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Ficoll分离和MACs分选对T细胞BCL11b表达水平的影响
目的了解Ficoll分离和MACs分选过程对T细胞中BCL11b基因表达水平的影响情况.方法利用Ficoll 分离3例正常人外周血单个核细胞(PBMC),进一步经MACs负性分选CD3+T细胞.分别收集培养0、6和20h的PBMC和CD3+T细胞,利用实时定量PCR方法检测各组样本中BCL11b基因的表达水平.结果经Ficoll分离的PBMC和MACs分选后CD3+T细胞在3个时间点BCL11b的表达水平无显著性差异(p>0.05),根据CD3+T细胞%标化后,各组BCL11b表达水平也均无显著性差异.结论 Ficoll分离和MACs负性分选过程不影响T细胞中BCL11b表达水平,提示其不会影响T细胞的活化.
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脂肪干细胞分离纯化方法研究进展
脂肪干细胞作为种子细胞广泛应用于组织工程中,而获得足够量的、活性高的、高纯度的脂肪干细胞是其在组织工程中应用的前提。本文综述近几年来脂肪干细胞分离纯化方法的研究进展,比较各方法的优缺点,为分离纯化出理想的脂肪干细胞提供理论依据。
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免疫磁珠分选人外周血T淋巴细胞的方法探讨
目的:探索一种用免疫磁珠分选人外周血T淋巴细胞更高效的方法.方法:用Ficoll密度梯度离心法先分离出人单核细胞(PBMC),选用EasySep 正选人CD3试剂盒,用两种不同的操作方法分离T淋巴细胞并进行比较.结果:两种方法有显著差异.结论:用免疫磁珠分选人外周血T淋巴细胞的方法值得推广.
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脐血CD34+细胞及其亚群的富集纯化与检测
CD34是一种表达在早期造血干细胞、小血管内皮细胞和胚胎纤维母细胞表面的一种特异性表面抗原,是早期HSC/HPC的一种特征性标志[1]。体内移植和体外培养的研究表明,多能干细胞存在于CD34+细胞群中[2,3]。CD34+细胞在正常造血组织中的含量甚微,只占骨髓MNC的0.5%~1.5%,在外周血中仅占0.001%~0.01%,脐血中占0.5%~3.5%。因此要想获得一定数量的CD34+ 细胞,必须对CD34+ 细胞进行纯化。免疫磁珠是包被有单克隆抗体的磁性微粒,它可特异性地与靶物质结合使之具有磁响应性,继而在外加磁场的作用下,结合有靶物质的磁珠被滞留,从而与其他成分分离,达到纯化富集的作用。此法可用于分离骨髓及血细胞,肿瘤细胞,核酸,细菌及其他微生物等[4],其中以分离造血细胞应用为广泛。笔者探讨MACS分选富集脐血CD34+ 细胞,并以FCM评价其纯化效果。