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母牛分枝杆菌菌苗对哮喘豚鼠肺组织嗜酸粒细胞凋亡及Fas蛋白表达的影响
目的:研究母牛分枝杆菌菌苗对哮喘豚鼠肺组织嗜酸粒细胞凋亡及Fas蛋白表达的影响.方法:30只豚鼠随机分为生理盐水组、哮喘组及母牛分枝杆菌菌苗组,用TUNEL法检测肺组织嗜酸粒细胞凋亡,免疫组化法检测肺组织Fas蛋白的表达.结果:母牛分枝杆菌菌苗组豚鼠肺组织嗜酸粒细胞凋亡指数(23.8±5.4)%显著高于哮喘组(4.6±0.7)%(P<0.01);肺组织Fas表达(OD值)(0.202±0.013)显著高于哮喘组(0.051±0.025)(P<0.01).结论:母牛分枝杆菌菌苗通过上调Fas蛋白在哮喘豚鼠肺组织的表达而诱导肺组织嗜酸粒细胞凋亡.
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解偶联蛋白与2型糖尿病
解偶联蛋白(UCPs)初是在啮齿动物棕色脂肪组织线粒体中发现的一种蛋白,它可以将呼吸链与ATP产生过程解偶联,使底物在氧化过程中产生的能量以热的形式散发,而不以ATP形式储存.人们将其命名为UCP-1,人为造成UCP-1缺陷或棕色脂肪组织缺乏的转基因大鼠可发生肥胖和糖尿病[1],表明UCP-1在能量代谢中具有重要作用.由于成人体内没有棕色脂肪,因此,UCP-1对于人类能量代谢意义不大.近年来,在人体组织内发现了UCP-2及UCP-3,人们认识到UCPs可能影响人类的能量代谢[2].目前,在肥胖和2型糖尿病(DM)病因的分子生物学研究中UCPs备受关注,现就国内外UCPs方面的研究进展做一综述.
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转化生长因子β1和雌激素调节蛋白PS2在乳腺癌中的表达及其对预后的意义
目的研究转化生长因子β1(transforming growth factor-β1,TGF-β1)和雌激素诱导蛋白PS2在乳腺癌中的表达及其与转移复发和预后的关系.方法应用TGFβ1及PS2抗体免疫组化法对110例有完整随访资料的乳腺癌进行检测.结果 TGFβ1和PS2在110例乳腺癌中阳性率分别为56.4%、44.5%;乳腺癌组织中TGFβ1蛋白的表达与组织学分级(χ2=4.503,P<0.05)、淋巴结转移(χ2=8.959,P<0.01)均相关,而在各组织学类型中表达差异无显著性.PS2表达则与临床病理指标均无显著相关性;乳腺癌中PS2蛋白和TGFβ1蛋白的表达与ER、PR分别呈正相关(P<0.05)和显著负相关(P<0.01);除PS2蛋白,TGFβ1、ER及PR阳性表达组转移和复发的发生率与阴性组存在显著差异(P<0.05);作为预后不良的指标,TGFβ1阴性者平均生存时间为(109.25±34.438)个月,5年生存率为97.9%,明显高于阳性者,PS2则无此差异.将TGFβ1和PS2与年龄、淋巴结转移、组织学分级、组织学类型等预后相关指标进行COX多因素分析,结果显示TGF-β1是相对独立的预后因子.结论与PS2相比,TGFβ1与乳腺癌发生发展的关系更加密切.TGFβ1可以作为预测乳腺癌转移和复发独立的预后指标.
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TAT修饰的LIM矿化蛋白3的制备和入胞转导活性的研究
目的 构建pET43.1a-TAT-LMP-3重组蛋白,观察表达目的融合蛋白TAT- LMP-3对人真皮成纤维细胞目的转导活性.方法 构建hLMP-3和TAT49-57目的融合基因,插入载体pET43.1a,组成pET43.1a-TAT-LMP-3重组表达转化大肠杆菌,IPTG诱导TAT-LMP-3融合蛋白表达,Ni2+-NTA亲和层析柱纯化,将融合蛋白加入培养目的人真皮成纤维细胞共孵育,观察蛋白转导进入细胞目的情况.结果 成功地构建了pET43.1a-TAT-LMP-3重组基因原核表达载体,表达和纯化了融合蛋白TAT-LMP-3,在体外培养目的人真皮成纤维细胞中证实TAT-LMP-3融合蛋白目的穿膜转导具有浓度和时间依赖性.结论 成功进行了TAT-LMP-3融合蛋白目的原核表达、纯化和鉴定,初步验证了TAT-LMP-3目的穿膜转导能力,为应用TAT-LMP-3融合蛋白治疗脊柱融合目的实验研究奠定了基础.
关键词： 基因产物 TAT 膜蛋白质类/生物合成 -
GRP78蛋白在鼻咽癌C666-1放射存活亚克隆中的表达
目的 分析C666-1放射存活亚克隆的放射敏感性并分析其GRP78蛋白的表达水平.方法 首先使用大剂量8Gy的X射线照射C666-1,三个存活亚克隆被挑选,并被命名为C666-1-R1、C666-1-R2和C666-1-R3;然后通过MTT和台盼蓝染色法分析细胞系的放射敏感性,应用western blot分析三个存活亚克隆及母本C666-1的GRP78表达水平.结果 在6Gy放射后,三个亚克隆的细胞存活率均高于母本细胞株C666-1,尤其C666-1-R2显著增高(P＜0.05);另一方面,各亚克隆的GRP78表达均高于母本C666-1(P＜0.05).结论 放射存活亚克隆C666-1-R2具有放射抵抗性,GRP78在存活亚克隆中高表达;GRP78可能是鼻咽癌治疗的一个理想靶标.
关键词： 膜蛋白质类/生物合成 鼻咽肿瘤/放射疗法/代谢 辐射耐受性 克隆 分子
