首页 > 文献资料
-
转录因子KLF2在血管内皮中的功能与调控研究进展
KLF样转录因子(krüppel-like transcription factors)参与多种基因表达的转录调控过程.KLF家族到目前共发现17个成员,分别命名为KLF1~KLF17.KLF2作为该家族中重要的成员,参与T细胞分化和脂肪分化等重要过程.近年来研究证实KLF2在保护内皮细胞功能方面发挥重要的作用,已经成为心血管领域中研究的热点之一.本文拟KLF2的特性、调控机制及在血管内皮中的功能研究进展作一综述.
关键词： Krüppel样转录因子 转录调控 血管内皮 -
Krüppel样转录因子家族在阿尔茨海默病发病机制中的作用研究进展
阿尔茨海默病(AD)是一种中枢神经系统退行性疾病,主要病理特征是脑内β淀粉样蛋白沉积形成的老年斑和tau蛋白异常磷酸化后形成的神经纤维缠结.近年研究发现,Krüppel样转录因子在AD病理生理中扮演着不可或缺的角色,这些转录因子家族成员在细胞生长、分化、增殖、迁移、凋亡、代谢和炎症反应中具有多种调节功能.新证据表明Krüppel样转录因子参与AD的发生发展.文中详细综述了Krüppel样转录因子家族在AD发病机制中的新作用及其相关研究进展.
-
带有雌激素受体编码区的KLF4表达载体的构建及其转染后对细胞的可调控表达
目的 构建KLF4-ER基因表达的带有加强型绿色荧光蛋白(EGFP)的博来霉素抗性的pCGF5 IEGZ载体,利用其对小鼠巨噬细胞系RAW264.7进行稳定转染株的筛选并鉴定.方法 以pEGFP-KLF4质粒为模板,设计带有酶切位点的KLF4上下游引物,以PCR扩增获得编码序列,其产物电泳鉴定后纯化回收,并将改良型小鼠雌激素受体的激素链接区序列与之融合,KLF4-ER片段纯化回收后插入pCGF5-IEGZ载体中;重组体转化细菌,筛选扩增后酶切鉴定;重组质粒转染细胞,倒置荧光显微镜观察EGFP的表达,使用zeocin筛选稳定株,流式细胞术检测转染率;Western Blot、RT-PCR检测转染后的KLF4表达;经Tamoxifen诱导后,DAPI核染色观察重组载体转运胞核中的表达以及抗酒石酸酸性磷酸酶(TRAP)染色检测目的基因表达的效应.结果 电泳鉴定KLF4全长片段及pCGF5 IEGZ-KLF4ER重组体双酶切结果 符合设定要求,重组质粒构建成功;目的载体成功转入细胞中,转染19 d后流式细胞测定稳定株转染效率达95.31%;20 d KLF4蛋白及mRNA水平均明显高于空转组和阴性组(P<0.01).Tamoxifen诱导靶基因的表达生物效应优于对照组.结论 该实验成功地用pCGF5 IEGZ型载体将带有可受调控的雌激素受体编码区的目的基因导入通用的小鼠巨噬细胞系中,为今后研究靶基因在破骨细胞中可诱导性过表达提供了新的途径.
关键词： 受体 雌激素 基因表达调控 诱变力试验 Krüppel样转录因子 -
肺癌组织中转录因子Klf8的表达及下调肺癌细胞株中Klf8表达的生物学效应
目的:研究肺癌组织中转录因子Klf8的表达及下调肺癌细胞株中Klf8表达的生物学效应.方法:收集癌组织和癌旁正常肺组织,检测Klf8的mRNA含量;培养肺癌A549细胞株,转染Klf8的siR-NA后测定细胞周期、细胞侵袭以及上皮-间质转化.结果:肺癌组织中Klf8的mRNA含量高于癌旁正常肺组织;转染Klf8的siRNA后,Klf8 mRNA的抑制率为74.31％;Klf8 siRNA组细胞中G0/G1期比例高于阴性对照siRNA组,S期细胞和G2/M期细胞比例、Cyclin D1的mRNA含量、侵袭至transwell微孔膜外侧面的细胞数目低于阴性对照siRNA组;Klf8 siRNA组细胞中CDH1、CK18以及Snail、Slug的mRNA含量高于阴性对照siRNA组,VIM、N-cadherin的mRNA含量低于阴性对照siRNA组.结论:肺癌组织中Klf8表达量异常升高;下调肺癌细胞株中Klf8表达能够抑制细胞的恶性生物学效应,表现为细胞周期停滞、细胞侵袭过程和上皮-间质转化过程抑制.
关键词： 肺癌 Krüppel样转录因子 细胞周期 细胞侵袭 上皮-间质转化 -
KLF8对胶质瘤细胞株U87体外侵袭能力的影响
目的 探讨锌指样因子8(KLF8)对胶质瘤细胞株U87体外侵袭能力的影响.方法 瞬时转染针对KLF8的小干扰RNA(siRNA),采用荧光定量聚合酶链反应及蛋白质印迹进行干扰后的效率验证,应用Transwell小室侵袭实验检测U87细胞体外侵袭能力的变化.结果 转染KLF8的siRNA 48 h后U87细胞中KLF8 mRNA、 蛋白水平均明显下调,体外侵袭能力明显降低.结论 KLF8可促进胶质瘤细胞侵袭,提示其在胶质瘤的侵袭、转移中发挥着重要作用.
关键词： Krüppel样转录因子 神经胶质瘤 肿瘤浸润 RNA 小分子干扰 -
中枢神经系统损伤修复的研究
中枢神经系统若受到损伤可以导致多种疾病的发生,甚至是致命的,对于其修复的研究已经成为热点.对中枢神经系统损伤修复的研究展开探讨,以期获得更为有效的修复方法.
关键词： Krüppel样转录因子 中枢神经系统 损伤修复 -
miR137及其靶基因Kruppel样转录因子12在多发性骨髓瘤中的表达及预后意义
目的：探讨miR137的靶基因Kruppel样转录因子12（KLF12）对多发性骨髓瘤（MM）预后的影响。方法通过软件预测miR137的靶基因，应用基因表达谱（GEP）分析KLF12基因是否为MM预后因素，构建miR137过表达的MM细胞株NCI-H929，应用实时定量聚合酶链反应、Western blot分别检测KLF12基因和蛋白在细胞株中的表达。结果软件预测 miR137的靶基因有 MITF、BUE2H、SH3BP5、KLF12。对GEP芯片中患者数据进行分析，高表达KLF12的患者455例，其中75例（16.5%）死亡，低表达KLF12的患者104例，其中25例（24.0%）死亡。miR137过表达的细胞株NCI-H929中KLF12较高。MM患者的miR137水平和KLF12的表达呈正相关（r＝0.67，P＝0.01）。结论 miR137-KLF12是判断MM预后的重要指标。
关键词： 多发性骨髓瘤 miR137 Krüppel样转录因子
