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人源蓝氏贾第虫病毒GLV1518-2322基因的表达及表达产物抗血清的制备
根据中国人源蓝氏贾第虫病毒(GLV)全基因组测序结果,将其全基因组cDNA上编码贾第虫病毒部分衣壳蛋白的GLV1518-2322基因克隆到原核表达载体pET-28c(+)上,构建了原核表达重组质粒pET-28c(+)-GLV1518-2322.SDS-PAGE分析表明,经IPTG诱导,32kDa蛋白基因在大肠杆菌B21(DE3)plvsS中得到高效表达.以纯化的表达产物为抗原,免疫BalB/c小鼠,同时用病毒粒子免疫BalB/c小鼠,制备了中国人源蓝氏贾第虫病毒GLV1518-2322蛋白特异性抗血清,ELISA方法测得的纯化蛋白适抗原包被浓度为1/400和病毒粒子抗血清佳工作浓度为1/200.
关键词: 贾第虫病毒 蓝氏贾第虫 GLV1518-2322 -
蓝氏贾第鞭毛虫病毒研究进展
自从1972年Mattern等[1,2]首次在溶组织阿米巴的某些虫株中发现病毒样粒子后,人们相继在阴道毛滴虫[3]、蓝氏贾第鞭毛虫(简称贾第虫)[4]、艾美尔球虫[5]、巴贝斯虫[6]及利什曼原虫[7]等原虫中发现特异性双链RNA病毒,目前原虫病毒已成为寄生虫学研究的热点.蓝氏贾第虫病毒(Giardia lamblia virus,GLV)是继阴道毛滴虫病毒发现后确认的第2个原虫病毒,GLV的发现为贾第虫病的诊断与防治、原虫与病毒及宿主间相互关系的研究提供了新的方向.
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蓝氏贾第虫谷氨酸脱氢酶基因的克隆及序列分析
目的获取蓝氏贾第虫谷氨酸脱氢酶(GDH)全基因,并对其进行序列分析.方法利用PCR技术扩增蓝氏贾第虫GDH,并将其插入pMD18-T载体,酶切鉴定后进行序列测定及分析.结果 DNA序列分析表明,所克隆的GDH基因序列与蓝氏贾第虫Portland-1株谷氨酸脱氢酶基因基本一致,该基因5'上游区具有典型的CAAT/TATA盒,含有GDH启动子序列.结论本研究获得了蓝氏贾第虫GDH启动子,为贾第虫病毒的反向遗传学操作奠定了基础.
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蓝氏贾第虫基因转染研究进展
蓝氏贾第虫(Giardia lamblia)是一种单细胞寄生性原虫,能够感染包括人在内的多种动物,引起的蓝氏贾第虫病,以腹泻和消化不良为主要症状.以往认为本病是人类的一种共栖性肠道鞭毛虫病,大多数患者为隐性感染,近年来很多临床病例和流行病学资料都已证明蓝氏贾虫病是一种重要的人兽共患寄生虫病.蓝氏贾第虫生活周期简单,包括包囊和滋养体两个发育阶段:包囊通过污染的食物、水或粪便经口感染,在小肠上部去包囊,发育成为滋养体,粘附于小肠上段进行分裂,从而导致病变.滋养体随宿主肠道内容物下行,在结肠形成包囊,随粪便排出,能在水中生存较长时间,包囊可以感染其它宿主.
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贾第虫病的实验室诊断
贾第虫(Giardia)是一种鞭毛虫,由列文*虎克(Leeuwenhoek)发现于1681年,作为人类一种重要的病原体,贾第虫直至近40年才被认识[1].贾第虫目前发现存在于40多种动物体内,虽然它的分类还存在争议,但多数学者认为贾第虫分为三大类.其中的蓝氏贾第虫(Giardia lamblia)又称十二指肠贾第虫(G.duodenalis)或小肠贾第虫(G.intestinalis),主要寄生于人类和哺乳动物的小肠,可引起以腹痛、腹泻、吸收不良为临床表现的肠道寄生虫病--贾第虫病[2](giardiasis).