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TEP1分子在蚊天然免疫中的研究进展
含硫酯键蛋白(thioester-containing proteins,TEPs)在蚊天然免疫反应中起着重要的作用,其中TEP1被认为是一个重要的免疫诱导蛋白,参与了蚊天然免疫反应中的免疫识别、诱导黑化和吞噬溶解以及直接杀伤过程.本文综述了蚊TEP1在天然免疫中的作用及新研究进展.
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脐血造血干/祖细胞端粒酶相关蛋白基因hTERT和TEP1的表达及意义
目的探讨造血干/祖细胞端粒酶相关蛋白基因hTERT和TEP1在造血过程中对端粒酶活性的调节作用.方法用RT-PCR和TRAP法分别测定脐血干/祖细胞中hTERT、TEP1 mRNA及端粒酶的活性.结果在新分离的脐血单个核细胞(MNC)和CD34-细胞中检测不到端粒酶的活性,hTERT mRNA表达阴性;CD34+细胞中端粒酶活性低,hTERT mRNA阳性;而TEP1 mRNA在MNC、CD34-细胞和CD34+细胞中均为阳性,表达水平差异无显著性.在不同细胞因子组合条件下,CD34+细胞体外培养7 d,细胞端粒酶活性和hTERT mRNA表达增高,之后随着细胞的分化成熟,二者表达降低,在整个培养过程中,TEP1 mRNA表达无明显变化.结论在脐血造血干/祖细胞中,hTERT基因表达水平与端粒酶活性一致,hTERT基因表达水平对端粒酶的活性起关键作用,TEP1基因作用较弱.
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TEP1在肿瘤发生发展中的作用研究进展
端粒酶相关蛋白1(TEP1)是与肿瘤发生密切相关的一种抑癌基因,在肿瘤的发生发展中起重要作用.随着研究的深入,对其结构特点、功能机制、信号转导途径以及其与肿瘤发生发展的关系的认识都取得了很大的进展.首先,TEP1基因启动子CpG岛可能存在甲基化,导致TEP1基因沉默而失表达；TEP1基因存在杂合性缺失,导致TEP1 mRNA表达降低,TEP1失表达到致血管内皮生长因子表达上调,促进肿瘤血管生成,有利于肿瘤的生长与转移；其次,TEP1表达降低导致基质金属蛋白酶表达上调,促进细胞外基质的水解,增强了肿瘤细胞动力,抑制细胞凋亡.
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外源性端粒酶催化亚单位对人视网膜血管内皮细胞的影响
目的探讨外源性人端粒酶催化亚单位(hTERT)对人视网膜血管内皮细胞(hRCEC)端粒酶活性、相关基因表达和体外生存时间的影响.方法阳离子脂质体介导hRCEC转染;RT-PCR法检测人类端粒酶RNA组份(hTR)、端粒酶相关蛋白1(TEP1)及hTERT基因的表达;TRAP法检测端粒酶活性;细胞计数法绘制生长曲线.结果hTR、TEP1基因在hTERT转染hRCEC前后都表达,hTERT基因在转染前不表达,转染后24 h及稳定转染克隆形成时表达,细胞停止分裂时又失去表达;转染前无端粒酶活性,转染后24h及稳定转染克隆形成时可检测到端粒酶活性,细胞停止分裂时端粒酶活性消失;稳定转染了hTERT基因后hRCEC的生存时间没有延长.结论hTERT转染可显著提高hRCEC中hTERT基因表达水平,hTERT基因表达与端粒酶活性一致,但只用hTERT转染的方法不能使hRCEC细胞生存时间延长.
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大劣按蚊TEP1 cDNA的克隆和生物信息学分析
目的 克隆大劣按蚊(Anopheles dirus)含硫酯键蛋白1(thioester-containing protein 1,TEP1)的cDNA,并分析其序列.方法 根据已报道的冈比亚按蚊等多种昆虫的TEP1氨基酸保守序列设计简并引物,以大劣按蚊血淋巴细胞总RNA为模板,进行RT-PCR扩增.对目的 片段纯化回收,经TA克隆后测定其核苷酸序列.利用DNASIS程序分析该序列,并推导其氨基酸序列,后利用BLAST和DNASIS等进行不同昆虫TEP1氨基酸序列的比对.结果 RT-PCR扩增出一约770 bp的条带,TA克降后DNA测序发现,阳性克隆的核苷酸序列长774 bp,推导其氨基酸序列长258 aa.生物信息学分析表明,该序列与冈比亚按蚊、阿拉伯按蚊、斯氏按蚊TEP1基因的氨基酸序列同源性分别达72%、72%和59%,与冈比亚按蚊的TEP4氨基酸序列同源性为59%.结论 从大劣按蚊血淋巴细胞中成功克隆出了TEP1的cDNA部分序列.
