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含EBV-LMP2基因重组腺病毒疫苗的构建及其诱导CTL应答的初步探讨
目的构建包含EBV-LMP2基因的重组腺病毒疫苗并探讨它在体内外的免疫性质. 方法采用pAdeasy-1系统构建包含EBV-LMP2基因的重组腺病毒疫苗,并用IFA、PCR和TCID50等方法对其特异性进行鉴定.通过重组腺病毒感染人树突状细胞(DC),在体外活化自体T细胞;以及通过重组腺病毒感染小鼠淋巴细胞,皮下免疫同种小鼠,体内活化CTL评价其免疫效果. 结果通过PCR以及间接免疫荧光试验分别证实了病毒目的基因LMP2的存在以及蛋白在293细胞中的表达.采用TCID50方法,测定第6代的病毒滴度为2×108.体内外的免疫实验结果显示通过这两种方式均可以有效地引发针对EBV-LMP2的CTL反应. 结论包含EBV-LMP2基因的重组腺病毒疫苗可以在体内外有效地引发CTL应答,这些资料为下一步临床应用含LMP2的重组腺病毒作为疫苗治疗和预防EBV相关肿瘤奠定了基础.
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C型趋化因子XCL1研究进展
C型趋化因子家族唯一成员XCL1,又称淋巴趋化因子,主要由CD8+T细胞和自然杀伤细胞产生.XCL1具有独特的序列特征以及两种可相互转换的蛋白空间构象,使得XCL1有别于其他趋化因子并发挥独特的功能.XCL1特异性受体XCR1是G蛋白偶联受体家族成员,二者相互作用不仅在胸腺的阴性选择和建立自身免疫耐受中发挥重要作用,而且能启动交叉抗原递呈并介导细胞毒性免疫反应.XCL1不仅能调节免疫系统平衡,维持肠道免疫稳态,而且与多种疾病相关,如自身免疫病、肾炎、结核和人类免疫缺陷病毒感染等.近年来证实XCR1选择性地表达在具有抗原递呈能力的CD8+DCs细胞上,引发许多XCL1相关应用研究并取得很好的效果,使得XCL1在黏膜免疫,抗肿瘤免疫治疗和靶向疫苗研制方面具有广阔的应用前景.
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HIV-1感染者特异CTL反应的研究进展
艾滋病病毒Ⅰ型(HIV-1)感染可以同时活化宿主的T细胞免疫与体液免疫.被活化的HIV-1特异性细胞毒性T淋巴细胞(CTL),可通过释放穿孔素和颗粒酶或细胞因子与趋化因子等途径,来直接杀伤被感染的靶细胞,或控制病毒进入靶细胞及其复制,在与HIV-1斗争中发挥着极其重要的作用.随着研究的深入,人们对机体抵御HIV-1感染的CTL细胞免疫反应的认识也逐渐加深.已经从单一功能与单一相关因素水平进展为多功能及多因素水平的分析,从而锁定真正具有免疫保护作用的CTL反应功能群,解析控制病毒血症的主要机制,以期为新型HIV疫苗的设计以及效果评价提供科学依据.文章主要就具有免疫保护作用的CTL反应的特征及CTL反应与HIV疾病进展关系的研究等新进展加以综述.
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巨噬细胞瘤苗免疫调节作用的研究
目的 观察巨噬细胞肿瘤疫苗对细胞毒性T细胞(CTL)反应及Th1/Th2型细胞因子分泌的调节作用.方法 分别采用MTT法和比色法检测肿瘤细胞杀伤率和清液上乳酸脱氢酶(LDH)含量,采用Western印记法与ELISA法检测脾细胞内及分泌入培养上清的IL-2、IL-4、IL-10及IFN-У等细胞因子.结果 巨噬细胞肿瘤疫苗接种组的淋巴细胞肿瘤细胞杀伤率与培养上清液LDH水平分别为(36.70±21.02)%和(0.29±0.15)U/ml,明显高于热灭活肿瘤细胞接种组、石蜡诱导的巨噬细胞接种组(P值均<0.05).肿瘤细胞冻融物刺激72 h后,各组免疫小鼠的脾细胞内均可检测到IL-2、IL-4、IL-10及IFN-У等细胞因子;同时巨噬细胞肿瘤疫苗接种组脾细胞培养上清中,IL-2、IL-4、IL-10及IFN-У含量分别为(7.97±3.15)ps/ml、(0.44±0.11)pg/ml、(1.83±0.85)pg/ml和(9.16±4.64)pg/ml,IL-2、IFN-У的水平均高于热灭活肿瘤细胞接种组和石蜡诱导的巨噬细胞接种组(P值均<0.05).结论 巨噬细胞肿瘤疫苗可诱导机体产生特异性抗肿瘤反应,能够促进Th1型细胞因子IL-2、IFN-У的分泌.
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HIV感染中的特异性细胞毒T淋巴细胞反应若干研究
HIV特异性细胞毒T淋巴细胞(cytotoxic T lymphocyte,CLT)反应对于控制HIV感染和研制艾滋病疫苗发挥着重要作用.随着检测水平的提高,如Elispot、四聚体技术、细胞内因子染色技术的应用,人们逐渐确定了HIV感染者特异性CYL识别的表位和它们的限制性MHC-Ⅰ类基因型.目前人们认为HIV特异性CTL反应是机体抗HIV感染,控制病毒血症的主要机制.本文就近年CTL反应的检测技术、CTL反应在疫苗中的应用、高效抗逆转录病毒治疗(HAART)对细胞免疫的影响以及HIV感染中特异性CTL表位的研究进行综述.
关键词: HIV感染 CTL反应 疫苗 高效抗逆转录病毒治疗 -
乙肝基因治疗研究
本文对乙肝的现状、乙肝基因治疗的临床前研究及临床研究进行了综述.肯定了乙肝基因疫苗在治疗HBV感染方面具有很大的潜力和优势.
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治疗性HIV疫苗的研究进展
目的 本文对治疗性HIV疫苗研制的必要性、可行性、作用机制及目前国内外的研究现状进行了综述.肯定了治疗性HIV疫苗的重要作用,认为对于HIV感染这样的顽症,终需要有一个包括有抗病毒小分子药、诱导T细胞产生的治疗性疫苗和其他作用机理的药物在内的全方位攻略才能攻克.