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腺病毒介导的IL-24基因对胶质瘤细胞系U251拓扑异构酶Ⅱα及Caspase-3表达的影响
目的 探讨腺病毒介导的IL-24基因(Ad5F35-hIL-24)对胶质瘤细胞系U251拓扑异构酶Ⅱα(topoⅡα)及Caspase-3表达的影响.方法 应用腺病毒载体将IL-24基因转染U251细胞后,采用四甲基偶氮唑盐(MTT)方法观察Ad5F35-hIL-24对U251细胞的抑制作用;Hoechst 33258荧光染色,以及流式细胞术测定细胞凋亡;应用免疫组织化学方法检测topoⅡα表达;免疫印迹法检测topoⅡα和Caspase-3蛋白质表达变化;Transwell实验观察Ad5F35-hIL-24对U251细胞侵袭力的影响.结果 与对照组相比,Ad5F35-hIL-24对胶质瘤细胞有明显抑制作用,能显著诱导细胞凋亡,且呈浓度依赖性;免疫组织化学法显示,Ad5F35-hIL-24能明显抑制topoⅡα表达;免疫印迹检测表明,topoⅡα表达明显降低,而Caspase-3蛋白的表达水平增加;Transwell实验表明,Ad5F35-hIL-24能明显降低U251细胞的侵袭能力.结论 外源性IL-24基因能显著抑制胶质瘤细胞增殖,诱导细胞凋亡;topoⅡα及Caspase-3是其重要的作用靶点.该结果对于IL-24基因用于临床治疗胶质瘤有一定参考意义.
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腺病毒介导IL-24基因对瘢痕疙瘩表达PAI-1及Ⅰ、Ⅲ型胶原蛋白的影响
目的 探讨腺病毒介导白细胞介素-24基因对瘢痕疙瘩成纤维细胞中纤溶酶原激活物抑制剂-1和Ⅰ、Ⅲ型胶原蛋白mRNA及蛋白水平表达的影响.方法 构建白细胞介素-24-腺病毒载体,感染瘢痕疙瘩成纤维细胞,并设置阴性对照组和空白对照组.应用实时定量PCR检测纤溶酶原激活物抑制剂-1及Ⅰ、Ⅲ胶原蛋白mRNA表达的变化,Western Blot检测纤溶酶原激活物抑制剂-1及Ⅰ、Ⅲ型胶原蛋白水平表达的变化.结果 白细胞介素-24腺病毒载体感染瘢痕疙瘩成纤维细胞后,与阴性对照组相比,感染组纤溶酶原激活物抑制剂-1和Ⅰ、Ⅲ型胶原蛋白mRNA及蛋白表达量降低(P＜0.05).空白对照组与阴性对照组差异无统计学意义(P＞0.05).结论 白细胞介素-24腺病毒载体可能通过调节纤溶酶原激活物抑制剂1及Ⅰ、Ⅲ型胶原蛋白mRNA及蛋白的表达,减少瘢痕疙瘩成纤维细胞胶原等细胞外基质的沉积.
