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FBI-1基因在前列腺癌中的研究进展
原癌基因FBI-1又称ZBTB7、LRF和Pokemon,其编码产物属于POK蛋白家族成员,具有转录抑制功能.过度表达的FBI-1可以通过其特殊的蛋白质结构组成抑制Rb基因及ARF基因的表达,并且其在肿瘤的发生、发展及转归上具有重要作用.近年来,有很多医学机构对FBI-1基因与前列腺肿瘤进行了研究.原癌基因FBI-1有望成为肿瘤预防、诊断、治疗、预后评价的新靶标.
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沉默FBI-1基因对三阴性乳腺癌细胞MDA-MB-231增殖和凋亡的影响
本研究旨在观察短发夹状RNA (short hairpin RNA,shRNA)介导的人类免疫缺陷病毒短转录诱导物连接因子1(FBI-1)基因沉默对三阴性乳腺癌细胞MDA-MB-231增殖和凋亡的影响.用qRT-PCR和Western blot分别检测FBI-1、Bcl-2、Bax、cleaved-Caspase 3和Survivin的mRNA和/或蛋白的表达水平;采用shRNA干扰技术沉默MDA-MB-231细胞中FBI-1基因的表达;用CCK-8法以及克隆形成实验检测细胞增殖;用流式细胞术检测细胞凋亡;用裸鼠皮下成瘤实验检测细胞的成瘤能力.结果显示,MDA-MB-231细胞的FBI-1 mRNA和蛋白的表达水平明显高于正常乳腺上皮细胞MCF-10A;经shRNA靶向沉默FBI-1基因表达后,细胞增殖能力明显降低,细胞凋亡率显著增高,伴随Bcl-2和Survivin蛋白表达明显下调、Bax蛋白表达显著上调和Caspase 3活化,MDA-MB-231细胞的裸鼠皮下成瘤能力受抑制.以上结果提示,靶向沉默FBI-1基因表达可以抑制MDA-MB-231细胞增殖,诱导细胞凋亡并抑制细胞的裸鼠皮下成瘤能力.
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转录因子FBI-1的结构与功能
FBI-1是一个新近发现的和转录相关的胞内蛋白,属于POK蛋白家族成员.FBI-1通过直接结合DNA或者与其他蛋白形成复合物影响目的基因的转录水平,从而推动肿瘤的生长、促进细胞黏附拮抗凋亡、促进前体细胞分化.
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沉默FBI-1基因对乳腺癌MCF-7细胞周期和凋亡的影响
目的 研究沉默FBI-1基因表达对乳腺癌MCF-7细胞周期和凋亡的影响,并探讨可能的作用机制.方法 采用shRNA干扰技术沉默MCF-7细胞中FBI-1基因的表达,qRT-PCR及Western blot鉴定FBI-1基因的沉默效率.流式细胞术检测细胞周期和凋亡情况,qRT-PCR及Western blot检测p53和p21表达.结果 经shRNA干扰后FBI-1 mRNA和蛋白水平显著降低;FBI-1基因沉默后,G0/G1期细胞数明显增加,S期和G2/M期细胞数显著下降,细胞凋亡率显著增高,p53和p21 mRNA及蛋白表达明显上调.结论 沉默FBI-1基因表达可诱导细胞G1/G2期阻滞和细胞凋亡,其机制可能通过上调p53和p21 mRNA及蛋白表达有关.
