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巨核细胞的免疫学研究
巨核细胞的免疫学作用鲜被研究,本研究观察巨核细胞的粘附分子和细胞因子表达,以及细胞因子与巨核细胞的相互作用,以了解巨核细胞的免疫学作用.使用流式细胞术,ELISA和免疫组化方法,分析粘附分子CD36在血小板、骨髓巨核细胞和巨核细胞株(Meg-01,Dami,CHRF288-11和M-07e)的表达;使用RT-PCR方法,检测白细胞介素1(IL-1)至白细胞介素10(IL-10),TNF-αTNF-γ和IFN-γ在4个巨核细胞株的表达;使用血浆凝块巨核细胞集落培养方法,观察细胞因子IL-1β,IL-3,IL-6和TPO对小鼠巨核细胞生长的影响,乙酰胆碱酯酶染色鉴定和识别巨核细胞.结果:①血小板、骨髓巨核细胞和巨核细胞株均表达CD36,而且随着细胞的发育成熟,CD36表达越来越高,提示巨核细胞通过合成血小板膜上的粘附蛋白参与免疫反应;②4个巨核细胞株代表不同成熟阶段巨核细胞的模型,炎性细胞因子TNF-α,IL-1β,IL-3和IL-6在4个细胞株均有表达,提示不同阶段的巨核细胞均可作为炎性细胞因子的一个来源,参与机体的免疫过程;③细胞因子IL-1β,IL-3和IL-6对巨核细胞生长均有不同程度的促进活性,尽管较血小板生成素低,仍提示巨核细胞存在一个自分泌(autocrine)反应,影响自身的生长.研究结论提示巨核细胞可通过合成血小板膜的粘附蛋白参与免疫反应.另外,巨核细胞也可能是炎性细胞因子的一个来源.
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PDGF-BB促粒细胞/巨核细胞生长及其作用机制的研究
目的:探讨血小板衍生生长因子(PDGF-BB)对体外粒-单核细胞集落形成单位(CFU-GM)、巨核细胞集落形成单位(CFU-MK)的生成作用及其对人巨核细胞株CHRF抗凋亡作用的具体机制.方法:采用血浆凝固培养法培养小鼠和人骨髓细胞CFU-GM和CFU-MK,探讨PDGF-BB对两者CFU-GM、CFU-MK形成能力的影响.通过AnnexinV/PI双染、活性Caspase-3表达及JC-1线粒体膜势能流式细胞术检测研究PDGF-BB对人巨核细胞株CHRF的抗凋亡作用机制.结果:PDGF-BB 0-100 ng/ml能够促进小鼠/人CFU-GM和CFU-MK的增殖并呈剂量依赖性,其中50 ng/ml作用为明显(P＜0.01).流式细胞术检测结果表明,PDGF-BB通过线粒体及Caspase-3通路对人巨核细胞株CHRF发挥抗凋亡作用(P＜0.05).结论:PDGF-BB能够促进体外小鼠和人粒-单核系及巨核系造血生成,且能通过线粒体途径和Caspase-3通路对巨核细胞发挥抗凋亡作用.
