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靶向超声微泡MBICAM-1的制备及靶向实验研究
目的 制备载抗ICAM-1(细胞间黏附分子-1)的靶向超声微泡MBICAM1,鉴定制备微泡的基本性质,研究其在体内及体外的靶向能力.方法 通过“生物素-亲和素”桥接法将抗ICAM-1结合到生物素化脂质微泡,制成MBICAM1;检测制备微泡的浓度、粒径,观察微泡的形态;检测抗ICAM-1与微泡的结合率;ICAM-1质粒转染Hela细胞,观察转染后的Hela细胞与MBICAM-1结合,验证MBICAM-1体外靶向功能;制备家兔左侧跟腱炎症模型,用制备的微泡对家兔双侧跟腱行造影检查,验证MBICAM-1体内靶向能力.结果 三种微泡平均粒径1.00～2.4 μm,浓度2.4×108～1010/ml;微泡的形态完整、规则,分布较匀;微泡和抗ICAM-1单抗的平均结合率为(86.5±5.3)％.MBICAM-1环绕在转染后的Hela细胞周围.MBICAM-1对家兔左侧跟腱造影呈高增强.结论 采用“生物素-亲和素”桥接法可制备MBICAM-1;MBICAM-1在体外、体内均具有靶向功能.
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超声联合携抗ICAM-1微泡的双靶向载体系统增强基因转染受损内皮细胞
目的:探讨超声联合携抗细胞间黏附分子(ICAM)-1阳离子微泡的双靶向载体系统介导基质细胞衍生因子(SDF)-1α基因转染受损内皮的效果.方法:实验分组,A组:携SDF-1α基因抗ICAM-1阳离子微泡;B组:携SDF-1α阳离子微泡;C组:空白对照.体外实验:人白细胞介素-1β刺激制备大量表达ICAM-1的血管内皮细胞模型,各组联合超声辐照介导基因转染后测定基因转染率、基因和蛋白表达情况.体内实验:结扎冠状动脉前降支制备兔心肌梗死模型,超声辐照介导基因转染后取心肌组织,Western blot检测各组心肌SDF-1蛋白的表达情况,RT-PCR检测各组SDF-1 mRNA的表达情况.结果:无论是体外实验还是体内实验,A组:携SDF-1α基因抗ICAM-1阳离子微泡组超声辐照后的基因转染率、hSDF-1α基因mRNA表达和hSDF-1α蛋白表达情况均高于其他各组.结论:超声联合携抗ICAM-1微泡的双靶向载体系统能增强SDF-1α基因转染受损内皮细胞.
