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PDGF-BB促粒细胞/巨核细胞生长及其作用机制的研究
目的:探讨血小板衍生生长因子(PDGF-BB)对体外粒-单核细胞集落形成单位(CFU-GM)、巨核细胞集落形成单位(CFU-MK)的生成作用及其对人巨核细胞株CHRF抗凋亡作用的具体机制.方法:采用血浆凝固培养法培养小鼠和人骨髓细胞CFU-GM和CFU-MK,探讨PDGF-BB对两者CFU-GM、CFU-MK形成能力的影响.通过AnnexinV/PI双染、活性Caspase-3表达及JC-1线粒体膜势能流式细胞术检测研究PDGF-BB对人巨核细胞株CHRF的抗凋亡作用机制.结果:PDGF-BB 0-100 ng/ml能够促进小鼠/人CFU-GM和CFU-MK的增殖并呈剂量依赖性,其中50 ng/ml作用为明显(P＜0.01).流式细胞术检测结果表明,PDGF-BB通过线粒体及Caspase-3通路对人巨核细胞株CHRF发挥抗凋亡作用(P＜0.05).结论:PDGF-BB能够促进体外小鼠和人粒-单核系及巨核系造血生成,且能通过线粒体途径和Caspase-3通路对巨核细胞发挥抗凋亡作用.
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褪黑素对照射后小鼠血小板造血的保护作用
目的探讨褪黑素(melatonin,Mel)对照射后小鼠血小板和巨核细胞造血功能的影响.方法18只雌性BALB/c小白鼠随机分为3组:正常组(N组),对照组(C组)和Mel组(M组),每组6只.其中N组不接受照射和药物注射,C组和M组小鼠予4 Gy的60Co γ射线全身照射,照射后M组每天腹腔注射Mel 10 mg·kg-1·d-1,连续注射21 d,C组注射生理盐水.于照射前及照射后的第7、14和21天采尾血,观察白细胞和血小板计数变化,在第21天采血后取骨髓行巨核细胞集落形成单位(CFU-MK)和骨髓基质细胞集落形成单位(CFU-F)培养.另外观察正常小鼠体外骨髓CFU-MK在不同浓度的Mel(0～500 nmol/L)作用下的生长情况.结果M组血小板计数回升明显高于C组(P＜0.05),M组的CFU-MK和CFU-F集落生长明显优于C组(P＜0.001).体外小鼠骨髓CFU-MK的生长对Mel有浓度依赖性,Mel浓度为200 nmol/L时,CFU-MK集落数目多,且集落大小和MK成熟度较对照均有明显提高.结论Mel对照射后小鼠骨髓的血小板造血功能有保护作用,Mel可促进 骨髓基质细胞和MK增殖分化,从而提升外周血血小板数量.
关键词： 褪黑素 血小板造血 巨核细胞 巨核细胞集落形成单位 -
血小板生成减少引起的血小板减少症
1 纯巨核再生障碍性贫血纯巨核细胞生成障碍引起的血小板减少是一种少见的疾病,其特征是骨髓巨核细胞明显减少或完全缺乏导致血小板减少,而其他血细胞成分很少累及.巨核细胞生成障碍性血小板减少患者伴有其他细胞系轻度异常,大红细胞或红细胞生成障碍较少见,这些异常可能是骨髓增生异常或再生障碍性贫血(下称再障)的一个前驱表现.获得性巨核细胞生成障碍可能与以下因素有关,如某些病毒如微小病毒、人类免疫缺陷病毒(HIV-1)等感染;某些药物如噻嗪类利尿剂、雌激素、酒精中毒等;某些疾病如系统性红斑狼疮(SLE)或IgG抗体对巨核细胞集落形成单位(CFU-MK)的抑制等.本病病因与巨核细胞发育的自身免疫抑制有关.血小板减少的机制可能与获得性纯红再障和再障患者的发病机制相似.
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脐血红细胞生成素和白细胞介素6水平检测
目的:红细胞生成素(EPO)特异性作用于红系造血细胞,刺激红系祖细胞增殖、分化、成熟,是红细胞系统造血必不可少的造血刺激因子.白细胞介素6(IL-6)促进造血干细胞从G0期进入G1期,与EPO、GM-CSF及IL-3协同作用可促进红系爆增生式集落形成单位(BFU-E)、粒细胞巨噬细胞集落形成单位(CFU-GM)、巨核细胞集落形成单位(CFU-MK)和多向性祖细胞集落形成单位(CFU-GEMM)形成.体外实验证实脐血浆具有刺激造血的活性.本实验检测正常足月新生儿脐血浆的EPO和IL-6水平以了解EPO与IL-6在脐血造血中的作用.方法:用双抗夹心酶联免疫吸附法和放免法分别检测33例正常足月顺产新生儿脐血浆的IL-6和EPO的水平,同时检测12例成人外周血血浆作为对照.实验数据采用Wilcoxon秩和检验.结果:61%脐血浆检测到IL-6,范围在1～21 ng/L,中位数7 ng/L,成人仅1例检测到低水平的IL-6(4 ng/L),脐血浆IL-6水平明显高于成人(P＜0.05).脐血浆EPO范围在5～72 U/L,中位数16 U/L,成人EPO范围在5～17 U/L,中位数8.5 U/L,脐血浆EPO水平明显高于成人(P＜0.05).结论:与成人血浆比较,脐血浆含有较丰富的造血因子EPO和IL-6,是脐血造血的重要因素.应用脐血血浆输注,可以刺激贫血患者的红系造血功能,是一个值得深入探讨的治疗手段.
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特发性血小板减少性紫癜骨髓造血干细胞的功能及与疗效的关系
目的:探讨特发性血小板减少性紫癜(idiopathic thrombocytopenic purpura,ITP)患者骨髓造血干细胞的增殖分化功能,并从巨核细胞集落形成单位的数量和血小板上升的幅度探讨两者之间的疗效关系.方法:用甲基纤维素半固体培养ITP患者粒-巨噬细胞集落形成单位、红系集落形成单位、巨核细胞集落形成单位,观察巨核细胞集落形成单位与血小板上升平均值的关系.结果:ITP患者骨髓粒-巨噬细胞集落、红系集落形成单位、巨核细胞集落形成单位集落数低于正常对照组,粒-巨噬细胞集落数及丛落数高于正常对照组,巨核细胞数大于5/高倍视野的ITP患者其巨核细胞数与血小板上升无关,巨核细胞集落形成单位与血小板上升平均值有关.结论:ITP患者骨髓造血干细胞增殖分化功能异常,提示ITP可能是造血干细胞异常的疾病.ITP的巨核细胞集落形成单位与血小板上升幅度有关,巨核细胞集落形成单位可以预测ITP的治疗效果.
