(Bcl-2)的表达;采用酶标光度计、半胱氨酸/天冬氨酸蛋白酶-3(caspase-3)比色检测试剂盒检测caspase-3活性.[结果]20μmol/L Aβ25-35作用24 h可诱导NG108-15细胞凋亡,2μmol/L Rg1组的NF-κB活性与模型组比较显著性提高(P＜0.01),Rg1预处理组Bcl-2表达呈阳性,且caspase-3活性较模型组显著性降低(P＜0.01).[结论]高浓度聚焦状的Aβ25-35可下调神经元内NF-κB的活性,诱导细胞凋亡,Rg1通过启动神经元中NF-κB的活化从而上调Bcl-2表达,抑制caspase-3活性而发挥保护神经元的作用.
关键词： 人参皂苷/药理学 阿尔茨海默病/中药疗法 细胞凋亡 淀粉样β蛋白 细胞培养 -
补肾益智方对阿尔茨海默病大鼠模型脑内胆碱能神经系统的保护作用
为探讨自制方补肾益智方(由蛇床子、枸杞子、女贞子、人参、制首乌等组成)治疗阿尔茨海默病(Alzheimer disease,AD)的可能神经生物学机制,应用乙酰胆碱酯酶组织化学染色方法,研究了该方对D-半乳糖合并鹅膏蕈氨酸损毁大脑Meynert基底核的实验性阿尔茨海默病大鼠模型脑内胆碱能神经系统的保护作用,结果显示:补肾益智方灌胃组大鼠脑内广泛区域的乙酰胆碱酯酶阳性神经纤维密度较模型对照组增加(P＜0.05或P＜0.01),提示该方对AD模型脑内胆碱能神经元具有一定的保护作用.
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补肾益智方对老年性痴呆大鼠突触传递长时程增强的影响
观察补肾益智方(蛇床子、枸杞子、女贞子、人参等组成)对老年性痴呆(又称阿尔茨海默病,Alzheimer's disease,AD)模型大鼠突触传递长时程增强现象(long_term potentiation,LTP)的影响,旨在探讨该方治疗AD作用的神经生物学机制.应用D-半乳糖致亚急性衰老合并Meynert基底核损毁建立AD模型大鼠,用补肾益智方对AD大鼠灌胃治疗4周,采用电生理学方法,检测大鼠海马齿状回强直刺激诱发的LTP的变化.结果表明:强直刺激后,各组间兴奋性突触后电位增强差异不明显(P>0.05),补肾益智方高、低剂量组群体峰电位幅度增强较模型组明显提高(P<0.01或P<0.001).提示补肾益智方对AD大鼠齿状回LTP具有改善作用.
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补肾益智方对老年性痴呆大鼠学习记忆能力保护作用的观察
为寻求防治老年性痴呆的有效措施,运用Morris水迷宫评价了中药补肾益智方(由蛇床子、枸杞子、女贞子、人参等组成)对由D_半乳糖致亚急性衰老加上Meynert核损毁所致阿尔茨海默病模型大鼠的学习记忆能力的保护作用.结果表明:补肾益智方能够改善模型大鼠的学习记忆成绩,包括缩短模型大鼠在Morris水迷宫中寻找到平台的逃避潜伏期(P＜0.01),延长其在原平台象限游泳的距离(P＜0.05).提示补肾益智方对阿尔茨海默病模型大鼠的学习记忆能力有一定的保护作用.
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补肾益智方阻抑老年性痴呆大鼠海马突触病理性重构的研究
应用体视学定量分析方法,观察补肾益智方(由蛇床子、枸杞子、女贞子、人参、首乌等组成)对D-半乳糖致亚急性衰老合并Meynert核损毁的老年性痴呆(又称阿尔茨海默病,Alzheimer's disease, AD)模型大鼠海马齿状回分子层突触病理性重构的影响.结果显示,补肾益智方灌胃组大鼠突触数密度较AD模型组明显增加(P＜0.01)、面密度和平均面积显著减少(P＜0.01),而与正常对照组比较无明显差异(P＞0.05),表明该方具有阻止AD模型大鼠海马突触病理性重构的作用,提示对突触可塑性的影响可能是该方改善学习记忆的神经生物学机制之一.
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中医药防治老年性痴呆研究中几个关键问题的思考
老年性痴呆(阿尔茨海默病,Alzheimer'sdisease,AD)是一种原因未明、以认知功能减退为主要临床表现的神经系统退行性疾病,已成为世界范围内危害人类健康严重的疾病之一.中医药防治AD的研究是近年的研究热点.为深入开展AD防治的研究,寻找有效的防治方法,改善和提高患者的生存质量,结合AD现代医学研究进展,就中医药防治AD研究中的几个重要问题进行了较为系统的阐述.强调在中医药防治AD的研究中应注重科学地选择和应用权威的AD临床诊断标准;选择多因素复合动物模型;注意AD的肾虚本质特征和病因病机特点;注意观察指标特异性、敏感性和稳定性的综合考虑,强调功能整合水平观察指标的评价;充分认识中药复方的多途径、多靶点作用优势,开展严格的随机盲法对照临床试验.
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老年性痴呆的危险因素和保护因素以及中医保健养生方法的可能作用
综述了近15年来对老年性痴呆(阿尔茨海默病,Alzheimer's disease,AD)的危险因素和保护因素的研究概况,认为AD公认的危险因素包括有年龄、性别、低教育程度、职业、痴呆家族史、头部外伤等,而早年接受教育或智力因素、抗衰老、预防头部外伤、雌激素替代治疗可能具有防止或延迟AD发生的保护作用.通过对中医保健养生方法可能作用的分析,提出中医保健养生方法可能对AD有保护作用的假说,并就假说提供从回顾性研究到前瞻性研究的验证思路.
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白芍总苷对Aβ342沉积诱导脑内炎症因子及CD45、磷酸化tau蛋白表达的影响
目的:观察Aβ42沉积对大脑海马CD45、炎症因子和磷酸化tau蛋白（p-tau）表达的影响及白芍总苷(TGP)的干预作用.方法:应用立体定位注射技术对12周龄雌性SD大鼠1次性大脑海马定位注射纤丝状A42复制AD病理模型,并给予白芍总苷进行干预,用免疫组化方法显示CD45、炎症因子及p-tau表达情况,并用分析软件进行图像分析.结果:与正常对照组相比,AD模型组的CD45、IL-1β、IL-6及p-tau阳性细胞染色面积（染色面积与染色的阳性细胞数成正比）均增加而染色强度值均下降（蛋白表达量与染色强度值成反比）；与AD模型组比较,各给药组的IL-1β、IL-6染色面积均下降；除西乐葆对照组的IL-6染色强度值仅表现为增加的趋势外,其余各给药组的IL1β、IL-6染色强度值均增加.另外,与AD模型组相比,白芍总苷高剂量组和西乐葆组的p-tau、CD45染色面积均下降而染色强度值均升高,TGP低剂量组的p-tau、CD45染色面积则有下降的趋势而染色强度值则有升高的趋势.结论:Aβ42沉积可诱导大脑海马炎症反应、小胶质细胞激活和炎症细胞因子过表达以及tau蛋白的过度磷酸化,而抑制小胶质细胞的激活及炎症细胞因子的过表达,从而抑制脑内炎症及tau蛋白的过度磷酸化,可能是TGP拮抗AD的主要作用机制.
