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益寿调脂片抗衰老的实验研究
为了观察益寿调脂片抗衰老的作用，采用果蝇自然寿命法及持续注射D-半乳糖致亚急性衰老模型法，观察果蝇半数死亡时间、平均寿命、高寿命时间以及实验致衰老小鼠血清超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性、丙二醛(MDA)、睾酮(T)含量、大脑B型单胺氧化酶(MAO-B)、Na+-K+-ATP酶活性，睾丸、精囊腺重量指数。结果,益寿调脂片可显著延长果蝇的平均寿命，并能延长半数死亡时间及高寿命时间；可升高衰老动物的平均体重；提高衰老动物血清SOD、GSH-Px活性、降低MDA含量；提高衰老动物大脑Na+-K+-ATP酶活性，并抑制大脑MAO-B活性的异常增高；可以升高血清T水平，改善附性器官重量指数。与对照组比较，差异有显著性(P＜0.05或P＜0.01)。结果表明,益寿调脂片具有延缓衰老的作用。
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更年平调液抗衰老的实验研究
目的:针对中老年妇女卵巢机能衰退的特点,研究更年平调液抗衰老的可能机制.方法:分别用更年平调液、金匮肾气丸、古汉养生精、利维爱处理老年雌性大鼠,8周后测血、脑中的脂质过氧化物(LPO)、超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)含量及血中性激素水平;观察子宫、卵巢的形态;检测骨密度.结果:更年平调液能有效改善老年大鼠内分泌状况和自由基代谢;预防骨密度的降低;改善子宫、卵巢形态.结论:更年平调液适于中老年妇女长期服用,以延缓衰老.
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补肾生血药对衰老小鼠Bcl-2mRNA表达的影响
"肾生骨髓"是中医肾生理功能的重要组成部分.因此,肾生髓理论的现代研究在肾本质研究中占有重要的地位.我们实验室自20世纪70年代末以来一直致力于肾生髓理论的现代研究,研究的重要成果之一是补肾生血药的研制成功.该药由熟地黄、何首乌、山茱萸、枸杞子、阿胶等11味中药组成,具有滋阴补肾,益髓生血等功能.20多年来,我们通过对补肾生血药的药效机理的研究,来阐述中医经典理论肾生髓的现代内涵.基因是决定生命结构和功能的根本物质,与作为"先天之本"、"主生殖、生长发育、生髓等"的中医肾的概念可能存在着某些必然的联系.Bcl-2基因(B细胞淋巴瘤/白血病-2基因)是初发现的与细胞凋亡相关的原癌基因,其表达产物Bcl-2主要作用是抑制细胞凋亡.本课题采用老年小鼠和目前应用较成熟的D-半乳糖致衰老小鼠模型,通过观察补肾生血药对其骨髓有核细胞Bcl-2 mRNA表达的影响,来探讨肾生髓的本质相关基因.
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人参养荣汤对衰老小鼠脑神经元形态和密度的影响
目的:观察人参养荣汤对亚急性老化小鼠外观、体重增长率、死亡率、脑神经元形态和密度的影响.方法:69只ICR系小鼠随机分成对照组、模型组、中药组,每组23只,模型组、中药组以D-半乳糖制备老化模型,对照组以等量生理盐水皮下注射;中药组给予人参养荣汤治疗.观察光学显微镜下Golgi染色后小鼠脑组织形态和密度的变化.结果:人参养荣汤能明显抑制老 化小鼠大脑皮质神经元密度的下降(P＜0.01),对海马区神经元密度的作用不显著.结论:人参养荣汤对大脑皮质神经元的保护作用可能是其抗衰老机制之一.
关键词： 衰老/药物作用 神经元/药物作用 人参养荣汤/治疗应用 -
牛蒡根抗衰老作用的实验研究
目的:探讨牛蒡根的抗衰老作用及其机理.方法:牛蒡根水煎大鼠给药30天后,观察肝组织、脑组织、血清中超氧化物歧化酶(SOD)活力、丙二醛(MDA)、脂褐质含量.结果:牛蒡根组肝组织、血清中SOD活力明显提高(P＜0.05或P＜0.01);脑组织、血清中MDA含量明显降低(P＜0.05或P＜0.01);肝组织中脂褐质含量明显降低(P＜0.01).结论:牛蒡根抗衰老作用的主要作用机制是提高SOD活性,降低MDA及脂褐质含量.
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不同补肾健脾化瘀方药对老年小鼠免疫功能及自由基代谢影响的对比研究
目的:从自由基代谢、免疫衰老两方面来验证" 正虚挟瘀"是中医衰老的重要原因/机制.方法:两组老年小鼠连续4周分别灌服不同的补肾健脾化瘀方药后,检测腹腔巨噬细胞产生的白细胞介素1(Interleukin- 1,IL-1)、脾淋巴细胞产生的白细胞介素2(i nt erleukin-2,IL-2)的活性,肝脑的脂质过氧化物(lipid peroxides, LPO)含量以及红细胞清除自由基酶的活性[如超氧化物歧化酶 (superoxide dismutase, SOD)、过氧化氢酶(cat alase, CAT)、谷胱甘肽过氧化物酶(glut athione peroxidase, GSH-Px)].结果: 老年小鼠IL-1、IL-2的产生以及SOD、CAT、GSH-Px均明显低于青年小鼠,而肝脑产生的脂质过氧化物则明显增加. 给药后,两方均可明显调整/恢复上述指标,虽然其作用强度有所不同,但基本上是一致的. 结论:老年机体确实存在脾肾两虚兼瘀血停滞(正虚挟瘀)的体质,用补肾健脾化瘀法调治可起到延缓衰老的作用.
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补肾健脾化瘀方药对老年小鼠免疫功能、自由基代谢及全血粘度的影响
目的:为验证"正虚挟瘀"是中医衰老的重要原因/机制的可靠性及合理性,观察了补肾健脾化瘀天年安对老年小鼠免疫功能、自由基代谢及全血粘度的影响.方法:老年小鼠连续4周灌服天年安后,检测腹腔巨噬细胞产生的白细胞介素1( interleukin-1, IL-1)、脾淋巴细胞产生的白细胞介素2(interleukin-2, IL-2)的活性、全血粘度的变化、肝脑的脂质过氧化(lipid peroxides, LPO)含量以及红细胞清除自由基酶的活性,如超氧化物歧化酶(superoxide dismutase, SOD)、过氧化氢酶(catalase, CAT)、谷胱甘肽过氧化物酶(glutathione peroxidase, GSH-Px).结果:老年小鼠IL-1、IL-2的产生以及SOD、CAT、GSH-Px均明显低于青年小鼠,而肝脑产生的LPO及全血粘度则明显增加.给药后,上述指标均可明显得到改善.结论:说明老年机体确"虚"和"瘀"并存,进一步为我们的观点提供了实验依据;同时也说明IL-2的产生能力降低除与T细胞本身有关外,还与巨噬细胞、自由基代谢等因素有关.
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马齿苋水提液对D-半乳糖致衰老模型小鼠心肌线粒体的保护作用
背景:线粒体是细胞内主要耗氧部位,是产生自由基的主要场所,也是内源性自由基攻击的靶部位,其结构和功能会随着年龄的增加而改变,逐步导致全身性生理功能下降.马齿苋(Portulaca oleracea L.)有长寿菜之称,营养丰富,又有抗自由基作用,其抗衰老作用是否与心肌线粒体的保护有关值得探讨.目的:观察马齿苋水提液对衰老模型小鼠心肌线粒体磷脂的脂质过氧化和呼吸链酶活性的影响,分析其心肌保护作用途径.设计:完全随机分组设计,对照动物实验.单位:佳木斯大学基础医学院生化教研室.材料:①于2004-01/08在佳木斯大学实验动物中心完成动物饲养和实验,在生物化学教研室完成动物的处死、心脏取材、线粒体的制备,在生物化学教研室、大学实验中心、化学与药学院完成指标的测定.选用成年纯系昆明种健康小白鼠30只,雌雄不拘.②按随机摸球法分为3组:青年对照组8只,衰老模型组和模型给药组各11只.③马齿苋由佳木斯市中医药研究所提供,本校生药教研室鉴定,制成含生药浓度1 kg/L水提液.心磷脂标准品由美国Sigma公司提供;丙二醛、Ca2+-ATP酶活性测定试剂盒由南京建成生物工程研究所提供.方法:①衰老模型组每日颈背部皮下注射D-半乳糖100 mg/kg;马齿苋多糖组除注射D-半乳糖外,同时按含生药13 g/(kg·d)灌服马齿苋水提液;青年对照组每日皮下注射等容量的生理盐水.连续给药30 d,于后一次给药次日处死,迅速取心脏,备用.②参考南京建成生物工程研究所提供的方法制备线粒体.按试剂盒说明测定线粒体内丙二醛含量及Ca2+-ATP酶活性;采用高效液相色谱法测定线粒体膜磷脂中心磷脂相对含量;采用伍期专的方法测定复合体Ⅰ及复合体Ⅱ+Ⅲ活性.③计量资料差异比较采用方差分析和t检验.主要观察指标:各组小鼠心肌线粒体膜磷脂组成、线粒体丙二醛含量及复合体Ⅰ、复合体Ⅱ+Ⅲ和Ca2+-ATP酶活性比较.结果:小鼠30只均进入结果分析.①心肌线粒体内丙二醛含量:衰老模型组为(8.827±0.873)μmol/g,高于青年对照组和马齿苋组[(5.194±0.674),(5.901±0.743)μmol/g,t=7.48,7.22,P＜0.01].②心肌线粒体内心磷脂相对含量及Ca2+-ATP酶活性:衰老模型组分别为(0.156±0.012)mg/g,(1.267±0.167)μkat/g,低于青年对照组和马齿苋组[心磷脂:(0.190±0.022),(0.184±0.021)mg/g;Ca2+-ATP酶:(1.870±0.254),(1.780±0.237) μkat/g,t=3.23,5.61,P＜0.05～0.01].③心肌线粒体内复合体Ⅰ和复合体Ⅱ+Ⅲ活性:衰老模型组分别为(3.517±0.383),(20.217±2.200)μkat/g,低于青年对照组和马齿苋组[复合体Ⅰ:(6.817±0.600),(6.067±0.750)μkat/g;复合体Ⅱ+Ⅲ:(56.400±4.933),(51.800±4.217)μkat/g,t=5.74,9.86,P＜0.01].结论:马齿苋水提液可能通过抑制心肌线粒体磷脂的脂质过氧化和改善呼吸链酶的活性而实现对线粒体的保护作用.
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施普善对D-半乳糖拟衰老小鼠学习记忆功能的影响
目的:探讨施普善对D-半乳糖拟衰老小鼠学习记忆能力的影响及其机制.方法:采用D-半乳糖诱导的脑老化小鼠动物模型,分别用游泳水迷宫测定小鼠学习记忆能力;用化学发光法测定超氧化物歧化酶(SOD)活性;用硫代巴比妥酸比色法测定丙二醛含量.结果:D-半乳糖模型组小鼠的游泳时间明显延长[(44.91±12.86)s]、正确次数明显降低[(2.58±1.87)次/d],与正常对照组[(28.11±12.75)s,(4.33±1.72)次/d]相比,差异有显著性意义(t=3.694,t=3.258,P＜0.01).应用施普善6周后,其大、中剂量组小鼠的游泳时间明显降低[(28.06±13.06),(27.85±13.21)s],正确次数明显增加(4.58±1.66),(4.63±1.81)次/d],与D-半乳糖组相比,差异均有显著性意义(t=3.574,3.508;t=3.416,3.349,P＜0.01);并能显著提高脑组织中SOD的活性[(30232.38±51 33.53),(29 653.26±4 878.64)nkat],降低丙二醛含量[(630.00±59.40),(626.74±49.68)nmol/g],与D-半乳糖组[(22 892.74±4 540.07)nkat, (749.69 ±92.80)nmol/g]相比,差异均有显著性意义(t=3.418,3.277;t=3.168,3.337,P＜0.01).结论:施普善能明显的改善D-半乳糖诱导的脑老化小鼠学习记忆能力,提高脑组织中SOD的活性,降低丙二醛的含量.
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枸杞多糖对D-半乳糖致衰老模型大鼠肝脏DNA修复酶8-羟基鸟嘌呤糖苷酶表达的影响
目的:观察不同剂量枸杞多糖对D-半乳糖致衰老模型大鼠8-羟基鸟嘌呤糖苷酶表达的影响.方法:实验于2005-03/08在黑龙江省佳木斯大学生物化学教研室完成.①选用纯系Wistar大鼠40只.随机将大鼠分为4组:衰老组,枸杞多糖大剂量组,枸杞多糖中剂量组,枸杞多糖小剂量组,每组10只.衰老模型对照组:正常饮食,每日上午颈背部皮下按48 mg/kg注射D-半乳糖,同时灌服温开水;枸杞多糖小剂量组、枸杞多糖中剂量组、枸杞多糖大剂量组:每组均正常饮食,除每日上午颈背部皮下按48 mg/kg注射D-半乳糖外,同时分别按10,50,100 mg/kg灌服枸杞多糖(市售枸杞多糖,用双蒸水分别制成10,50,100 g/L溶液),连续给药45 d.②用Trizol法提取肝组织核酸,反转录聚合酶链反应及凝胶成像技术检测8-羟基鸟嘌呤糖苷酶的mRNA表达水平.③计量资料差异比较采用方差分析和q检验.结果:大鼠40只均进入结果分析.大鼠肝脏组织的8-羟基鸟嘌呤糖苷酶mRNA表达水平:枸杞多糖小、中、大剂量组均明显低于衰老模型组(1.129±0.03,0.919±0.044,0.903±0.043,1.233±0.042,P＜0.05),且随剂量的增加,呈下降趋势,枸杞多糖中剂量和大剂量组之间差异不明显.结论:枸杞多糖可以通过降低氧化损伤,减少DNA损伤,继而使修复酶8-羟基鸟嘌呤糖苷酶的表达下降而发挥抗衰老的作用.
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黄芪对老龄小鼠脑神经细胞凋亡及相关基因表达的影响
背景:衰老的细胞死亡的实质就是细胞凋亡,凋亡从某种程度上可理解为一系列基因活动的结果.因此抑制癌基因的表达即可延长细胞的寿命,延缓脑组织衰老.目的:观察老年小鼠脑神经细胞凋亡和相关基因表达的变化及黄芪的干预效应.设计:完全随机分组设计,对照实验.单位:佳木斯大学基础医学院生物化学教研室.材料:实验于2003-12/2004-05佳木斯大学实验动物中心及生物化学实验室完成.选用健康昆明种小鼠24只.其中2月龄小鼠8只(青年组),12月龄小鼠16只.将16只12月龄小鼠随机分为2组:黄芪治疗组和老年对照组,各8只.方法:①黄芪治疗组:灌胃10.8 g/(kg·d)黄芪水煎剂(黄芪购于佳木斯大学第一附属医院中药局,由佳木斯市药品检验所鉴定,制成含生药浓度为2 kg/L的水煎剂);老年对照组和青年组:灌服与黄芪水煎剂体积相等的温开水.均连续干预30 d.②各组小鼠连续干预30 d后断头处死,立即取出脑组织,取大脑中部中性甲醛固定.余脑组织制成制成线粒体悬液,采用黄嘌呤氧化酶法及TBA化学比色法测定脑线粒体锰超氧化物歧化酶活性及丙二醛含量.用原位末端标记法观察老年小鼠神经细胞凋亡率(凋亡的细胞核呈黄色,为阳性细胞),并用免疫组织化学法检测相关基因bcl-2的表达.细胞液染成棕色者为基因表达阳性细胞,400倍显微镜下计数400个细胞,-:阳性细胞所占百分比＜5%;+:阳性细胞所占百分比5%～10%;H:阳性细胞所占百分比11%～50%;卅:阳性细胞所占百分比＞51%.③等级和计量资料差异比较要用秩和检验和t检验.主要观察指标:黄芪对老龄小鼠脑线粒体锰超氧化物歧化酶活性、丙二醛含量、脑细胞凋亡率、脑组织bcl-2基因表达强度的影响.结果:小鼠24只均进入结果分析.①脑线粒体锰超氧化物歧化酶含量:青年组和黄芪治疗组明显高于老年对照组(P＜0.05).②脑线粒体丙二醛含量和脑细胞凋亡率:青年组和黄芪治疗组明显低于老年对照组(P＜0.01).③脑组织bcl-2基因表达:青年组和黄芪治疗组与老年对照组比较,差异明显(P＜0.01).结论:黄芪通过影响锰超氧化物歧化酶活性和丙二醛含量及bcl-2基因表达对老年小鼠脑神经细胞凋亡有明显的抑制作用.
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人参皂甙对大鼠单核细胞因子增龄性变化的影响
用生物学方法观察了人参皂甙(GS)对大鼠外周血单核细胞分泌炎性细胞因子增龄性变化的调节作用.实验结果表明,老年大鼠外周血单核细胞产生白细胞介素1、6、8的能力明显增高.老年鼠给予GS20～40mg·kg-1后,可使单核细胞分泌IL-1和IL-6的能力显著下降,但对IL-8的影响无显著性差异.结果提示,炎性细胞因子与衰老的关系密切,抑制炎性细胞因子IL-1和IL-6的产生可能是人参皂甙延缓衰老的作用机制之一.
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保肾汤对实验性肾衰老大鼠组织学的影响
目的:观察保肾汤对实验性肾衰老大鼠组织形态学的影响.方法:采用D-半乳糖皮下注射法制作大鼠肾衰老模型,观察保肾汤对其肾脏组织学变化的影响,并以维生素E做对照.结果:光镜显示中药组肾小球球体截面积较西药和模型组大,分布相对密集,球内充血现象较其它各组明显,肾小球萎缩、早期纤维化及间质纤维化均较西药组和模型组少、程度轻,肾小管未见蛋白管型;能有效地减少肾小囊囊腔的增宽,防止或延缓肾小球毛细血管萎陷、肾单位数目减少.结论:保肾汤能改善肾脏形态结构,防止肾脏器官老化.
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泥鳅有机提取物抗氧化作用的实验研究
目的:探讨泥鳅有机提取物的抗氧化作用.方法:应用食品功效学实验中小鼠组织中过氧化脂质含量、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)和超氧化物歧化酶(SOD)活力测定的方法进行测定.结果:泥鳅有机提取物实验组小白鼠的肝、肾脏器谷胱甘肽过氧化物酶和超氧化物歧化酶的活性高于对照组;各脏器的丙二醛(MDA)的含量低于对照组.结论:泥鳅有机提取物具有一定的抗氧化作用,并提示可能具有延缓衰老作用.
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强延龄免疫调节作用的实验研究
目的:观察抗衰老药物强延龄的免疫调节作用.方法:将药物设3剂量组,分别观察对小鼠迟发型变态反应、超敏反应的影响及对正常小鼠PFC、血清溶血素水平和单核-巨噬细胞功能的作用.结果:强延龄3剂量组可明显降低小鼠足跖肿胀和耳廓肿胀程度,明显增加血清溶血素水平,中、高剂量组可明显增强单核-巨噬细胞吞噬指数,大剂量组可明显提高PFC数量,对胸腺及脾重无明显影响.结论:强延龄可明显增强细胞免疫、体液免疫及单核一巨噬细胞功能.
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加减益气聪明汤及单味黄芪药物血清对成纤维细胞胶原合成速率的影响
本实验观察了加减益气聪明汤和单味黄芪鼠血清对体外培养成纤维细胞胶原合成速率的影响.结果表明与青年鼠血清比较,老年鼠血清可明显增高成纤维细胞胶原合成速率;而加减益气聪明汤鼠血清和单味黄芪鼠血清均可显著降低成纤维细胞胶原合成速率.提示补气方药可以通过抑制胶原蛋白的合成,改善结缔组织增生和血管硬化,增加血管弹性,提高供血量,从而使衰老机体的动脉硬化症状得到改善.
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天然脑活素延缓人胚肺二倍体成纤维细胞复制性衰老作用的动态观察
目的:动态观察天然脑活素延缓人胚肺二倍体成纤维细胞(MRC-5)复制性衰老的作用及其机制.方法:镜下观察细胞形态变化,绘制细胞生长曲线,并于给药后12、24、48、72、96小时以MTT法动态检测细胞增殖活度.结果:天然脑活素孵育的MRC-5细胞老龄化不明显,细胞增殖能力较空白老龄对照组明显增加(P＜0.05).结论:天然脑活素可明显促进细胞增殖,有效延缓细胞的复制性衰老.
关键词： @天然脑活素/药理学 衰老/药物作用 血清药理学 兔 -
蜂胶增强蜂皇浆生物活性作用的实验研究
目的:探讨蜂胶对蜂皇浆生物活性的增强作用.方法:观察皇浆蜂胶粉对中老年大鼠免疫功能、性腺器官及血常规的影响,并以皇浆和蜂胶作对照组.结果:3种药物均可明显提高大鼠T淋转功能、NK细胞活性、MФ吞噬功能和胸腺重量,以皇浆蜂胶粉作用明显.另外,皇浆蜂胶粉和皇浆粉可明显增加中老年大鼠卵巢重量.对血常规均无明显影响.结论:蜂胶可明显增强蜂皇浆的增强免疫功能和延衰作用.
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天然脑活素对人胚肺二倍体成纤维细胞衰老模型β-半乳糖苷酶活性的影响
目的:探讨天然脑活素延缓人胚肺二倍体成纤维细胞(MRC-5)复制性衰老的分子机制.方法:镜下观察细胞形态变化,β-半乳糖苷酶(AA-β-Gal)染色法观察细胞衰老相关β-半乳糖苷酶活性的改变,计数阳性细胞率.结果:天然脑活素连续培养的细胞在老龄阶段SA-β-Gal阳性率均显著低于老龄对照细胞(P＜0.01).结论:天然脑活素可能通过降低SA-β-Gal酶活性而有效延缓细胞的复制性衰老.
关键词： @天然脑活素、药理学 衰老/药物作用 血清药理学 兔 -
延衰胶囊Ⅱ号对动物及其子代寿命影响的实验研究
目的:观察延衰胶囊Ⅱ号对动物及其子代寿命的影响.方法:选择雄性NIH小鼠以O3复制衰老模型,设立正常对照组、阳性对照组、延衰胶囊Ⅱ号1组和延衰胶囊Ⅱ号2组.分别进行各组小鼠过氧化脂质(LPO)含量测定、全血超氧化物歧化酶(SOD)含量测定、耐力实验、耐缺氧实验和心、肝、肾组织超微结构的电子显微镜观察.结果:延衰胶囊Ⅱ号使果蝇及其子代平均寿命延长,与正常对照组比较有显著的意义(P＜0.01),与阳性对照组维生素E效果一致.延衰胶囊Ⅱ号各剂量组和阳性对照组均能明显降低LPO含量,升高SOD含量,延长游泳时间和耐缺氧时间,与模型对照组之差别有显著意义(P＜0.01).电子显微镜观察心、肝、肾组织的结果表明:模型组小鼠的心、肝、肾组织损伤严重,与正常对照组之间差异显著,和机体细胞衰老变化相吻合.应用延衰胶囊Ⅱ号小鼠上述损伤明显减轻.心、肝、肾细胞形态结构基本正常与阳性对照组效果一致,且减轻衰老所致心、肝、肾细胞损伤的功效比维生素E稍强.结论:延衰胶囊Ⅱ号具有显著延缓衰老的作用.
