首页 > 文献资料
-
敲低卷曲螺旋结构域蛋白34表达对膀胱癌T24细胞增殖、迁移和侵袭能力的影响
目的 研究应用慢病毒介导的RNA干扰(RNA interference)技术敲低卷曲螺旋结构域蛋白34(CCDC34)的表达,分析其对膀胱癌T24细胞生物学行为的影响.方法 选取膀胱癌T24细胞分别同时感染阴性对照siRNA(阴性对照组)和CCDC34-siRNA(CCDC34干扰组)慢病毒载体,荧光显微镜下观察慢病毒感染效率;实时定量PCR和Western blot验证CCDC34的干扰效率;BrdU掺入实验、流式细胞术、划痕实验和Transwell小室侵袭实验检测干扰CCDC34表达对T24细胞增殖、凋亡、迁移及侵袭能力的影响.结果 与阴性对照组相比,感染CCDC34-siRNA的T24细胞中CCDC34 mRNA及蛋白表达水平均显著下降.BrdU实验显示CCDC34干扰组的细胞增殖能力较阴性对照组受到显著抑制(P<0.05),且细胞凋亡显著增加[(8.77±0.38)%vs.(3.91±0.08)%,P<0.01].划痕实验显示,慢病毒感染24 h后CCDC34干扰组的细胞迁移率显著低于阴性对照组(0.40±0.04 vs.0.79±0.01,P<0.01).Transwell侵袭实验同时显示CCDC34干扰组膀胱癌T24细胞的侵袭率也显著低于阴性对照组(1.44±0.03 vs.1.63±0.05,P<0.05).结论 慢病毒介导的RNA干扰技术可下调CCDC34蛋白在T24细胞中的表达,显著抑制了膀胱癌T24细胞的增殖、迁移和侵袭能力,并促进了肿瘤细胞的凋亡.CCDC34有望成为膀胱癌生物标记物和治疗的潜在新靶点.
关键词： 膀胱肿瘤 卷曲螺旋结构域蛋白34 细胞增殖 迁移 侵袭 -
卷曲螺旋结构域蛋白34对宫颈癌细胞生物学行为的影响研究
目的 探讨卷曲螺旋结构域蛋白34(CCDC34)在宫颈癌细胞中的表达及其对宫颈癌细胞增殖、凋亡、迁移和侵袭力的影响.方法 收集南方医科大学第三附属医院妇产科2014-2016年间的16例宫颈鳞癌标本和16例慢性宫颈炎组织标本.荧光定量RT-PCR及Western Blot检测宫颈癌组织和细胞中CCDC34的表达;通过构建CCDC34慢病毒载体干扰CCDC34的表达,荧光定量RT-PCR和Western blot验证CCDC34的干扰效果.使用噻唑蓝(MTT)法、BrdU掺入实验、Transwell小室侵袭实验、流式细胞术来检测干扰CCDC34对Hela细胞增殖、迁移、侵袭能力及凋亡的影响.应用Caspase-3活性检测试剂盒及Western blot检测沉默CCDC34后Caspase-3的活性变化及在蛋白水平的表达.结果 CCDC34在宫颈癌细胞及组织中高表达;MTT及BrdU掺入实验显示,CCDC34干扰组的细胞增殖能力较对照组显著降低(P＜0.05);Transwell迁移与侵袭实验显示,CCDC34干扰组穿膜细胞数与对照组相比显著减少[(57±7.9)个/200倍视野vs.(98±9.2)个/200倍视野,P＜0.05;(33±5.2)个/200倍视野vs.(70±5.7)个/200倍视野,P＜0.05],细胞凋亡显著增加[(27.60±5.30)％vs.(9.45±1.90)％]及Caspase-3的活性明显增强.结论 沉默CCDC34的表达可显著抑制宫颈癌细胞的增殖、迁移和侵袭,促进细胞凋亡.
关键词： 宫颈肿瘤 卷曲螺旋结构域蛋白34 细胞增殖 细胞凋亡 侵袭
