首页 > 文献资料
-
Prdx2基因表达情况对结直肠癌SW480细胞影响作用分析
目的 探讨硫氧还蛋白过氧化物酶2(Prdx2)基因表达对结直肠癌SW480细胞增殖、侵袭及凋亡的影响.方法 采用慢病毒空载体(空白组)、干扰片段(Prdx2-shRNA)慢病毒载体转染结直肠癌SW480细胞(实验组),野生型结直肠癌SW480细胞作为对照组,分别于转染后培养24 h、48 h、72 h、96 h、120 h采用MTT法检测SW480细胞增殖情况,采用流式细胞仪技术检测培养120 h后细胞的凋亡率,采用实时荧光定量-聚合酶链反应(qRt-PCR)及Western-blot法检测Prdx2、Survivin mRNA及蛋白的表达,采用Transwell侵袭实验检测SW480细胞的侵袭能力.结果 实验组的W480细胞凋亡率显著高于空白组和对照组(P <0.05),培养48 h、72 h、96 h、120 h,实验组的W480细胞增殖能力明显低于空白组和对照组(P <0.05),实验组的SPrdx2、Survivin mRNA及蛋白相对表达水平显著低于空白组和对照组(P<0.05);Transwell侵袭实验结果显示,实验组的转染结直肠癌SW480细胞侵袭能力强于空白组和对照组(P <0.05).结论 Prdx2基因沉默会抑制结直肠癌SW480细胞的增殖、促进凋亡,但是会增强结直肠癌SW480细胞的侵袭能力.
-
人红细胞内血红蛋白与硫氧还蛋白过氧化物酶2的相互作用
目的 研究人红细胞内硫氧还蛋白过氧化物酶2(Prx2)与血红蛋白(Hb)的相互作用.方法 首先利用红细胞Hb再释放试验分离红细胞和溶血液电泳释放的4个区带,即HbA、HbA2、HbA与HbA2之间(HbA-A2)及再释放Hb,将这些区带分别切下,通过反复冻融获得各区带所合蛋白;用葡聚糖G-25浓缩后再利用SDS-PAGE分离各区带所含蛋白组分,并用抗-Prx2做免疫印迹分析;后用微量热泳动试验(MST)分别检测Prx2蛋白与HbA和HbA2之间的结合常数.结果 红细胞电泳释放的区带HbA、HbA2、HbA-A2及再释放Hb中均有Prx2;而溶血液电泳释放的Hb区带中,除HbA2外其余各Hb区带中均有Prx2.MST检测显示,Prx2蛋白与HbA的结合常数(Kd值)为(14±1.08) μmol/L,而与HbA2之间的Kd值未被检测到.结论 Prx2与HbA之间存在相互作用,但与HbA2之间可能没有相互作用.
