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HeLa细胞及Ehrlich瘤细胞分别提取RA33/36抗原用于诊断RA的比较
目的比较由HeLa细胞及Ehrlich瘤细胞分别提取RA33/36抗原在类风湿性关节炎(rheumatoid arthritis,RA)诊断中的敏感性和特异性.方法RA33/36抗原由HeLa细胞及Ehrlich瘤细胞提取,抗RA33/36用免疫印迹法检测.研究对象分RA患者、非RA患者及正常对照.结果HeLa细胞抗原和Ehrlich瘤细胞抗原两者检测抗RA33/36对RA诊断的特异性为85.7%和87.5%,敏感性为28.2%和26.9%.抗RA33和抗RA36对RA均有诊断价值.结论HeLa细胞及Ehrlich瘤细胞均可用于提取RA33/36抗原.
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RA33/36抗原的纯化及相应抗体的检测
目的纯化RA33/36抗原,观察其检测效率.方法从小鼠Ehrlich腹水癌细胞中提取RA33/36粗抗原,使用肝素-琼脂糖凝胶CL-6B对RA33/36粗抗原进行亲和层析,SDS-聚丙烯酰胺凝胶(SDS-PAGE)和免疫印迹法(IBT)检测富含RA33/36的组分,比较粗抗原和纯化抗原的检测效果.结果SDS-PAGE和IBT显示RA33/36抗原主要存在于缓冲液C的洗脱峰中,纯化抗原较粗抗原杂蛋白条带明显减少,且更加清晰,在检测RA33/36抗体时得到了相同的阳性和阴性结果.结论纯化的RA33/36抗原较粗抗原提高了抗体检测效率,可广泛应用于临床.