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HLA-G3蛋白能够抑制多克隆NK细胞的杀伤功能
目的研究HLA-G3蛋白对NK细胞杀伤功能的抑制作用. 方法用RT-PCR方法扩增HLA-G3和HLA-G1的cDNA,并将其克隆到真核表达载体pcDNA3中,采用脂质体转染法将其转入K562细胞,用免疫荧光法确定其在细胞表面表达,细胞毒试验研究其对NK细胞杀伤功能的抑制作用. 结果 HLA-G3蛋白和HLA-G1表达在细胞表面,以PBL细胞为效应细胞的细胞毒实验表明K562-G1细胞和K562-G3细胞的细胞裂解率都比K562细胞裂解率低. 结论 HLA-G3蛋白能够抑制多克隆NK细胞的杀伤功能.
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NK细胞MHC-1类分子受体及其信号传导
近年来,NK细胞表面MHC-1类分子受体的发现,改变了人们对NK细胞杀伤作用的认识.目前已知,当组织细胞处于正常状态时,NK细胞可通过其表面MHC-1类分子受体与正常组织细胞表面相应配体的结合产生杀伤抑制作用;而当细胞受病毒感染或发生突变时,其表面MHC-1类分子表达异常或缺失,NK细胞与相应配体结合则解除杀伤抑制状态,启动活化性信号传导途径,杀伤病毒感染细胞和肿瘤细胞.可见,NK细胞的免疫防御和监视功能与其表面受体在不同情况下传导抑制或活化信号的功能密切相关.近来 ,NK细胞MHC-1类分子受体结构及信号传导机制的研究取得了长足的进展,下面就此方面的研究做一简要综述.
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复方抗癌合剂的体外实验研究
目的:为了寻找效高、毒低的抗癌中草药,我所通过十余年的抗癌中草药筛选,将其中的十余种组成方剂。复方抗癌剂为三七、半枝莲半夏、白茅根、黄芪、柴胡、土茯苓、川芎、莪术、白花蛇舌草、桂枝等十余味中草药组成的复方水煎剂。方法:本文通过体外癌细胞杀伤实验,癌细胞集落形成抑制实验,MTT检测细胞毒性实验。结果:三项实验指标显示复方抗癌合剂对GLC肺癌细胞、SGC胃癌细胞、Hela宫颈鳞癌细胞均有明显的抑制杀伤效果,对肿瘤干细胞集落形成也有明显的抑制作用。MTT检测说明复方抗癌合剂的量效关系为阳性对照药长春新碱的1/10,而复方抗癌合剂为水煮粗提液,今后可通过化学提纯有效成份,将大大提高其抗癌效果。
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血管内皮细胞(ECV304)表达的HLA-G1对NK细胞杀伤活性的抑制作用
目的: 证实HLA-G1分子能够抑制NK细胞对同种血管内皮细胞系的杀伤作用.方法: 采用脂质体介导的DNA转染技术, 以构建的真核表达质粒pcDNA3-HLA-G1转染人脐静脉内皮细胞系ECV304, 再用免疫荧光法检测表达的HLA-G1分子.并用MTT比色法检测HLA-G1对NK细胞杀伤活性的影响.结果: ECV304细胞上可稳定表达HLA-G1.NK细胞对空质粒pcDNA3转染的ECV304细胞的杀伤率为(50.6±18.1)%;而对pcDNA3-HLA-G1转染的ECV304细胞的杀伤率为(29.7±11.4)%, 两者差异具有显著意义(P <0.01).结论: HLA-G1分子可明显抑制NK细胞对同种血管内皮细胞的杀伤效应.