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寻常型天疱疮抗原Dsg3 EC1-EC2片段的重组表达
寻常型天疱疮(Pemphigus vulgaris,PV)是一种自身免疫性皮肤病,靶抗原位于细胞间重要的连接结构一桥粒上,主要是桥粒芯糖蛋白3(desmoglein3,Dsg3),获得Dsg3,不仅可以用来检测PV抗体,还可用来进行基础研究,探索天疱疮的发病机理.
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寻常型天疱疮抗原表位重组、致病性与临床应用研究
天疱疮是一危及人类生命的自身免疫性大疱性皮肤和粘膜疾病,其中的寻常型天疱疮(pemphigus vulgaris,PV)在所有类型的天疱疮中具有多见、病情重、死亡率高的特点.寻常型天庖疮患者的角质形成细胞间粘附能力丧失,其原因是患者血清中存在针对寻常型天疱疮抗原(pemhpigis vugarisantigen,PVA)即角质形成细胞的桥粒芯糖蛋白-3(desmoglein3,Dsg-3)的IgG型抗体.为了确定PVA中的致病性表位,美、日学者采用的是将寻常型天疱疮患者血清中的不同抗PVA表位抗体转移至新生鼠,通过观察新生鼠的病理改变的方法进行.此方法的缺点是需要较大量的寻常型天疱疮患者血清和由于血清取自不同的个体从而影响实验结果.
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寻常型天疱疮抗原EC1-2表位的致病性
目的通过寻常型天疱疮新生鼠模型的建立研究寻常型天疱疮抗原(PVA)致病性表位及其相应抗体的致病作用.方法构建重组PVA细胞外区(EC)1-2片段分子.经亲和层析纯化后,免疫家兔,得到兔抗PVAEC1-2融合蛋白的抗血清.将提纯IgG抗体成分,被动转移到BALB/c新生鼠,15~18h后对新生鼠皮肤、血清进行组织病理、电镜和免疫荧光检查.结果在对实验组新生鼠的评价中,其组织病理示表皮内水疱形成,棘细胞间棘突消失,棘层松解;电镜示棘细胞间距离增宽,桥粒分离、溶解、消失;DIF和IIF均示棘细胞间免疫荧光沉积.而对照组小鼠除了IIF示棘细胞间微弱的荧光沉积外,其余检查均正常.结论通过寻常型天疱疮新生鼠模型的建立,证明PVA分子中EC1-2表位为致病性表位,其相应的抗体为致病性抗体.另外,PVA重组分子的构建,新生鼠模型的建立为天疱疮以及其它自身免疫性疾病的诊断和治疗提供了一个模型.