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密码子偏性对痘苗病毒载体表达效率影响的研究
为了研究密码子偏性对痘苗病毒载体表达效率的影响,分别采用痘苗病毒及其宿主细胞的优势密码子对绿色荧光蛋白基因进行改造,利用荧光、Western blot和FCM等方法分析其在痘苗病毒载体系统的表达水平.结果显示,全部采用痘苗病毒优势密码子(富含A+T)和全部采用宿主细胞优势密码子(富含G+C),以及部分使用宿主细胞优势密码子的三种绿色荧光蛋白基因都能够有效表达,表达水平相近,表明痘苗病毒载体对目的基因密码子的使用具有很好宽容性.为了探讨这种宽容性的机理,分别利用在胞核内和在胞浆内转录的质粒载体对不同密码子偏性的绿色荧光蛋白基因进行表达分析.结果显示,胞核内转录目的基因的pcDNA3质粒载体能有效表达富含G+C的绿色荧光蛋白基因,不能有效表达富含A+T的绿色荧光蛋白基因,而胞浆内转录目的基因的pSCA质粒载体能同样有效表达上述不同密码子偏性的目的基因.这些结果表明,位于胞浆内的富含A+U的转录产物能够有效表达,细胞核内生成的富含A+U的转录产物可能受核膜屏障或其它核内因素影响而不能有效表达.因此,胞浆内繁殖的特性是痘苗病毒载体具有密码子宽容性的主要原因.此研究为痘苗病毒载体和常用真核表达载体的选择使用提供了重要实验依据.
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密码子优化及其在DNA疫苗中应用的研究进展
近年来,DNA疫苗已在寄生虫病、结核病、艾滋病、肿瘤等领域进行了广泛的研究,但其保护作用常常并不理想.不同物种在密码子使用上的偏性导致外源抗原基冈在不同宿主中不能有效表达,这可能是影响DNA疫苗效能的主要凶素之一.已证实密码子优化后能显著增加蛋白的表达量,提高疫苗的保护率.该文就密码子偏性、密码子优化以及其在疟疾、艾滋病等DNA疫苗中的应用研究进展作一介绍.
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病毒密码子偏性及其研究意义
密码子偏性是生物体内普遍存在的现象,并受到多种因素的影响.开展针对病毒密码子偏性的相关研究,将对病毒生物学的各项研究起到重要作用.此文对影响病毒密码子偏性的因素和病毒密码子偏性的研究意义进行综述.
