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单纯疱疹病毒Ⅱ型CTCF结合位点抑制启动子功能
为了找到CTCF在单纯疱疹病毒Ⅱ型(HSV-2)中的结合位点,并探讨其基因表达调控作用.对比HSV-1与HSV-2全基因组中CTCF结合序列区别;生物信息学分析HSV-2全基因组;Jaspar在线预测CTCF结合位点;依据CTCF结合的序列特点预测结合位置;PCR扩增预测位点并插入pGL3-promoter构建重组载体;重组载体转染人胚胎肾细胞(293T)双荧光检测验证预测位点转录调控效应.预测得到三个CTCF结合位点分别位于潜伏相关转录本(LAT)上游(CTUL)、下游(CTa'm)及内含子(CTRL)位置;扩增目的片段并构建重组载体,双酶切及测序验证成功;双荧光检测显示LAT内含子(pGL3-promoter-CTRL)及下游(pGL3-promoter-CTa' m)结合位点重组载体转染组与pGL3-promoter载体转染组相比,荧光强度明显减弱,差异有统计学意(P＜0.001),但与pGL3-basic组相比,并没有完全沉默荧光霉素的表达;上游结合位点重组载体(pGL3-promoter-CTUL)转染组与pGL3-promoter 相比无明显差异(P＞0.05).HSV-2 LAT序列内含子及下游序列上存在CTCF结合位点,具有减弱基因启动子功能的效应,可能在HSV-2维持潜伏中发挥作用.
关键词： 单纯疱疹病毒Ⅱ型(HSV-2) 潜伏复发机制 CTCF 基因表达调控 -
MSM HIV、梅毒、HSV-2新发感染及队列保持影响因素
目的 了解广西南宁市男男性行为人群(MSM)艾滋病病毒(HIV)、梅毒、单纯疱疹病毒Ⅱ型(HSV-2)新发感染率,分析队列保持的影响因素,为南宁市MSM艾滋病预防策略和措施的制定和调整提供科学依据.方法 利用滚雪球法招募研究对象,分别在基线调查后的6个月和12个月对MSM进行随访,随访内容包括问卷调查和HIV、梅毒、HSV-2检测.结果 12个月随访时,MSM人群HIV新发感染率为1.1/100人年(95％CI=0～3.3),梅毒新发感染率为6.8/100人年(95％ CI=2.1 ～11.5),HSV-2新发感染率为5.2/100人年(95％ CI=1.0～9.3)；多因素logistic回归分析结果表明,6个月能随访到(OR=12.597)、在南宁市居住时间≥1年(OR =2.831)、近6个月与女性发生过性行为(OR=5.359)是MSM队列保持的独立影响因素.结论 南宁市MSM人群HIV新发感染率低于全国其他地方报道；队列保持率较低,参加6个月随访、南宁市居住时间长、近6个月与女性发生过性行为是此次研究队列保持的独立影响因素.
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北京市MSM HIV、梅毒和HSV-Ⅱ感染及影响因素分析
目的 了解北京市男男性行为人群( MSM)的人类免疫缺陷病毒(HIV)、梅毒及单纯疱疹病毒Ⅱ型( HSV-2)的感染情况及影响因素.方法 2009年8-12月在北京市招募962名MSM进行一对一问卷调查,静脉取血进行HIV、梅毒和HSV-Ⅱ检测.结果 在调查的962人中,近6个月有91.27％( 878/962)的人发生过肛交性行为,平均与3(范围1 ～413)名男性发生过性行为,有74.60％( 655/878)在近1次发生性行为时使用了安全套,49.66％(436/878)近6个月在与男性肛交时每次都使用安全套；HIV感染率为6.34％( 61/962),梅毒感染率为17.67％(170/962),其中活跃期梅毒感染率为9.88％(95/962),HSV-2特异性IgG抗体阳性率为5.30％(51/962);多因素Logistic回归分析显示:与HIV、活跃期梅毒、HSV-Ⅱ感染有统计学意义的因素分别是:非北京市户籍、近6个月与男性发生过性行为的人数＞3人和活跃期梅毒；大专以下学历、HIV阳性和HSV-2阳性；年龄＞25岁、大专以下学历、近6个月与男性发生过性行为的人数＞3人、近6个月与男性发生过无保护性行为、活跃期梅毒.结论 北京市MSM人群HIV、梅毒及HSV-2感染率较高,应进一步加强有效的宣传教育和行为干预.
关键词： 男男性行为者 活跃期梅毒 艾滋病 单纯疱疹病毒Ⅱ型(HSV-2) 感染率 -
邻苯二甲酸酐修饰卵清蛋白体外抗单纯疱疹病毒Ⅱ型的活性研究
目的 研究邻苯二甲酸酐修饰卵清蛋白(3-Hydroxyphthalic anhydride-modified ovalbumin,HP-OVA)体外对抗单纯疱疹病毒Ⅱ型(HSV-2)的活性.方法 采用化学修饰的方法将3-羟基.邻苯二甲酸酐(HP)修饰卵清蛋白(OVA),合成酸酐修饰蛋白HP-OVA;选用HSV-2 333病毒株及非洲绿猴肾细胞(vero 细胞)靶细胞,采用MTT比色法检测HP-OVA的体外抗HSV-2病毒活性及其对Vero细胞的体外细胞毒性;镜检观察HP-OVA对17株阴道收集的乳酸杆菌的抑菌作用.结果 酸酐修饰卵清蛋白HP-OVA对HSV-2病毒具有明显抑制作用,其IC50为23.56±8.33 μg/ml,且其对病毒作用靶细胞毒性较低,CC50>1 mg/ml,对17株阴道乳酸杆菌均无明显抑制作用,MIC>1 mg/ml.结论 酸酐修饰蛋白HP-OVA体外有较好的抗HSV-2病毒的活性,有望被开发为预防性传播性疾病的候选杀微生物剂.
