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SPA-ELISA检测卡氏肺孢子虫抗原的研究
目的探讨SPAK-ELISA检测卡氏肺孢子虫抗原对诊断卡氏肺孢子虫肺炎的价值.方法采用SPA-ELISA检测免疫抑制大鼠模型在不同时期肺泡灌洗液(BALF)和血清中肺孢子虫(PC)抗原,以及造血干细胞移植并发肺炎患者痰液和血清抗原,并与病原学检查结果比较.结果感染大鼠于用药后第4周,BALF中PC抗原,以及肺组织印片和BALF涂片包囊检查开始出现阳性,但前者阳性率(60%)高于后者(20%和40%),而且全部阳性达到的时间(8周)也早于后者(10周).第10周有2只鼠血清抗原阳性,但此后又转阴.30例肺炎患者痰液抗原阳性8例,阳性率为26.67%,8例抗原阳性患者中只有3例发现包囊,符合率为37.5%.血清抗原检测全部阴性.结论 SPA-ELISA检测痰液和肺泡灌洗液抗原比病原学检查敏感性高,而检测血清抗原不适用于诊断卡氏肺孢子虫肺炎.
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SPA-ELISA和Map-IFAT诊断肺螨病的研究
目的探讨葡萄球菌A蛋白-酶联免疫吸附试验(SPA-ELISA)和螨成虫抗原片间接荧光抗体试验(Map-IFAT)对肺螨病的诊断价值.方法应用SPA-ELISA和Map-IFAT分别对肺螨病组(35例)、疮疮组(35例)、蠕形螨组(38例)、对照组(30例)进行血清抗体检测并对比分析.结果 SPA-ELISA检测血清螨特异性IgG阳性率和Map-IFAT血清抗螨抗体的阳性率:肺螨组分别为94.3%和88.6%;疥疮组分别为5.7%和0;蠕形螨组均为0;对照组分别为3.3%和6.7%.两种方无显著性差异( P＞0.05).两组方法联合使用其阳性率为97.14%.结论 SPA-ELISA和Map-IFAT对肺螨病的诊断均有较高的特异性敏感性,而SPA-ELISA法在肺螨病的大规模的流行病学调查中具有很大的优点,两者联合应用可提高诊断肺性螨病的准确性.
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弓形虫病诊断试剂盒阴性血清保存方法的研究
目的:研究SPA-ELISA弓形虫病诊断试剂盒不同稀释液及灭活处理对阴性血清的保存效果.方法:正常人阴性血清(n=5)分别用0.01 M PBS缓冲液、1%胎牛血清、15%甘油1:100进行稀释后保存于4℃,分别于稀释后1 d、1周、2周、4周、2个月、3个月用SPA-ELISA检测阴性血清OD410,比较其变化情况;同时观察灭活对阴性血清的影响.结果:用15%甘油稀释的阴性血清可以保存至3个月,用0.01 M PBS缓冲液和1%胎牛血清稀释的阴性对照一个月之后保存效果较差.结论:15%甘油稀释的阴性血清可以比较长期稳定的保存,保证了SPA-ELISA弓形虫病诊断试剂盒的稳定性.
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SPA-ELISA检测弓形虫抗体诊断试剂盒的研制
目的:制备SPA-EUSA弓形虫抗体诊断试剂盒供临床使用.方法:优选佳的实验条件,包括反应时间、SPA-HRP浓度及待测血清标本浓度.观察了封闭对实验结果的影响及酶保护剂对SPA-HRP活性的影响,并对该试剂盒的敏感性、特异性、重复性及破坏性进行了实验研究.结果:本试剂盒敏感性高,特异性强,重复性好,可4℃保存3个月,-20℃保存6个月,其活性不变.结论:本试剂盒方法简便快捷,结果可靠,适于临床使用.
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SPA-ELISA检测弓形虫感染鼠尿中的循环抗原
[目的]探索弓形虫感染早期诊断的简便方法.[方法]用SPA-ELISA检测轻度、中度和重度感染弓形虫鼠尿中弓形虫循环抗原(TCA).[结果]轻度、中度和重度感染弓形虫3组鼠尿中均检出TCA,上述3组分别于弓形虫感染后d6、d3和d4显示阳性斑点.[结论]SPA-ELISA能检出弓形虫感染鼠尿中的弓形虫循环抗原,可用于弓形虫感染的早期诊断.
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检测弓形虫抗体SPA-ELISA
为了制备SPA-ELISA弓形虫抗体诊断试剂盒,优选了佳的实验条件,包括反应时间、SPA-HRP浓度及待测血清标本浓度.观察了封闭对实验结果的影响及酶保护剂对SPA-HRP活性的影响,并对该方法的敏感性、特异性、重复性及破坏性进行了实验研究.结果本试剂盒方法简便快捷,敏感性高,特异性强,重复性好,可4 ℃保存3个月,-20 ℃保存半年,其活性不变.检测了50份孕妇及可疑病例血清或脑脊液,阳性率为4%,与IHA检测结果一致.
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ABC - ELISA法诊断肠螨病的研究
目的探讨生物素-亲和素酶联免疫吸附试验(SC-ELISA)在肠螨病诊断中的应用价值.方法采集48例肠螨病患者血清,用ABC-ELISA法检测血清中螨特异性抗体IgG,并与葡萄球菌A-蛋白酶联免疫吸附试验(SPA-ELISA)进行比较.结果用SC-ELISA法和SPA-ELISA法检测48例肠螨病患者血清中的螨特异性抗体IgG阳性率分别为89.58%(43/48)和56.25%(27/48),两者比较,差异具显著性(x2=13.50,P＜0.01).结论SC-ELISA法是实验室诊断肠螨病的一种有效方法.
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ABC-ELISA法诊断肠螨病的研究
目的:探讨生物素-亲和素酶联免疫吸附试验(ABC-ELISA)在肠螨病诊断中的应用价值.方法:采集48例肠螨病患者血清,用ABC-ELISA法检测血清螨特异性抗体IgG,并与葡萄球菌A-蛋白酶联免疫吸附试验(SPA-ELISA)进行比较.结果:用ABC-ELISA法和SPA-ELISA法检测48例肠螨病患者血清螨特异性抗体IgG阳性率分别为89.58%(43/48)和56.25%(27/48),两者比较,差异具显著性(χ2=13.50,P＜0.01).结论:ABC-ELISA法比SPA-ELISA法更有效诊断肠螨病.
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SPA-ELISA检测棕果蝠血清冠状病毒抗体的研究
目的 建立一种敏感、简便的检测蝙蝠血清冠状病毒抗体的方法.方法 利用葡萄球菌A蛋白(SPA)能够与某些哺乳动物IgG抗体Fc段非特异性结合的特点,对市售人冠状病毒抗体ELISA试剂盒进行改造,建立SPA-ELISA法,使其适用于蝙蝠血清冠状病毒抗体的检测,并对采集到的55份棕果蝠血清冠状病毒抗体进行检测.结果 用SPA-ELISA方法对人冠状病毒试剂盒中阳性与阴性对照、SARS病人恢复期血清、空白对照的检测都得到理想的结果,并从55份棕果蝠血清中检测出2例阳性,阳性率为3.64％(2/55),中和试验进一步证实了结果的真实性.结论 所建立的方式适用于检测棕果蝠血清冠状病毒抗体.
