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微小RNA与非霍奇金淋巴瘤关系的研究进展
微小RNA (microRNA)是一类长度为18 ～24个核苷酸非编码小分子RNA,它不仅参与个体发育、细胞凋亡、增殖、分化；还参与肿瘤的发生和发展.近研究发现,miRNA的表达失调与非霍奇金淋巴瘤的关系也很密切.
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小鼠间充质干细胞诱导分化成脂肪细胞miRNA表达的变化*
目的:探讨小鼠间充质干细胞(MSCs)定向诱导分化成脂肪细胞微小RNA (miRNA)表达的变化,为进一步研究miRNA调控MSCs向脂肪细胞分化的分子机制奠定基础.方法:采用全骨髓体外分离结合差速贴壁法纯化扩增C57BL/6小鼠MSCs,形态学观察细胞生长情况,并用免疫组化方法鉴定细胞表面抗原CD29、CD44和CD34的表达.脂肪细胞分化诱导剂诱导MSCs分化为脂肪细胞,利用油红O染色,判断MSCs成脂分化情况.运用miRNA芯片技术检测MSCs和脂肪细胞中差异表达的miRNA.结果:①倒置显微镜下观察,传5代后可获得均一性较高的MSCs;免疫组化显示90％以上的骨髓间质干细胞CD29、CD44阳性,CD34阴性.MSCs经脂肪诱导剂诱导后,胞内大量脂滴形成,油红O染色阳性；②基因微阵列分析表明,小鼠MSCs分化成脂肪细胞差异表达的miRNA共75个,其中20个表达上调、55个表达下调.结论:MSCs分化成脂肪细胞存在miRNA表达的变化,某些miRNA很可能具有重要的调控MSCs成脂分化的作用.
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人脑胶质瘤中miR-106b～25基因簇表达的研究
目的：检测胶质瘤细胞系及组织中miR-106b~25基因簇成员miR-106b、miR-93、miR-25的表达情况。方法：运用实时定量PCR的方法检测不同人脑胶质母细胞瘤细胞系及不同病理级别胶质瘤标本中miR-106b~25基因簇成员miR-106b、miR-93和miR-25的表达水平。原位杂交技术检测含不同病理级别及瘤旁正常脑组织的胶质瘤组织芯片中miR-106b～25基因簇成员的表达情况，进而分析该簇miRNAs的表达与胶质瘤病理级别的相关性。结果：以正常脑组织表达量为基准，3种miRNA在所有检测细胞系中均有增高的趋势。收集43例胶质瘤标本中，RT-PCR结果显示，随着肿瘤病理级别的升高，3种miRNA在各组中的平均表达量也逐步升高。其中，miR-106b（F=4.479，P=0.018）和miR-93（F=3.493，P=0.040）各组间的表达差异均有统计学意义。而miR-25表达无明显的统计学差异（F=2.766，P=0.075）。原位杂交结果显示3种miRNA的表达在高级别胶质瘤中的表达量明显高于低级别肿瘤。Spearman等级相关分析表明3种miRNA的表达信号强度分布均与胶质瘤的WHO病理分级呈正相关，在miR-106b、-93、-25中的相关系数分别为rs=0.617（P<0.001）、rs=0.438（P<0.001）、rs=0.463（P<0.001）。结论：miR-106b～25在胶质瘤中表达呈不同程度增高，并与肿瘤分级呈正相关。
关键词： miR-106b~25 miRNA表达 胶质瘤 -
miRNA在乳腺癌耐药细胞株中的表达研究
目的 分析miRNA34a和miRNA200c在人乳腺癌细胞MCF-7和耐药株中的不同表达,探讨miRNA在乳腺癌MDR中的调节作用及其分子机制.方法以人乳腺癌细胞株 MCF-7为亲本细胞,采用阿霉素(adriamycin,Adr)及多西紫杉醇(docetaxel,Doc)低浓度持续加量诱导法建立多药耐药的人乳腺癌细胞株MCF-7Adr及MCF-7Doc.应用real-time RT-PCR法对miRNA检测并比较其在MCF-7和多药耐药细胞株MCF-7Adr及MCF-7 Doc间的表达差异.结果 real-time RT-PCR结果显示,miRNA200c的表达在MCF-7Adr及MCF-7Doc细胞中较MCF-7细胞中显著降低(均P<0.01);miRNA34a的表达在MCF-7Adr细胞中较MCF-7细胞中显著降低(P<0.01),在MCF-7Doc中两者无明显差异(P>0.05).结论 miRNA在乳腺癌多药耐药细胞和其亲本细胞中有表达差异,可能参与了乳腺癌多药耐药的发生.
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肾移植术后急性排斥反应期外周血中miRNA表达
目的:研究肾移植术后急性排斥反应期外周血中miRNAs的表达.方法:选取10个肾移植术后确诊发生急性排斥反应期的病例为观察组,均经肾穿刺病理证实,每个病例在急性排斥反应发生时抽取外周血；同期选取10例肾移植术后恢复良好、病情稳定患者抽取外周血作为对照组；Trizd法分离总RNA,采用miRCU-RYTMArray microarraykit试剂盒进行miRNA芯片杂交,经SAM软件选取差异表达有统计学意义的miRNA.结果:与对照组比较,在急性排斥反应患者外周血检测发现,miRNA芯片检测出4个miRNA(miR142-5p,miR146b-5b,miR155,miR223)表达上调,2个miRNA(miR125b,miR324-3b)表达下调.结论:外周血miRNAs表达水平改变可作为判断急性排斥反应发生的检测指标.
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实时荧光定量PCR比较分析miRNA在胃癌新鲜组织与石蜡包埋组织中的表达
目的 研究miRNA在胃癌石蜡包埋组织和新鲜组织的表达.方法 应用实时荧光定量PCR检测23例石蜡包埋胃癌组织及与其配对的新鲜冷冻胃癌组织的miR-30c表达,以U-6为内参对照.结果 胃癌石蜡包埋组织中的miRNA可以成功扩增出来,胃癌石蜡包埋组织与胃癌新鲜组织中miR-30c表达呈平行性表达(配对t-检验P=0.81).miR-30c在石蜡包埋组织中的表达量与临床病理因素的关联似乎更紧密.结论 可以利用便利获得的存档石蜡组织进行miRNA相关指标表达研究.
关键词： 胃癌 福尔马林固定石蜡包埋 miRNA表达 实时荧光定量PCR -
Let-7 i在子痫前期孕妇胎盘中的表达
目的 :研究Let-7i基因表达与子痫前期孕妇患者疾病发作的关系.方法 :在2016年07月-2018年03月,随机选取30名剖宫产的子痫前期孕妇患者病例的胎盘作为研究组、30例正常妊娠孕妇的胎盘作为对照组.采用荧光PCR技术实时、定量检测两组胎盘中Let-7i基因的表达结果.结果 :在研究组胎盘中,Let-7i基因表达量较低于对照组中相应结果,约为对照组平均表达水平的1/3,两组胎盘中Let-7i基因表达情况具有统计学差异(P<0.05).结论 :以Let-7i为代表的特异微小RNA(miRNA)在子痫前期孕妇胎盘组织和正常妊娠孕妇胎盘组织中差异性表达明显,miRNA表达可能影响子痫前期疾病发作情况.
