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脂多糖诱发急性肺炎时中性粒细胞碱性磷酸酶细胞化学定位观察
目的探讨脂多糖诱发急性肺炎时,大白鼠中性粒细胞碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)的超微定位及其在炎症过程中的相关功能. 方法采用腹腔内(intraperitoneal,IP)注射及气管内(intratracheal,IT)滴注脂多糖(lipopolysaccharide,LPS,一种提自大肠杆菌的内毒素)的方式诱发大白鼠急性肺炎,使中性粒细胞在肺内不同部位集聚.用铈作为捕捉剂,以检测ALP活性.对照组为介质中除去底物或加入2mmol/L左旋咪唑.电镜下行酶活性定位观察. 结果 IP注射主要导致中性粒细胞在鼠肺肺泡隔毛细血管内集聚,而IT注射多致中性粒细胞聚集于肺泡腔中.在偶见的非炎区肺内中性粒细胞,ALP活性产物主要以小球状或管状的膜包颗粒存在于胞质中.LPS腹腔内注射组中,ALP活性除出现于胞质内,还呈现于中性粒细胞的质膜表面;在气管内给药组,与毛细血管内皮细胞或肺泡上皮细胞相接触的中性粒细胞质膜表面ALP活性有所增强,而肺泡腔的中性粒细胞质膜表面ALP活性减弱.在各组标本中,对照组均为ALP阴性. 结论大鼠肺中性粒细胞ALP活性可经LPS注射而增强,其活性可能和细胞与细胞间的粘连、细胞外环境以及与细胞的功能状态有关.
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豚鼠耳蜗Ca2+-ATP酶活性的超微细胞化学定位
目的为观察耳蜗Ca2+-ATP酶的定位,建立一种检测内淋巴积水的超微细胞化学手段,进一步探讨Ca2+-ATP酶在调节耳蜗钙浓度方面的作用.方法采用柠檬酸铅超微细胞化学染色方法观察12只豚鼠耳蜗内Ca2+-ATP酶活性.结果 Ca2+-ATP酶活性反应产物是柠檬酸铅颗粒,主要表达在前庭膜内淋巴侧的细胞膜表面和微绒毛上,内、外毛细胞的静纤毛和皮板上,外毛细胞的基底侧细胞膜和血管纹基底细胞的内皱折膜上也可观察到Ca2+-ATP酶反应产物.结论柠檬酸铅组织化学一步法能系统测定Ca2+-ATP酶在耳蜗的定位,为探索此酶在耳蜗的作用建立了一种观察手段.本文结果提示Ca2+-ATP酶在调节内耳钙浓度方面起着重要的作用.
