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尿毒症患者红细胞生成抑制因子的实验研究
目的本文采用甲基纤维素细胞培养的方法,分析尿毒症患者血清及超滤液对小鼠骨髓红系造血祖细胞集落形成的影响,初步探讨红细胞生成抑制因子的存在、其相对分子质量大小及高通量透析器与普通低通量透析器对其清除的不同影响.方法选择北京朝阳医院肾内科12例尿毒症肾性贫血未透析患者为实验组,另选正常健康体检者12例为正常对照组,将实验组、正常对照组血清及应用F80透析器对实验组患者采用单纯超滤的方法所得超滤液(A组)、并将上述超滤液再用F6透析器进行循环超滤所得的超滤剩余液(B组)及F6超滤液(C组)分别稀释成不同终浓度,采用甲基纤维素细胞培养的方法与小鼠骨髓细胞进行培养,对比不同浓度血清组红系集落形成单位(CFU-E)、红系爆式形成单位(BFUE)的集落数,A、B、C 3组超滤液在相同浓度时CFU-E、BFU-E集落的数量.结果在实验组中,与血清浓度为0的浓度组相比,与各浓度组血清共同培养的小鼠骨髓CFU-E和BFU-E的集落数均明显减少,且随血清浓度的增加,小鼠骨髓CFU-E和BFU-E的集落数逐渐减少,各浓度组间差异有显著性(P＜0.05);在A、B、C 3组的各组内,与超滤液浓度为0的浓度组相比,与各浓度组超滤液共同培养的小鼠骨髓CFU-E和BFU-E的集落数均明显减少,且随超滤液浓度的增加小鼠骨髓CFU-E和BFU-E的集落数逐渐减少,各浓度组间差异有显著性(P＜0.05);相同浓度时,与A组滤过液共同培养的小鼠骨髓CFU-E和BFU-E的集落数较B组、C组均明显减少;B组、C组两组之间差异无显著性(P＞0.05).结论尿毒症患者血中存在红细胞生成抑制因子,其对红系造血祖细胞的抑制作用具有剂量依赖性;红细胞生成抑制因子既可有大、中分子物质也有小分子物质;高通量透析器较普通低通量透析器能更有效清除红细胞生成抑制因子.
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多发性骨髓瘤患者骨髓间充质干细胞冻存前后的生物学特性
背景：多发性骨髓瘤患者的骨髓间充质干细胞具有多向分化、免疫调节和支持造血作用，但是这些功能是否受冻存的影响目前尚不清楚。
目的：探讨冻存对多发性骨髓瘤患者骨髓间充质干细胞生物学特性的影响。
方法：采用细胞贴壁法获取多发性骨髓瘤患者骨髓间充质干细胞，将传代后的细胞用 IMDM 细胞冻存液(含10%的二甲基亚砜和体积分数40%的胎牛血清)保存在-196℃液氮中。检测短期(1个月)和长期(12个月)冻存复苏后间充质干细胞的活性和增殖能力；将冻存后多发性骨髓瘤患者骨髓间充质干细胞作为滋养层，应用甲基纤维素半固体培养，检测其支持造血的能力；混合淋巴细胞反应检测冻存后多发性骨髓瘤患者骨髓间充质干细胞调控免疫能力。
结果与结论：经过短、长期冻存后多发性骨髓瘤患者骨髓间充质干细胞的细胞活性分别为(92.9±7.5)%和(86.7±9.2)%；短、长期冻存后细胞的增殖能力与冻存前间充质干细胞相似；冻存后多发性骨髓瘤患者骨髓间充质干细胞仍具有支持造血祖细胞生长的作用和抑制T淋巴细胞增殖的能力，与冻存前相比，没有明显差别。说明冻存可以降低多发性骨髓瘤患者骨髓间充质干细胞的细胞活性，但是并不影响间充质干细胞的增殖、支持造血和免疫调节的能力。 -
特发性血小板减少性紫癜骨髓造血干细胞的功能及与疗效的关系
目的:探讨特发性血小板减少性紫癜(idiopathic thrombocytopenic purpura,ITP)患者骨髓造血干细胞的增殖分化功能,并从巨核细胞集落形成单位的数量和血小板上升的幅度探讨两者之间的疗效关系.方法:用甲基纤维素半固体培养ITP患者粒-巨噬细胞集落形成单位、红系集落形成单位、巨核细胞集落形成单位,观察巨核细胞集落形成单位与血小板上升平均值的关系.结果:ITP患者骨髓粒-巨噬细胞集落、红系集落形成单位、巨核细胞集落形成单位集落数低于正常对照组,粒-巨噬细胞集落数及丛落数高于正常对照组,巨核细胞数大于5/高倍视野的ITP患者其巨核细胞数与血小板上升无关,巨核细胞集落形成单位与血小板上升平均值有关.结论:ITP患者骨髓造血干细胞增殖分化功能异常,提示ITP可能是造血干细胞异常的疾病.ITP的巨核细胞集落形成单位与血小板上升幅度有关,巨核细胞集落形成单位可以预测ITP的治疗效果.
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EPO单克隆抗体抑制CFU-E研究
目的 探讨EPO单克隆抗体是否具有抑制红系集落形成单位(CFU-E)形成的功能.方法 对大鼠骨髓进行定向体外CFU-E培养,按以下条件进行分组培养:空白对照组(不加EPO)、常规组(加EPO,不加EPO单克隆抗体)、EPO单克隆抗体干预组(EPO+EPO单克隆抗体).培养168 h后,观察各组CFU-E数量.结果 空白对照组、常规组、EPO单克隆抗体干预组的CFU-E集数落分别为0.0±0.0、151.8±23.3和10.7±3.9.EPO单克隆抗体干预组与常规组比较,CFU-E集落数存在非常显著性差异(P＜0.01).结论 该EPO单克隆抗体可明显抑制CFU-E形成,即抑制红细胞系的增殖,是治疗高原红细胞增多症的可能药物.
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胰蛋白酶酶切EPO之多肽片段抑制EPO促CFU-E形成的研究
目的:观察胰蛋白酶酶切EPO之多肽片段能否抑制EPO促红系形成.方法:对大鼠骨髓进行红系定向体外培养,加入胰蛋白酶酶切EPO之多肽片段干预,观察红系集落形成单位(CFU - E)之数量,判定胰蛋白酶酶切EPO之多肽片段对红系增殖活性的影响.结果:胰蛋白酶酶切EPO之多肽片段加入干预培养后,CFU - E数量明显减少(P＜0.01).结论: 胰蛋白酶酶切EPO之多肽产物体外能对抗EPO,抑制红系增殖. 其可作为治疗高原红细胞增多症的可能药物进一步研究.
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银屑病患者骨髓造血细胞体外增殖活性研究
目的 进一步了解银屑病患者骨髓造血细胞是否有异常.方法 采用密度梯度离心法分离银屑病患者及正常对照组骨髓单一核细胞,然后在含有甲基纤维素的半固体细胞因子培养体系中进行体外高增殖潜能集落形成细胞(HPP-CFC)、粒-巨噬细胞系集落形成单位(CFU-GM)及红系集落形成单位(CFU-E)集落形成实验,培养一定时期后计数集落.结果 与正常对照比较,银屑病患者的HPP-CFC及CFU-GM的集落形成数显著减少,而CFU-E形成的集落数无统计学意义.结论 银屑病患者骨髓造血细胞体外增殖能力明显降低,这种异常的造血细胞可能在银屑病的免疫发病机制中发挥一定作用.
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EPO多克隆抗体抑制EPO促CFU-E形成研究
目的:探讨EPO多克隆抗体是否具有对抗EPO促红系形成的功能.方法:对大鼠骨髓进行定向体外红系集落形成单位(CFU-E)培养,观察CFU-E数量,判定EPO多克隆抗体对红系增殖活性的影响.结果:与常规培养组比较,EPO多克隆抗体培养组CFU-E明显减少,P＜0.01,差别有非常显著性.结论:EPO抗体可抑制EPO促红系形成,其可作为治疗高原红细胞增多症病人的药物进一步研究.
