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HLA-G慢病毒转染抑制NK细胞毒功能的实验研究
目的 建立一株稳定表达人类白细胞抗原G(human leucocyte antigen G,HLA-G)的子宫内膜癌细胞系,探讨HLA-G对NK92细胞的杀伤活性影响.方法 将HLA-G慢病毒包装并转染于HEC-1-B细胞系,稳定转染HLA-G基因的HEC-1-B与NK92细胞系共培养,并使用乳酸脱氢酶(lactate dehydrognase,LDH)释放法检测HLA-G表达对自然杀伤(natural killer,NK)92细胞杀伤活性的影响.结果 外源基因HLA-G成功介导转染在人子宫内膜癌HEC-1-B细胞系,通过免疫荧光可见HLA-G表达率为95％,乳酸脱氢酶(LDH)释放法检测HLA-G基因表达能够有效抑制NK92细胞的杀伤活性,与对照组相比有统计学意义(P<0.05).结论 HLA-G是一个重要的免疫抑制分子,稳定表达HLA-G的子宫内膜癌细胞可明显抑制NK92细胞的杀伤活性,可能诱导移植免疫耐受的发生.
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EBV-LCLs内Bcl-2水平与其对NK胞毒作用敏感性的相关性研究
目的：探讨EB病毒感染细胞内Bcl-2水平与其对NK胞毒活性及对凋亡诱导因素敏感性之间的关系。方法：应用反义寡聚脱氧核苷酸，抑制EB病毒转化B淋巴母细胞样细胞系(EBV-LCLs)胞内Bcl-2基因表达。然后观察NK细胞对其杀伤活性的改变以及其对致凋亡因素(地塞米松、撤除生长因子)敏感性的变化。结果：EBV-LCLs胞内Bcl-2表达水平与其对NK细胞杀伤的敏感性呈负相关(P＜0.01)；与无血清培养条件下EBV-LCLs细胞存活率呈正相关(P＜0.01)；与EBV-LCLs对地塞米松致凋亡作用的敏感性呈负相关(P＜0.01)。结论：胞内Bcl-2水平可能是决定靶细胞对NK细胞杀伤活性敏感性的关键因素之一，NK细胞对EBV-LCLs的杀伤机制之一可能是诱导细胞凋亡。
