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A型呼吸道合胞病毒荧光定量逆转录PCR检测方法的建立与应用
人呼吸道合胞病毒(human respiratory syncytial virus,hRSV)是引起婴幼儿冬春季下呼吸道感染常见、重要的病原体之一[1].根据病毒表面糖蛋白的抗原差异,可分为A、B两型,在我国流行的以A型RSV为主[2].本实验室在建立RSV逆转录(RT)-PCR检测方法的基础上,利用Taqman荧光定量PCR技术,建立了A型RSV荧光定量RT-PCR检测方法,有利于RSV的快速诊断和型别鉴定.
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荧光定量逆转录聚合酶链反应检测外周血 Wilm′s瘤基因的表达
Wilm′s瘤基因(WT1)位于人类染色体11P13,与Wilm′s瘤的发生密切相关.近年发现WT1在白血病细胞中高度表达[1],可作为检测微小残留病(MRD)的指标.为此我们采用荧光定量逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)技术,检测了不同类型白血病患者外周血WT1的表达水平,现报道如下.一、材料和方法1.标本:69例白血病患者均符合FAB诊断标准,年龄2.2~70岁.对照组为18例非白血病患者和健康志愿者14名,年龄21~24岁.2.总RNA的提取及cDNA合成:2 ml EDTA抗凝血,提取外周血总RNA,260~280
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荧光定量逆转录-聚合酶链反应检测白血病WT1 基因表达及动态监测的研究
Wilm瘤基因(WT1)在白血病细胞中高表达提示其可作为一种广谱的白血病标志,但早期由于定性或半定量RT-PCR技术的局限性使其在微小残留病(MRD)诊断中的价值难以得到一致认可.为此我们采用实时荧光定量(FQ)-RT-PCR技术,检测了不同类型白血病患者WT1基因的表达;并对部分急性白血病(AL)患者外周血WT1基因表达跟踪检测,以探讨WT1基因表达用于MRD检测的可行性.
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荧光定量逆转录-聚合酶链反应检测β地中海贫血患者β与γ珠蛋白mRNA表达水平
实时荧光定量PCR方法(FQ-PCR)克服了已有的定量PCR方法的缺点,特异性强,定量准确[1].我们应用实时荧光定量RT-PCR(FQ-RT-PCR)方法对β地中海贫血(β地贫)患者β与γ珠蛋白mRNA水平进行检测,现将结果报告如下.
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妊娠滋养细胞肿瘤患者外周血肿瘤细胞检测方法的研究
本文通过荧光定量逆转录-聚合酶链反应(FQ-RT-PCR),检测β-hCG-mRNA,建立在外周血中检出滋养细胞方法,推测妊娠肿瘤患者外周血中滋养细胞的含量,为肿瘤的发展转移做预防.
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人甲状腺组织中钠碘转运体基因表达的研究
钠碘转运体(The sodium-iodide symporter-NIS)定位于甲状腺滤泡细胞的基底外侧膜,将2个钠离子和1个碘离子同时转运人甲状腺细胞,从而形成甲状腺细胞内碘的浓聚.我们采用实时荧光定量逆转录一聚合酶链反应(Real timeQuantitative PCR)方法测定人甲状腺乳头状癌及转移淋巴结组织中NIS mRNA的表达,探讨hNIS mRN-A和甲状腺乳头状癌及转移淋巴结的关系.