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人白血病细胞株对L-门冬酰胺酶敏感性与门冬酰胺合成酶表达水平的相关性
本研究探讨人白血病细胞株门冬酰胺合成酶(asparagine synthetase,AsnS)的表达水平及与白血病细胞株对L-Asparaginase(L-Asp)敏感性的关系.用实时定量PCR技术(real-time quantitative PCR,RQ-PCR)检测Jurkat,HL-60,U937,NB4,THP-1,Namalwa,Karpas299和K562等8种细胞株基础的和经L-Asp处理后的AsnS表达水平,用CCK-8实验检测细胞对L-Asp处理的敏感性.结果表明,8种细胞株之间AsnS的基础表达水平存在很大程度的变异,经L-Asp处理后细胞株的AsnS表达显著上调(p＜0.05),AsnS低水平表达细胞对L-Asp相对敏感,而AsnS高表达细胞对L-Asp相对耐药.在8种细胞株中,U937对L-Asp高度敏感,其AsnS表达水平低,而K562细胞株对L-Asp天然耐药,AsnS表达水平高.结论:AsnS在天门冬氨酸耗竭后的细胞生物学行为中起着重要的作用,AsnS的表达水平反映了细胞对L-Asp的敏感性,L-Asp在AsnS低表达白血病的治疗中有潜在的应用价值.
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门冬酰胺合成酶启动子区单核苷酸多态性与基因表达量的相关性研究
细胞内门冬酰胺合成酶(asparagines synthetase,AS)的表达水平与白血病细胞对左旋门冬酰胺酶(L-asp)耐药有关.本研究旨在通过筛查发现AS启动子区的单核苷酸多态性(SNP)位点,研究它们对AS基因表达量的影响及寻找对L-asp治疗反应具有影响的个体遗传因素.对82份白血病标本和45份非白血病标本直接测序,筛查AS启动子区的SNP;用实时定量PCR法测定相应标本中的AS mRNA水平.通过对被筛SNP位点不同基因型个体的AS表达水平的统计分析,判断被筛SNP是否对基因表达产生影响.结果发现:被测AS启动子片段内共发现3个SNP位点.分别是-239C/T,-92G/A和-62A/T.其中-92A等位基因在白血病患儿中的发生频率高于非白血病(P＜0.05).AS表达在该SNP的各种基因型个体间存在差异,基因表达水平由高到底依次为GA杂合子型＞AA纯合子型＞GG纯合子型(P＜0.01).结论:-92A等位基因变异可能与白血病的某些特征相关,并且这个等位基因变异的存在与AS基因的高表达相关.
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左旋门冬酰胺酶治疗恶性血液病致出、凝血功能异常原因及防治对策
左旋门冬酰胺酶(L-ASP)是酰胺基水解酶,对于淋巴系统恶性肿瘤,特别是急性淋巴细胞白血病(ALL)的诱导缓解及维持长期无瘤生存起到很重要的作用.L-ASP治疗儿童ALL的机制为门冬酰胺是蛋白质合成的重要氨基酸之一,人体正常细胞能自身合成门冬酰胺,满足细胞蛋白质合成需要,而肿瘤细胞因缺乏门冬酰胺合成酶,需从细胞外摄取门冬酰胺,因此L-ASP通过水解门冬酰胺致蛋白质合成障碍,从而使肿瘤细胞生长繁殖受到抑制,过多消耗血液循环中门冬酰胺,机体中某些代谢旺盛的器官,如肝脏、胰腺等正常细胞的作用机制也受到影响,这正是L-ASP致很多不良反应发生的原因.因此,在其应用时常伴有一系列严重并发症,在一定程度上限制了其在临床中的应用.在这些严重不良反应中,出、凝血功能异常就是之一.本文对L-ASP治疗恶性血液病致出、凝血功能异常原因及防治对策进行综述.
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ALL患儿肿瘤细胞的门冬酰胺合成酶活性研究
目的 不同类型急性淋巴细胞性白血病(ALL)对左旋门冬酰胺酶(L-Asp)敏感度不完全相同,由于L-Asp活性水平与细胞内门冬酰胺合成酶活性负相关,因此研究不同类型ALL患儿白血病细胞内门冬酰胺合成酶活性水平分布情况,有助于临床治疗中合理使用L-Asp.方法 通过HPLC-FLD及蛋白定量等技术,检测28例ALL患儿(免疫酶型T-ALL 7例,B细胞系列ALL 21例)白血病细胞内门冬酰胺合成酶活性水平.结果 T-ALL患儿肿瘤细胞内AS活性水平较B细胞系列ALL患儿的显著增高(P＜0.05),其中T-ALL患儿肿瘤细胞内AS活性中位水平为每小时9.3 nM Asn/mg protein,B细胞系列ALL患儿为每小时5.2 nM Asn/mg protein.但无论是在B细胞系列ALL患儿还是在T-ALL患儿中,肿瘤细胞内AS活性存在多态性分布.结论 ALL患儿白血病细胞中门冬酰胺合成酶活性存在多态性分布,总体上T-ALL比B系ALL白血病细胞中门冬酰胺合成酶活性高.
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ALL患儿L-Asp治疗相关性血浆氨基酸水平变化及其意义
目的检测ALL患儿血浆左旋门冬酰胺酶(L-Asp)治疗过程中相关氨基酸水平变化,探讨这种变化与临床疗效的相关性,为L-Asp的个体化用药提供依据.方法通过HPLC-FLD技术检测20例初治ALL患儿(17例为B-ALL,3例为T-ALL)在L-Asp使用不同时段血浆中门冬酰胺(Asn)、门冬氨酸(Aspa)、谷氨酰胺(Gln)、谷氨酸(Glu)等水平.结果在L-Asp第一次使用后,患儿血浆内Asn显著下降,随着L-Asp的按序使用,患者血浆中Asn始终保持在低水平甚或测不出,有15例B-ALL患儿可持续到L-Asp停用后约7天左右,并在第10天时仍未恢复正常,但全部3例T-ALL患儿却在L-Asp停用后约7天时Asn浓度明显回升甚至达到正常水平,而仅2例B-ALL患儿出现类似情况.与第一次使用L-Asp前1～2 h血浆浓度相比,第二次、后一次血浆中Glu浓度均显著升高(P<0.05),直至L-Asp停用后第7天血浆浓度才恢复正常;而Aspa浓度则持续升高(P<0.05),到停药后第10天仍未恢复正常;在整个治疗过程中,Gln水平虽略有下降,与治疗前相比并无显著差异.结论 L-Asp停用后T-ALL患儿血浆Asn水平较B-ALL患儿恢复快,提示在儿童ALL的治疗中,对于L-Asp的使用,应结合患者免疫学分型,这可能为临床L-Asp个体化用药提供理论依据.而L-Asp的部分谷氨胺酶活性在L-Asp治疗中作用并不显著.
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门冬酰胺酶制剂治疗淋巴系统恶性肿瘤耐药机制的研究进展
左旋门冬酰胺酶是淋巴系统恶性肿瘤治疗中的重要组成药物,因其生物学来源不同,其药代动力学特征也存在不同.本文将对门冬酰胺酶不同制剂进行比较并对其在淋巴系统恶性肿瘤治疗中的耐药机制作一综述.
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L-Asp抗恶性淋巴系增殖性疾病的机制研究进展
人们长期认为L-Asp通过引起肿瘤细胞内氨基酸代谢失衡,继而引起胞内蛋白质生物合成严重受损,终细胞功能受到损害,细胞死亡.然而人们对介导L-Asp发挥作用的诸多中间环节和确切分子机制尚未完全搞清楚,国内外在此领域进行了广泛的研究,本文对近年来国际上的研究进展进行简要综述.
