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一氧化氮的传递及其对缺氧时呼吸变化的调控
一氧化氮(NO)在体内的传递并非以往认为的随机弥散,而是与血红蛋白(Hb)β亚单位中半胱氨酸的硫醇基(巯基)或其他含巯基化合物相结合,形成亚硝基硫醇(SNOs).SNOs既具备NO的生物活性又保持其稳定性.SNOs从细胞外进入到胞质的途径是通过酶促反应,而从红细胞输出则经阴离子交换蛋白转运.在缺氧情况下,SNOs对呼吸的调控包括Hb在肺部的氧合作用,将氧输送到组织和在脑干孤束核调控中枢性呼吸.
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全血保存过程中血浆中S-亚硝基硫醇的测定
目的 建立荧光法测定血浆中S-亚硝基硫醇(RSNOs)的方法 并探讨影响其测定的相关因素.方法 建立标准曲线,确定荧光法的准确性与可重复性;以检测过程中某一种影响因素(如样品制备条件、孵育时间等)为变量观察多因素对检测结果 的影响;取9份全血(400 ml/份)在保存d1、d7、d14、d21、d28和d35时分别检测血浆中RSNOs含量.结果 同一份血浆,相同实验条件下检测10次,变异系数为(CV)=3.5%;不同离心力470、734、1057、1 438 g制各的血浆,RSNOs含量分别为(9.22±0.14)、(9.97±0.11)、(10.40±0.05)、(10.91±0.01)μmol/L;铜离子浓度为100、150、200 μmol/L时的RSNOs含量分别为(13.83±0.02)、(14.23 ±0.03)、(13.22±0.01)μmol/L;在其他条件相同的情况下,孵育1、1.5、2、2.5 h样品的RSNOs含量分别为(10.34±0.04)、(10.75±0.02)、(12.31±0.09)、(10.53±0.06)μmol/L;在其他条件相同的结果 下,血浆中加入FHb为20、40、60、80、100 μl时,检测结果 为(13.58±0.02)、(13.41±0.02)、(13.10±0.01)、(12.60±0.06)、(12.17 ±0.01)μmol/L;全血保存d1、d7、d14、d21、d28和d35血浆中的RSNO含量分别为(12.94±2.92)、(10.67±2.18)、(6.87±1.24)、(7.13±1.17)、(7.01 ±1.66)和(5.80±1.55)μmol/L 结论 荧光法测定RSNOs具有良好的准确性与可重复性;不同离心力制备的样品、不同的孵育时间、不同的铜离子浓度以及血液样品中的游离血红蛋白对荧光法检测RSNOs的结果 均会有影响;全血保存过程中RSNOs含量呈下降趋势.
