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福建HTLV-Ⅰ的序列测定和系统树分析
目的了解福建省HTLV-Ⅰ毒株的亚型及进化起源. 方法用PCR的方法扩增出福建5株样品的Env区及LTR区基因,测序后与世界各地的代表株进行比较、分析,构建进化树. 结果将5株样品与WHP、MT2、TAC1进行比较,其Env区核苷酸变异率在0.17%～1.23%,LTR区在0.28%～1.26%,无缺失、插入. 结论获自福建的分离株与日本和我国台湾、汕头的代表株接近,属于HTLV-Ⅰ A亚型(Cosmopolitan)的Transcontinental亚群,它们来源于共同的祖先.
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HTLV-Ⅰ相关性HAM/TSP患者血清及脑脊液IL-6的测定及其意义
[目的]探讨白细胞介素6(IL-6)在人嗜T淋巴细胞病毒Ⅰ型相关性脊髓病/热带痉挛性瘫痪(HAM/TSP)发病中的作用.[方法]应用免疫放射方法检测8例HAM/TSP患者血清及脑脊液中IL-6水平.[结果]HAM/TSP 患者血清及脑脊液中IL-6含量分别为(194.76±30.01) pg/ml;(184.12±36.39) pg/ml,而其他神经系统疾病(OIND)组血清及脑脊液中IL-6含量分别为(132.61±21.76) pg/ml;(124. 95±15.39) pg/ml,正常对照组(NC) 组血清IL-6含量为(127.08±22.05) pg/mL.HAM/TSP患者血清及脑脊液IL-6水平均明显高于正常对照组(P<0.01);但HAM/TSP患者血清中IL-6含量与脑脊液中IL-6含量水平不呈线性相关.[结论]IL-6在HAM/TSP发病的免疫机制中可能起到重要作用.
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对嗜T淋巴细胞病毒Ⅰ型重组env的研究
目的 探讨人类嗜T淋巴细胞病毒( Human T-cell Lymphotropic Virus,HTLV)I型重组env抗原的表达.方法 分析和选择HTLV-Ⅰ env目的基因,将目的基因片段分别克隆人原核表达载体pQE80L,PCR和酶切鉴定重组子,诱导并亲和层析纯化表达重组env蛋白抗原,Western-blot检测重组env蛋白抗原活性,ELISA方法测试重组env蛋白抗原的特异性.结果 PCR扩增和酶切筛选得到阳性重组子pQE80L-env.SDS-PAGE显示重组蛋白相对分子质量约为25KDa,与预期分子量相符.免疫印迹在约25KDa有一明显特异印迹条带.转染细胞培养48h,SDS-PAGE分析,有相对分子质量约为27KDa目的重组蛋白表达,与预期的融合蛋白大小相符.ELISA检测到正常人、HIV阳性和HTLV-Ⅱ阳性的参考血清均为阴性；HTLV-Ⅰ阳性的参考血清为强阳性.结论 HTLV-Ⅰ env基因5915nt-6545nt区,可以利用原核系统表达得到特异性HTLV-Ⅰ重组抗原,重组抗原无显著性差异,有望成为检测试剂的抗原.
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厦门市无偿献血者HTLV-Ⅰ感染率及1株病毒株膜基因分析
目的了解厦门市无偿献血者HTLV-Ⅰ感染的阳性率、来源及基因特点,为在无偿献血人群中开展检测提供基础资料.方法对厦门市无偿献血者进行抗-HTLV血清学检测,初筛阳性标本经WB方法确认,并用PCR扩增确认的1株HTLV-Ⅰ部分env片段,全自动测序仪测序,分析该株HTLV-Ⅰ与HTLV-Ⅰ各亚型代表株的核苷酸、氨基酸的差异性.结果厦门市无偿献血人群HTLV-Ⅰ感染率为0.01%,该株HTLV-Ⅰ的部分核苷酸序列(5031～ 6344)和编码氨基酸序列.结论在厦门市无偿献血者中发现的,该株HTLV-Ⅰ来源于我国江西省,其核苷酸序列与现有报道病毒株序列存在较大差异,提示可能与其他病毒株有不同起源,随着国产血清学检测试剂质量的提高,有必要在部分地区的无偿献血人群中开展HTLV-Ⅰ抗体检测.
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福建省两株HTLV-Ⅰ前病毒外膜区部分env核苷酸序列测定及分析
目的:了解我国福建省HTLV-Ⅰ感染的来源和亚型.方法:对福建省发现的两株HTLV-Ⅰ,用PCR扩增HTLV-Ⅰ部分env 522bp的片段(gp46 5'末端和gp21的大部分),全自动测序仪测序,并分析此两株HTLV-Ⅰ与HTLV-Ⅰ各亚型代表株的核苷酸、氨基酸的同源性.结果:获得福建省两株HTLV-Ⅰ的部分env核苷酸序列(6065～6544)和编码氨基酸序列(296～455).结论:福建省的这两株HTLV-Ⅰ与日本的HTLV-Ⅰ(MT2和H5)核苷酸、氨基酸序列接近,属A亚型.
