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  • 依赖利福平结核分枝杆菌的分子生物学研究

    作者:钟敏;温博海;陈荣;陈炜;王易伟;王安容;钟明

    目的从分子生物学的角度研究依赖利福平结核分枝杆菌(依R菌).方法采用DNA自动测序仪,对菌株rpoB基因片段(319 bp)的序列进行分析;采用随机扩增DNA聚丙酰胺凝胶电泳(RAPD-PAG)指纹分型法,对菌株的DNA指纹进行分型;采用SDS聚丙酰胺凝胶蛋白电泳法,对菌株的菌体蛋白进行分析.结果 30株依R菌rpoB基因的突变率为 96.7%(29/30),37株耐利福平结核分枝杆菌(耐R菌)为 81.1%(30/37)( P<0.01),依R菌和耐R菌的突变高发位点均为531位 (37/59,63.2%;)密码子、突变,其次为516位(13/59,22.8%)和526位(7/59,12.3%);依R菌和耐R菌两组菌株的DNA指纹结果可分为5种类型,其中以Ⅱ型(31/67,46.2%)、Ⅰ型(20/67,29.9%)和Ⅲ型 (13/67,19.4%)为主;3种主要类型的指纹在两组菌株中的分布无明显特殊性;依R菌在含R管和对照管中的菌体蛋白电泳图谱有76.7%(23/30)的不同,其在含R管中菌体蛋白表达丰富,且在分子量 31 000~43 000间有一宽带;37株耐R菌其两管的菌体蛋白电泳图谱各自均相同.结论依R菌和耐R菌的基因型密切相关;依R菌的蛋白表达可依赖于R.

  • 胰岛素受体基因多态性与缺血性脑血管病的关系

    作者:张颖冬;石铸;刘阳

    本研究拟在分析脑梗死患者胰岛素受体(INSR)基因突变热区第17、20外显子序列变异的基础上,探讨该基因在脑血管病发病中的作用。 1.资料与方法:缺血性脑卒中患者149例,其中动脉粥样硬化(AS)性血栓性脑梗死(ACI)68例,男46例,女22例,年龄(66.6±9.5)岁;腔隙性脑梗死(LI)81例,男51例,女30例,年龄(66.4±9.8)岁。同时选择年龄、性别匹配的健康体检者62例作为正常对照者(HC),男40例,女22例,年龄(65.3±7.3)岁。对3组间分别以χ2 检验性别(χ2 =0.27,P>0.05)、以F检验年龄(F=2.52,P>0.05)差异未见显著性。以苯酚-氯仿法抽提白细胞基因组DNA;根据Seino等[1]对INSR基因研究,PCR扩增第17、20外显子序列;以8%非变性聚丙酰胺凝胶(Acr∶Bis为49∶1)电泳对扩增产物进行单链构像多态性(SSCP)分析。血糖(Glu)、甘油三酯(TG)、胆固醇(TC)、低密度脂蛋白(LDL)、高密度脂蛋白(HDL)、载脂蛋白(Apo)B和ApoA-Ⅰ等由医院检验科测定。

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