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狂犬病暴露后抗狂犬病血清(免疫球蛋白)的地位和应用
狂犬病是由狂犬病病毒所致的急性传染病,人被病兽咬伤而感染,多见于犬、猫、狼等肉食动物.狂犬病是一种十分凶险的疾病,即使在科学比较发达的今天,提起狂犬病也会让人毛骨悚然,当今病死率高的疾病就是狂犬病.狂犬病一旦发作,在症状出现后病死率几乎是100%.人对狂犬病无自然免疫力,被疯动物咬伤、抓伤后的发病率为10%～70%.伤口的正确处理,马抗血清或人免疫球蛋白和高效价狂犬病疫苗的使用可有效预防狂犬病的发生.本文就有关抗狂犬病血清或人免疫球蛋白的正确使用、制品的安全性等问题探讨如下.
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抗狂犬病马血清效价ELISA检测试剂的制备
目的 制备检测抗狂犬病马血清效价的ELISA试剂.方法 采用ELISA间接法.先用抗狂犬病病毒IgY包被酶标板,并确定其适包被浓度;制备酶标二抗,并确定其佳使用浓度.对试剂的灵敏度、特异性、精密性、稳定性及与小鼠中和试验结果 的相关性进行考核.结果 抗狂犬病病毒IgY和酶标二抗的适浓度分别为10μg/ml和1:1 500,试剂灵敏度为0.072 IU/ml,特异性良好,批间及试验间变异系数均小于11%,37℃放置3和5 d检测样品结果 与放置前差异无显著意义,与小鼠中和试验结果 呈正相关.结论 所制备的抗狂犬病马血清效价ELISA检测试剂盒,可用于抗狂犬病马血清效价的检测.
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中和性马抗体对SARS-CoV感染的防治作用
目的探讨马抗SARS-CoV中和性抗体是否对SARS-CoV感染有防治作用.方法用SARS-CoV(BJ-01株)免疫马匹,从免疫马血清中制备IgGs及其F(ab')2片段.通过细胞病变法(CPE)、MTT法和空斑形成实验(PFU)等方法,在体外培养的VeroE6细胞中检测F(ab')2片段对SARS-CoV感染的预防性和治疗性作用.再在Balb/c小鼠体内模型中,用CPE法和定量RT-PCR方法检测该抗体的保护性效应.结果 CPE、MTT和PFU三种方法证实来自三匹马的血清F(ab')2的中和滴度均达到1:1600以上.体内实验证实,50μg的F(ab')2片段可以完全中和1×104 TCID50 SARS-CoV.结论马抗SARS-CoV抗体在体内外均能有效地中和SARS-CoV和预防其感染宿主细胞,为马抗体将来在大的灵长类动物或人体内进行实验提供实验依据.
