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乙型肝炎病毒反式激活因子XTP4促进肝癌细胞系迁移和侵袭
目的 探讨在肝癌细胞系HepG2中过表达或干扰XTP4表达对细胞迁移和侵袭能力的影响.方法 实验分对照组、过表达组和干扰组,将构建成功的XTP4质粒和化学合成的XTP4小干扰RNA(siRNA)瞬时转染入HepG2,培养48 h后,实时荧光定量PCR(RT-q PCR)和蛋白印迹(Western blot)检测细胞内XTP4 mRNA和蛋白表达;Snail和NF-κB以及上皮间质转化(EMT)相关分子的表达.并通过细胞划痕愈合实验、Transwell迁移侵袭实验观察细胞迁移侵袭能力.结果 成功重培养并提取出XTP4质粒;过表达组XTP4的转录水平和翻译水平均明显高于对照组(P<0.05);迁移和侵袭能力明显增加(P<0.05);下游分子NF-κB、Snail和MMP-9表达均增加(P<0.05);干扰组XTP4的转录水平和翻译水平较对照组均明显降低(P<0.05);迁移和侵袭能力也明显降低(P<0.05);NF-κB、Snail和MMP-9表达减少(P<0.05).结论 乙型肝炎病毒反式激活因子XTP4可促进HepG2迁移和侵袭,与NF-κB、Snail和MMP-9调节相关,EMT相关分子E-cadherin、N-cadherin可能参与其中.
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HBX蛋白反式激活基因XTP4抑制HepG2细胞凋亡
目的 探讨乙型肝炎病毒X蛋白(HBXAg)反式激活基因4(XTP4)对肝母细胞瘤细胞HepG2细胞凋亡的影响.方法 构建XTP4基因的真核表达质粒pcDNA3.1/myc-His(-)A-XTP4 (pXTP4)及化学合成XTP4基因的干扰RNA (siXTP4)后,分别将XTP4基因的真核表达质粒、干扰RNA及各自的阴性对照(NC、siNC)瞬时转染HepG2细胞中,48 h后进行以下实验:用Western blot验证XTP4在蛋白水平的过表达和干扰表达;流式细胞术检测细胞凋亡;Western blot检测Bcl-2、Bax蛋白水平并计算Bcl-2/Bax比值;化学发光法检测胱冬肽酶-3(caspase-3)的活性.结果 成功构建了XTP4的真核表达质粒pXTP4、XTP4在蛋白水平过表达和干扰表达.与各自的阴性对照组相比,过表达XTP4的HepG2细胞中,Annexin V+细胞数显著减少(P＜0.05),Bcl-2/Bax比值增高(P＜0.05),胱冬肽酶-3活性下降(P＜0.05);而干扰XTP4表达的HepG2细胞中,Annexin V+细胞数显著增加(P＜0.05),Bcl-2/Bax比值降低(P＜0.05),胱冬肽酶-3活性上升(P＜0.05).结论 XTP4具有抑制HepG2细胞凋亡的作用,可能是通过增加Bcl-2/Bax的比值实现.
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乙型肝炎病毒X蛋白反式激活基因XTP4与肿瘤发生发展的关系
乙型肝炎病毒X蛋白反式激活基因XTP4是近年来发现的与肿瘤发生发展相关的新基因.众多研究显示XTP4基因表达异常与乳腺癌、前列腺癌、胃癌、结直肠癌、卵巢癌、非小细胞肺癌和肝细胞肝癌等肿瘤密切相关.XTP4基因在肿瘤过度增殖和转移侵袭、肿瘤分级与分期以及化疗耐药等过程中发挥作用.本文将对XTP4基因的结构、功能以及与肿瘤发生发展的关系进行综述,以利于后期对其功能进行深入研究.
