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新城疫病毒和传染性支气管炎病毒多重DNA微列阵鉴定方法的构建
目的 建立可同时检测新城疫病毒(Newcastle disease virus,NDV)和传染性支气管炎病毒(Infectiousbronchitis virus,IBV)的多重DNA微列阵鉴定方法. 方法 针对NDV和IBV设计PCR引物和微阵列探针,制备检测用微阵列.将样品与微列阵进行杂交,分析微阵列的特异性和灵敏度. 结果 建立的微阵列检测NDV和IBV为阳性,且能区分NDV和IBV,而流感病毒传染性法氏囊病毒等阴性对照无杂交信号.通过GenePix 4.1软件分析杂交信号的平均SNR532,NDV和IBV的检出限为1×103 copies/μl. 结论 建立的多重DNA微列阵鉴定方法具有高特异性和高敏感性,可用于NDV和IBV感染检测.
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基因芯片技术及其在血液学和肿瘤学应用的前景
介绍基因芯片的基本原理、制备的技术流程和不同的类型,在实际应用中基因芯片上的探针选择,受检标本的处理与杂交,在血液、肿瘤和细胞分化研究中应用基因芯片的情况,包括如何检测癌基因、抑癌基因以及细胞分化和凋亡基因的表达,分析人类基因的多态性与疾病易感性的关系.后,讨论了基因芯片今后的发展及其问题.
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6A8α-甘露糖苷酶表达减弱和表达正常鼻咽癌细胞间的差异基因表达
目的发现因转导反义6A8 cDNA致恶性生物学行为减弱的人鼻咽癌细胞CNE-2L2(AS)和野生型细胞(W)间的差异表达基因.方法用DNA微列阵方法比较AS细胞和W细胞基因表达的差异.用Northern印迹和RT-PCR验证所得结果的可靠性.结果与W细胞相比,AS细胞有34个基因的表达上调,有42个基因的表达下调.其表达增强可能对肿瘤恶性行为有抑制作用的基因有P130mRNA for 130K protein、TGF-betaⅡR alpha、GABBR1、TGFBR1、TNFAIP1、STANIN、E-CADHERIN、CTNNA 1、CTNNA 2、RFX2及TMPO等,其表达减弱可能对肿瘤恶性行为有抑制作用的基因有CD44、NDRG1、TGFB1、RPS5、LEGUMAI、CBS、CD59及SNRPA1等.Northern印迹和RT-PCR验证了DNA微列阵方法检测的结果.结论与W细胞相比,AS细胞有34个基因表达上调,有42个基因表达下调,某些基因表达的改变可能与AS细胞恶性生物学行为的减弱相关.
关键词: DNA微列阵 基因表达 肿瘤 6A8 d-甘露糖苷酶