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犬蠕形螨病诊断抗原制备研究
通过刮取重症病犬蠕形螨发病部位的皮屑,用5%NaOH消化2h后进行虫体浓集,将浓集的虫体冻融、研磨、超声破碎,经8 000r/min离心20min,取上清为蠕形螨盐溶性粗抗原;将沉渣用尿素混匀,再次超声,经8 000r/min离心20min,取上清为蠕形螨尿素溶性粗抗原.所得抗原用Bradford法进行蛋白浓度检测,浓度分别为1.4mg/mL和1.1mg/mL.经过葡聚糖凝胶层析(G-100),分别得到两个层析峰.经SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳,盐溶性粗抗原显示2条主蛋白带,分子量约为45.7kDa和27.5kDa;尿素溶性粗抗原显示2条主蛋白带,分子量约为46.8kDa和27.5kDa,用正常犬皮处理的对照抗原却出现至少9条蛋白带,分子量范围为:27kDa～110kDa.将抗原稀释至1:300,血清按1:300稀释,酶标SPA(葡萄球菌A蛋白)作为二抗,通过ELISA检测,尿素溶性粗抗原层析峰第一峰具有较好抗原性,实际检测12例临床检查发现蠕形螨的临床病犬和19例未发现蠕形螨的临床健康犬,阳性符合率和阴性符合率分别为91.67%和78.95%.经与其他皮肤病犬进行检测发现该抗原能较好地与其他皮肤病进行鉴别,与猪蠕形螨阳性血清有一定的交叉反应.获得了敏感性和特异性较高的犬蠕形螨病诊断抗原.
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犬蠕形螨病病理组织学观察
目的研究蠕形螨病病犬皮肤、淋巴结及内脏中蠕形螨的寄生情况及病理组织学变化. 方法解剖蠕形螨病病犬,分别对皮肤、腮腺淋巴结、下颌淋巴结等13个部位淋巴结以及肺脏、肝脏、肾脏、脾脏、心脏等分别用5%NaOH消化法和病理组织切片法进行检查,并测量虫体大小. 结果除了在重症蠕形螨病病犬的皮肤组织外,在部分浅表淋巴结中也检查到了蠕形螨虫体和虫卵,而内脏中除了肝脏、肺脏外,其他脏器未查到蠕形螨虫体和虫卵.皮肤病变主要发生于毛囊和真皮,破坏的毛囊周围组织见以淋巴细胞为主的炎性细胞浸润病变,并有程度不同的炎性细胞浸润和结缔组织增生,病变淋巴结均呈现不同程度的增生性淋巴结炎、出血性淋巴结炎和卡他性淋巴结炎.而各脏器切片均未发现有明显病变.经对皮肤和淋巴结内虫体进行测量,淋巴结内成虫明显比皮肤内的小(P＜0.01).而若虫大小及虫卵大小则差异不明显(P＞0.05). 结论蠕形螨不仅寄生于犬皮肤,还能在许多浅表淋巴结寄生,并能造成明显病变.
