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高效液相色谱法测定血清碘海醇浓度方法的建立和应用
目的 建立利用高效液相色谱法(HPLC)测定血清碘海醇浓度的方法,为碘海醇血浆清除率临床应用及推广提供方法学支持.方法 设定色谱条件,对HPLC测定血清碘海醇浓度的方法进行方法学验证.对33例慢性肾脏病(CKD)儿童同时进行碘海醇清除率与99mTc-DTPA血浆清除率测定,并采用新Schwartz公式估算肾小球滤过率(eGFR).以99mTc-DTPA血浆清除率为参照,分析碘海醇清除率及eGFR与参照方法的相关性和一致性.结果 在设定HPLC色谱条件下,碘海醇浓度在10～1 000 mg/L范围内线性良好(R2 =0.9998).批间测量和批内测量相对标准偏差(RSD％)＜5％,平均回收率(R％)＞96％.碘海醇血浆清除率、eGFR与99mTc-DTPA血浆清除率的相关系数(r)分别为0.95和0.63,偏差分别为(6.24±10.81)mL/(min·1.73 m2)和(12.11±22.96) mL/(min·1.73 m2).结论 建立了测定血清碘海醇浓度的HPLC法;初步探索并验证了碘海醇血浆清除率评价儿童肾功能的准确、可行.
关键词： 高压液相色谱(HPLC) 碘海醇 含量测定 儿童 -
一种新Pre-S(2)合成肽CTL表位糖基化方法
目的为研究HBV Pre-S(2)上糖基化(Glycosylation)结构差异(包括位置、种类、数量和糖链长度差异)与其生物学活性关系,建立一种N-或O-连接糖基化以外的合成肽α-和ε-氨基糖基化方法.方法用化学方法将单、双和聚糖共价连接在Pre-S(2)合成肽上的含α-和ε-氨基的氨基酸残基上,即具体连接在肽N端M1的α-氨基和K16的ε-氨基上.此二氨基酸残基位于或接近Pre-S(2)上公认的一个CTL表位,氨基酸残基1～15.结果Pre-S(2)合成肽聚糖(Mannan)、单糖(GalNAc)和双糖(Glc-Gal)糖基化的收益率分别为24.0%、24.5%和21.0%.经还原处理后,稳定性显著增加.HPLC图谱显示一包容峰.结论结果显示此方法具较高的糖基化效率,为研究Pre-S2糖肽免疫学活性提供了一种新手段.但存在糖基化的均一性欠佳,费时较长的缺点.
关键词： 糖基化 多肽合成 Pre-S(2) 高压液相色谱(HPLC) -
O-乙酰氨基半乳糖基化氨基酸的化学合成
目的为获得精确定位糖基化糖肽,合成O-乙酰氨基半乳糖基化氨基酸,作为糖肽固相合成的原料.方法利用环状糖结构的半缩醛羟基可与含侧链羟基氨基酸的羟基形成糖苷键,用化学方法,使过乙酰化GalNAc与氨基被9-Fluorenylmethoxycarbonyl(N-α-Fmoc)保护的丝氨酸或苏氨酸连接.结果反应产物通过反相制备HPLC纯化后,可作为O-连接糖肽合成构建单位(Building blocks)在固相多肽合成仪上合成所需的病毒或肿瘤相关糖肽,并可进一步研究其生物学活性.结论本法相对易操作,重复性好,收益率也较高,更重要的是糖基化的均一性好,对推动糖肽研究具有重要意义.
关键词： O-糖基化 糖肽合成 糖肽合成构建单位 高压液相色谱(HPLC)
